時(shí)間：2013-03-11 來(lái)源：中國沉香網(wǎng)編輯整理 點(diǎn)擊：1990
摘 要: 用零階導數光譜、薄層層析特征對正品沉香和非習用沉香進(jìn)行 了比較研究，為正品沉香與非習用沉香準確鑒別提供了一個(gè)依據。
沉香為臨床上較為常用的名貴中藥材，系瑞香科植物白木香 Aqu ilaria sinensis (Lour.) Gilg 及沉香 A. agallocha Roxb. 含樹(shù)脂的木材，前 者習稱(chēng)國產(chǎn)沉香，后者習稱(chēng)進(jìn)口沉香；有行氣止痛、溫中止嘔、納氣平喘的功效［1］ ，后者揮發(fā)油含量比較高(約13%)［2］，又因較為常用而稱(chēng)為習用沉香。近年來(lái)， 由于沉香價(jià)格大幅度上漲，有些不法商人為牟取暴利，進(jìn)口非習用沉香，代替習用進(jìn)口沉香 ，造成嚴重不良的后果。臨床上，病人在服用后較短的時(shí)間內，立即表現出胃腸嚴重痙攣、 腹痛、腹瀉甚至造成虛脫，同時(shí)還伴有上呼吸道、口腔內膜、臉部等部位過(guò)敏、充血等癥狀 。近年來(lái)，有人分別報道了沉香的 TLC 和 UV 一階導數光譜鑒別［3，4］，但由于 所用條件不同，圖譜時(shí)有繁雜不易重復，為保證臨床用藥的安全有效，我們對沉香及其非習 用沉香的導數光譜、薄層分析等進(jìn)行了研究和比較，找到了一個(gè)快速、準確的鑒別方法，特 介紹如下：
1 材料及儀器
1.1 材料：沉香藥材由廣東揭陽(yáng)購得(1#，2#)；沉香藥材對照品(3#)，由中國藥科 大學(xué)生藥室金蓉鸞教授提供。試劑均為AR級。
1.2 儀器：島津 UV-265 型自動(dòng)記錄分光光度計(日本)，3用紫外線(xiàn)分析儀(上海顧材電 光儀器廠(chǎng))。
2 方法與結果
2.1 方法
2.1.1 零價(jià)導數光譜法：將上述3種實(shí)驗藥材分別粉碎，過(guò) 40 目篩。分別取粉末 1 g， 加 95% 甲醇 20 mL。超聲提取 30 min，靜置、冷卻，過(guò)濾，取濾液適量，用 95% 甲醇稀 釋至含生藥 2 mg/mL，在 UV-265 型紫外分光光度計上，于 190～300 nm 范圍測其零階導 數光譜圖。掃描速度 800 nm/min，狹縫 2 nm。
2.1.2 薄層層析法：取上述藥材粉末 1 g，加入石油醚 (60 ℃～90 ℃) 20 mL，超聲提 取 30 min，靜置冷卻，過(guò)濾，濾液蒸干，殘渣加石油醚 (60 ℃～90 ℃) 溶解，即得。各 取供試品溶液 2 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠 G 薄層板上，以苯-丙酮 (9∶1) 為展開(kāi)劑，展 開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈 (365 nm) 下檢視。
2.2 結果：2 種供試品沉香與沉香對照品的紫外光譜見(jiàn)圖1，薄層層析見(jiàn)圖2。
圖1 甲醇提取物的對照紫外光譜圖
圖2 石油醚提取物的對照薄層圖
3 討論
3.1 由上述實(shí)驗結果可知，1#與3#對照品沉香的零階導數光譜圖、薄層層析熒光斑點(diǎn) 相似，2#沉香與3#對照品則存在很大的差異，即2#沉香的零階光譜圖在 (284±2 nm 處有較強的吸收峰，而 1# 沉香、3# 對照品則沒(méi)有。
