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檢測腫瘤患者侵襲性真菌病的最佳檢測方法是什么?本文將給你帶來(lái)答案!


臨床醫學(xué)檢驗技師考試專(zhuān)業(yè)真題


每日一練

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B


一、何謂侵襲性真菌???

1.侵襲性真菌病又稱(chēng)侵襲性真菌感染(invasivefungalinfections,IFIs),是指真菌入侵人體組織、血液,經(jīng)生長(cháng)繁殖對機體組織、器官功能造成損害,并引發(fā)炎性反應的一種感染性疾病。

2.侵襲性真菌病的流行病學(xué)

最常見(jiàn)的病原菌是以念珠菌為主的酵母樣真菌和以曲霉為主的絲狀真菌引起的感染最為常見(jiàn)。分別占到70%~90%和10%~20%。

近年來(lái),隨著(zhù)腫瘤患者手術(shù)和放化療等治療技術(shù)的廣泛開(kāi)展,由惡性腫瘤、免疫缺陷、移植患者數目的增多以及長(cháng)期應用廣譜抗生素、延長(cháng)體內留置導管時(shí)間等,侵襲性真菌病發(fā)生率呈逐年上升趨勢。

例如,重癥監護病房?jì)然颊叩陌l(fā)病率約占8%~15%,器官移植受者的發(fā)病率為20%~40%,血液系統腫瘤患者的發(fā)病率達31%。

據不完全統計,全球150萬(wàn)種真菌中有400多種可以導致嚴重的人類(lèi)感染。相比于其他微生物感染,臨床對于真菌感染的認識不深、診斷方法有限、很多病人未能得到及時(shí)的診治。侵襲性真菌感染每年奪走160萬(wàn)人的生命,死亡人數等同于瘧疾和結核(Bongominetal.2017)。

侵襲性真菌病常見(jiàn)于免疫功能低下人群,近年來(lái),,患者受到真菌感染的發(fā)生率呈明顯上升趨勢,如何及時(shí)診斷并有效地治療侵襲性真菌病受到越來(lái)越多的關(guān)注。


二、真菌檢驗技術(shù)介紹

1.目前,真菌檢驗技術(shù)主要包括

①真菌培養

②組織病理學(xué)檢查

③真菌涂片鏡檢

④血清學(xué)檢測

⑤分子生物學(xué)技術(shù)。

2.真菌檢驗技術(shù)的優(yōu)勢與劣勢比較

真菌培養和組織病理學(xué)檢查是真菌病最傳統的診斷方法。但是這兩種檢驗方法具有如下缺點(diǎn):

①真菌培養的缺點(diǎn):

◆如果取材自非無(wú)菌部位,則無(wú)法確定是否為感染。

◆如以侵入性檢查從無(wú)菌部位獲取待測樣本,一般患者難以依從,重癥患者一般難以實(shí)施。

◆培養需要較長(cháng)時(shí)間。雖然新型培養基、自動(dòng)化血培養系統的出現顯著(zhù)降低了微生物培養時(shí)間,然而未有明確證據表明這類(lèi)進(jìn)展可以提升診斷的敏感性。

◆后續的鏡檢應當由經(jīng)驗豐富的檢驗人員操作。

②組織病理學(xué)檢查的缺點(diǎn):

◆雖然其作為常用的確診方法,但缺乏靈敏性和精確性。比如同一菌種的菌絲,在鏡下會(huì )表現出不同的形態(tài)。當需要將曲霉同其他絲狀菌區分以指導選擇抗真菌藥時(shí),組織病理學(xué)檢查結果常會(huì )出現問(wèn)題。

③真菌涂片鏡檢的優(yōu)點(diǎn)與缺點(diǎn):

