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侵襲性真菌病的早期診斷:GM試驗和G試驗檢測大揭秘

2017-06-08 15:40 來(lái)源:丁香園 作者:龍之醫

侵襲性真菌?。╥nvasive fungal disease,IFD),系指在宿主免疫功能低下或缺陷時(shí),由于條件致病性真菌侵入人體,在組織、器官或血液中生長(cháng)、繁殖,并導致炎癥反應及組織損傷的疾病。IFD 在血液病、惡性腫瘤、器官移植及長(cháng)期應用廣譜抗生素、糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑等患者中的發(fā)病率和病死率呈上升趨勢。

真菌感染診斷技術(shù)現狀:真菌感染的確診需要組織病理學(xué)的證據,惡性血液病患者在化療后及異基因骨髓移植術(shù)后經(jīng)常出現嚴重的粒細胞缺乏和血小板減少,常常無(wú)法耐受組織活檢。而傳統真菌檢測方法檢出率低和檢出時(shí)間滯后,影響了患者的早期診斷與治療,導致死亡率居高不下。痰培養真菌的檢出率 [1] 僅為 8%~34%,支氣管灌洗液真菌培養的陽(yáng)性率也只有 45%~62%,檢出時(shí)間 3~4 d。

肺部高分辨 CT 檢查可以幫助診斷 IFI。33%~60% 的 IFI 患者可出現月暈征,這一特征性影像改變僅在真菌感染發(fā)生的最初 5 d 內出現,其中大約 75% 的患者的月暈征會(huì )在 l 周內消失,因此限制了高分辨 CT 在 IFI 的早期診斷中的應用。因此,迫切需要一些創(chuàng )傷小,耐受性好,敏感性和特異性均較高的檢測方法,幫助臨床醫生早期診斷 IFI,及時(shí)合理的應用抗真菌藥物。

真菌抗原檢測具有簡(jiǎn)便、快速、敏感度高和特異性較好的優(yōu)點(diǎn),是目前 IFI 研究的一個(gè)熱點(diǎn)。

G 試驗檢測的是一種廣泛存在于多種真菌細胞壁中的多糖成分 1,3-β-D 葡聚糖(除了接合菌和隱球菌),它可以激活 G 因子,并激發(fā)凝血級聯(lián)反應,形成凝固蛋白后通過(guò)比色法或比濁法進(jìn)行定量檢測。在真菌感染過(guò)程中,1,3-β-D 葡聚糖可釋放人血液及其他體液中,G 試驗對侵襲性深部真菌感染的早期診斷有重大意義,可用于念珠菌屬、曲霉屬、毛孢子菌等所致侵襲性感染的診斷,局限性是不能確定菌種。

GM 試驗檢測的是半乳甘露聚糖,因曲霉菌特有的細胞壁多糖成分是β(1-5) 呋喃半乳糖殘基,菌絲生長(cháng)時(shí),半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放,是最早釋放的抗原。GM 釋放量與菌量成正比,因此可以反映感染程度。主要適用于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷,通過(guò) ELLISA 進(jìn)行定量測量,美國 FAD 推薦敏感閾值為 0.5 ng/mL。

G 試驗和 GM 試驗都存在假陽(yáng)性和假陰性的情況。

G 試驗已知的假陽(yáng)性有:①靜脈制劑中含有葡聚糖,如白蛋白、免疫球蛋白、血液制品或凝血因子等;②醫療材料中含有葡聚糖,如血透時(shí)應用的纖維素膜、紗布等;③鏈球菌敗血癥患者;④多糖類(lèi)的抗癌藥物等。而假陰性可能是淺部真菌感染或定制時(shí),1,3-β-D 葡聚糖未被釋放出來(lái)使體液中的量不增高,故其血漿檢測呈陰性。

GM 試驗已知的假陽(yáng)性有:①使用半合成青霉素尤其是哌拉西林 / 他唑巴坦;②食用污染的谷類(lèi)及牛奶等高蛋白食物;③某些葡萄糖酸鹽制劑;④自身免疫性肝病、新生兒和兒童等。其假陰性與取材時(shí)間、病情嚴重程度、體內分解代謝、試驗最低限度等有關(guān)。臨床上,大多數時(shí)候造成 G 試驗和 GM 試驗假陽(yáng)性、假陰性的原因不明,兩者聯(lián)合檢測可在一定程度上提高血清學(xué)檢查的敏感性或特異性。

聯(lián)合檢測的優(yōu)勢:根據于書(shū)嫻等 [2] 關(guān)于 G 試驗和 GM 試驗對侵襲性真菌病診斷價(jià)值的 Meta 分析研究,聯(lián)合試驗靈敏度可以達到 0.88,特異度可達到 0.81。G 試驗的敏感性?xún)?yōu)于 GM 試驗,特異性相似。并聯(lián)(一者為陽(yáng)性結果為陽(yáng)性)的敏感性?xún)?yōu)于串聯(lián)(二者均為陽(yáng)性結果為陽(yáng)性),串聯(lián)的特異性?xún)?yōu)于并聯(lián)。單獨檢測時(shí),G 試驗和 GM 試驗診斷效果相似;聯(lián)合檢測比單獨檢測有較高的診斷效果,且串聯(lián)時(shí)診斷效果最好。并且據任麗娜等 [3] 研究中顯示,在臨床抗真菌治療過(guò)程中,根據血清 GM 含量的變化進(jìn)行療效監測,調整治療方案及判斷預后,對提高疾病的治愈率、降低病死率有重要的參考價(jià)值。

參考文獻:

[1] 冷蕓、李利紅,血清半乳甘露聚糖檢測診斷惡性血液病患者侵襲性真菌感染的臨床意義,白血病·淋巴瘤,2010.7,19(7).

[2] 于書(shū)嫻、崔學(xué)范等,G 試驗和 GM 試驗對侵襲性真菌病診斷價(jià)值的 Meta 分析,中華肺部疾病雜志,2016.4,9(22).

[3] 任麗娜、周悅昌等,血清半乳甘露聚糖抗原檢測在侵襲性肺曲霉菌病診斷及治療監測中的應用,臨床醫藥文獻雜志,2015.8,A2(22).

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