3.2 為了確認這個(gè)結果，我們做了兩方面的工作：1)用氣質(zhì)聯(lián)用色譜儀分析 1#，2# ，3# 對照品沉香。結果顯示 1#，3# 對照品沉香均含有可信度達 89% 的沉香特征成 分，即沉香螺醇；而 2# 沉香則無(wú)此特征成分。2)藥理試驗表明，1# 樣沉香能促進(jìn)胃 腸蠕動(dòng)，2# 樣沉香能使胃腸激烈蠕動(dòng)，并糞便中伴有大量的水樣性物質(zhì)，進(jìn)一步說(shuō)明兩 者之間的藥效差異。
3.3 我們已用該方法鑒別了多批 沉香原料，符合上述結果的為正品沉香，用藥安全。因此 ，我們認為，本文具有一定的推廣價(jià)值。沉香原料的檢驗應在現行藥典的基礎上，增加零階 導數光譜法和薄層層析法鑒別，以保證用藥安全。但 2# 沉香中的致瀉、致過(guò)敏的成分尚 有待于進(jìn)一步的探討。
在沉香木中采香的過(guò)程
時(shí)間：2013-11-20 來(lái)源：中國沉香網(wǎng)編輯整理 點(diǎn)擊：3329
目標是這一顆樹(shù)上的小洞
敲開(kāi)樹(shù)木上小洞的樣子
截取之后開(kāi)始勾出白木
鉤完白木之后的樣子
白木差不多都被剔除了
最后是被截香后樹(shù)的樣子
沉香的化學(xué)成分與鑒定
時(shí)間：2013-07-30 來(lái)源：中國沉香網(wǎng)編輯整理 點(diǎn)擊：6154
沉香的丙酮提取物(40％～50％)經(jīng)皂化后蒸餾，得揮發(fā)油l3％，其中含芐基丙酮、對甲氧基芐基丙酮等，殘渣中有氫化桂皮酸、對甲氧基氫化桂皮酸等。霉菌感染的沉香含沉香螺醇(Agarospi—rod、沉香醇(Agar01)、沉香呋喃(Aga—rofu—ran)、二氫沉香呋喃、4一羥基二氫沉香呋喃、3，4一二羥基二氫沉香呋喃、去甲沉香呋喃酮(Nor—ketoagar0—furan)、未感染的含硫、芹子烷(Selinane)、沉香醇等。
l．白木香：從含樹(shù)脂的木質(zhì)部石油醚提取物中分得三種沉香螺旋烷類(lèi)倍半萜—白木香酸、白木香醛、沉香螺旋醇，又從含樹(shù)脂木質(zhì)部揮發(fā)油中分得兩種沉香呋喃類(lèi)倍半萜一白木香醇和去氫白木香醇。
2．沉香：沉香的丙酮提取物，經(jīng)皂化后蒸餾，提揮發(fā)油。黃花梨手串其中含芐基丙酮、對甲氧基芐基丙酮等，殘渣中有氫化桂皮酸、對甲氧基氫化桂皮酸。霉菌感染的沉香含沉香螺旋、沉香醇、沉香呋喃、二氫沉香呋喃、4一羥基二氫沉香呋喃、去甲沉香呋喃酮、3、4一二羥基二氫沉香呋喃、未感染的含硫、芹子烷、沉香醇等。中國藥材學(xué)： (1)國產(chǎn)沉香心材中分離得白木香醇(baimuxin01)、去氫白木香醇(dehydrobaimux—in—01)、白木香酸(baimuxinic acid)、白木香醛(baimuxinal)、沉香螺萜醇(agarospir01)、異白木香(isobaimuxin01)、芐基丙酮(benzylacetone)、對甲氧基芐基丙酮(P—methoxybenzylacetone)、茴香酸(anisic acid)及l(fā)3一沉香萜呋喃(13一agaro{u—ran)；9個(gè)色酮類(lèi)化合物，為6一羥基一[2一(4一甲氧基苯)乙基]色酮、2一(2一苯乙基)色酮、6一甲氧基一2一(2一苯乙基)色酮、6，7一二甲氧基一2一(2～苯乙基)色酮、6一甲氧基一2一(2一(3 一甲氧基苯)乙基]色酮、6一羥基一2一(2一苯乙基)色酮、5．8一二羥基一2一(2一對甲氧基苯乙基)色酮及(6，7一二甲氧基苯乙基)色酮。揮發(fā)油中含倍半萜化合物呋喃白木香醛和呋喃白木香醇。 (2)進(jìn)口沉香含油樹(shù)脂。其醇浸提物(達48％)經(jīng)皂化后，通水蒸餾得揮發(fā)油約l3％，油中含有芐基丙酮(benzylacetone)、對甲氧基芐基丙酮、倍半萜烯醇等；蒸餾后殘渣中有氫化桂皮酸(hy—drocinnamic acid)、對甲氧基氫化桂皮酸。