◆比上述兩種方法更快速、簡(jiǎn)單,成本也更低。

◆直接鏡檢受主觀(guān)因素影響較大,對檢驗技術(shù)要求高,由于實(shí)驗室人員識別能力參差不齊,其陰性并不能明確排除真菌感染。

④血清學(xué)檢測技術(shù)可大致分為抗原檢測和抗體檢測兩類(lèi)。

抗原檢測包括:G試驗、GM試驗、GXM試驗(隱球菌莢膜多糖)、Mn試驗(念珠菌甘露聚糖)等。

抗體檢測包括:各個(gè)屬特異性IgM、IgG抗體檢測。

G試驗檢測靶標為真菌細胞壁非特異性成分(1-3)-β-D葡聚糖,主要用于全真菌非特異性快速篩查(除隱球菌和接合菌外),為國內外指南推薦的真菌篩查技術(shù)。G試驗可大致區分定殖或者侵襲性感染。G試驗根據其發(fā)展,可分為三代。前兩代樣本處理使用“加熱稀釋法”,第三代樣本處理法為堿處理法,從而大大減少了交叉反應。第三代G試驗結果讀取基于動(dòng)態(tài)顯色法,檢驗時(shí)間大致為1h。

◆第三代準確性高、穩定性強、抗干擾強。同時(shí)G試驗對于侵襲性感染早期診斷意義很大。

三、相對于真菌培養技術(shù)耗時(shí)較長(cháng),組織病理學(xué)檢查缺乏靈敏性等原因,血清學(xué)檢測和實(shí)時(shí)PCR技術(shù)已發(fā)展成熟,采集血液標本易于常規實(shí)驗室開(kāi)展。

1.歐洲癌癥研究和治療組織/侵襲性真菌感染協(xié)作組(EORTC/IFICG)標準、美國真菌病研究組(MSG)標準、美國抗感染學(xué)會(huì )(IDSA)指南、我國《血液病/惡性腫瘤患者侵襲性真菌病的診斷標準與治療原則(第四次修訂版)》中都提到(1,3)-β-D-葡聚糖檢測(G試驗)是臨床診斷侵襲性真菌病的診斷標準之一。

四、本文著(zhù)重對血清降鈣素原(PCT)檢測、G試驗和熒光定量PCR技術(shù)在腫瘤患者侵襲性真菌病早期診斷中的價(jià)值進(jìn)行總結。

經(jīng)臨床研究比較這3種檢驗方法發(fā)現:

◆ (1,3)-β-D-葡聚糖可用于輔助侵襲性真菌病的早期診斷。但隱球菌、結核分枝桿菌引起的感染G試驗為陰性或輕度升高。

◆ 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測的陽(yáng)性率>G試驗>PCT檢測,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測和G試驗對侵襲性真菌病早期診斷中具有重要參考價(jià)值。

五、早期診斷侵襲性真菌病的檢驗方式具有什么臨床價(jià)值呢?

1.腫瘤患者在接受化療后,由于自身免疫力低下容易引起侵襲性真菌病??焖?、準確確定侵襲性真菌病的致病菌,選擇合適的檢測方法和指標對于早期診斷和治療侵襲性真菌病有重要價(jià)值,可有效降低因炎癥反應而導致的病理改變,以及死亡。

2.PCR技術(shù)具有耗時(shí)短,污染少,靈敏度、特異度高,以及重復性好的特點(diǎn),陽(yáng)性率高于血清PCT和(1,3)-β-D葡聚糖檢測,是早期診斷侵襲性真菌病的最佳檢驗方法。

六、未來(lái)真菌檢驗技術(shù)的發(fā)展

近年來(lái)材料學(xué)以及生物傳感器領(lǐng)域不斷突破,病原體診斷、鑒定和定量分析的新方法和儀器方面得到了突飛猛進(jìn)的發(fā)展。如微流控芯片實(shí)驗室技術(shù)平臺以及納米技術(shù)增強了檢測的敏感性、特異性和速度,因此各種基于恒溫擴增的lab-on-chip 裝置被廣泛開(kāi)發(fā)并擬用于臨床病原體的檢測。相信隨著(zhù)以上早期診斷技術(shù)的不斷應用、改進(jìn)和創(chuàng )新,將使未來(lái)真菌病早期診斷技術(shù)將更加快速、準確,同時(shí)對臨床治療和流行病學(xué)的研究產(chǎn)生重要的影響。 

本文為原創(chuàng )文章,屬醫家小二首發(fā),作者:簡(jiǎn)川,感謝作者來(lái)稿!為尊重作者版權,未經(jīng)授權請勿轉發(fā)。

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