受霉菌感染的沉香的揮發(fā)油中分離得沉香螺萜醇(agarospi—rod、沉香萜醇(agar01)、α一及β一沉香萜呋喃(a一．b一agarofuran)、二氫沉香萜呋喃(dihydr0～agarofuran)、去甲基沉香萜呋喃酮(nor～ketoagar-ofuran)、4一羥基二氫沉香萜呋喃(4一hydroxydi—hydroagarofuran)及3，4一二羥基二氫沉香萜呋喃(3，4一dihydroxydihydroagarofuran)。又據報道，未受霉菌感染的沉香的揮發(fā)油中，尚分離出沉香萜醇、芹子烷(selinane)等萜類(lèi)化合物以及癸烯的異構物．并含鵝掌楸堿。 來(lái)源《中藥瑰寶沉香》
白木香種子揮發(fā)油的化學(xué)成分及抗菌活性研究
時(shí)間：2013-09-02 來(lái)源：中國熱帶農業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所 點(diǎn)擊：1442
摘要 采用石油醚浸提法提取白木香種子的揮發(fā)油,用濾紙片瓊脂擴散法測定白木香種子揮發(fā)油的抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)活性,結果表明樣品具有弱抗MRSA活性,并用GC2MS技術(shù)鑒定了其中的19個(gè)化學(xué)成分。
關(guān)鍵詞 白木香;種子;揮發(fā)油; GC2MS;抗菌活性
瑞香科白木香Aquila ria sinensis (Lour1) Gilg是生產(chǎn)藥用沉香的植物資源,為我國特有的珍貴植物〔1〕。沉香作為名貴的香料和藥材自古以來(lái)就得到廣泛的應用。天然白木香由于長(cháng)期采伐,資源已經(jīng)越來(lái)越少,現多采自人工種植。白木香樹(shù)每年產(chǎn)大量種子,近年來(lái)隨著(zhù)白木香種植面積的不斷擴大,其種子資源日漸豐富。目前白木香種子只有少部分用于育苗,其資源未得到有效開(kāi)發(fā)利用。
長(cháng)期以來(lái)由于抗生素的廣泛使用甚至濫用,導致耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin2resistantS taphy lococcus aureus, MRSA) 等耐藥菌株的出現。MRSA對臨床上廣泛應用的多種抗生素耐藥,致感染治療困難,病死率高,已成為全世界范圍內抗感染中的難題。因而解決MRSA 耐藥性問(wèn)題已經(jīng)成為當今醫藥界的重要任務(wù)。本研究組在海南熱帶藥用植物抗MRSA活性篩選過(guò)程中,發(fā)現白木香種子揮發(fā)油顯示了一定的抗MRSA活性,并通過(guò)GC2MS 技術(shù)分析測定了白木香種子揮發(fā)油的化學(xué)成分。
1 材料與方法
111 材料 白木香種子樣品于2006年6月采于文昌沉香種植基地。由中國熱帶農業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所戴正福副研究員鑒定。憑證標本(No1 AS200606)存放于中國熱帶農業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所。
112 儀器與試劑 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀為美國惠普公司的HP6890 /5973GC /MS聯(lián)用儀。色譜柱為HP25MS 5% Phenyl Methyl Siloxane ( 3010 m ×250μm ×0125μm)彈性石英毛細管柱。減壓濃縮使用Buchi Rotavapof R2200 旋轉蒸發(fā)儀; 硫酸卡那霉素(上海生工有限公司) ;氟康唑(貴州科倫藥業(yè)有限公司,批號: A050314204) ;其他試劑均為分析純。
113 樣品處理 曬干種子樣品5716 g,經(jīng)粉碎后用石油醚浸提三次,每次用超聲波提取15 min,合并石油醚提取液,回收石油醚后得到黃色透明油狀物1219 g,得率為2215%。
114 GC2MS分析條件 程序升溫:柱溫50℃,保留1 min, 5℃/min升溫至280℃,保持20 min,氣化室溫度250℃。載氣為高純He ( 991999% ) ;柱前壓5108 p si,載氣流量210 ml/min;進(jìn)樣量1μl (丙酮溶液) ;分流比40∶1。 離子源為E I源,離子源溫度230℃; 四級桿溫度150℃;電子能量70 eV;發(fā)射電流3416μA;倍增器電壓1871 V;接口溫度280℃;質(zhì)量掃描范圍為10 ～550 amu。
115 菌株與培養基 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌955(methicillin2resistant S taphylococcus aureus, MR2SA)由中國熱帶農業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所保藏;白色念珠菌Cand ida albicans購于海南省藥品檢驗所。MRSA采用牛肉膏蛋白胨培養基〔3〕:牛肉膏3 g,蛋白胨10 g,NaCl 5 g,瓊脂20 g,定容至1L, pH710～712, 1 ×105 Pa滅菌20 min;白色念珠菌采用YPD培養基〔4〕:葡萄糖20 g,胰蛋白胨20 g,酵母粉 10 g,瓊脂20 g,定容至1L, pH 710, 1 ×105 Pa滅菌20 min。
116 抗菌活性的測定〔5〕 將種子揮發(fā)油配成濃度為50 mg/ml的樣品溶液,選用直徑為6 mm的滅菌濾紙片,濾紙片分別加樣品溶液50、60、70μl,每個(gè)梯度重復三次,待溶劑揮干后,將已點(diǎn)樣的濾紙片貼于已涂供試菌懸液100μl (菌液濃度105 ～107 cfu /ml)的瓊脂培養基上,放置20 min后,再放入培養箱37℃無(wú)光照培養, 24 h后測其抑菌圈大小。MRSA以硫酸卡那霉素作為陽(yáng)性對照,白色念珠菌以氟康唑作為陽(yáng)性對照。
2 結果
211 GC2MS分析結果 通過(guò)HPMSD 化學(xué)工作站,結果Nist 2005標準質(zhì)譜圖庫和W ILEY275質(zhì)譜圖庫進(jìn)行鑒定,采用峰面積歸一化法計算相對含量。
分析結果見(jiàn)表1。
從白木香種子揮發(fā)油中共檢出23個(gè)成分,鑒定了其中的19個(gè)化合物,含量占總油的87163%。含量最高的為棕櫚酸(23161% ) ,較高的有壬二酸雙212甲基丙酯( 13176%) 、92氧代2壬酸丁酯( 13102% ) 、92氧代2壬酸乙酯( 4141% ) 、油酸(3158% ) 、亞油酸乙酯(3165% )等。白木香種子揮發(fā)油檢出有棕櫚酸、肉豆蔻酸和油酸等脂肪酸以及2, 42二叔丁基苯酚在沉香藥材中也有發(fā)現〔6〕。但本次研究中未發(fā)現沉香特征性成分,也未發(fā)現沉香中常見(jiàn)的倍半萜類(lèi)成分
212 活性測定結果 以濾紙片瓊脂擴散法測定化合物的抗菌活性,結果表明種子揮發(fā)油對MRSA有微弱抑制作用,增大揮發(fā)油濃度,抑菌圈并未增大(表2) 。對白色念珠菌則沒(méi)有表現出活性。
3 討論
近年來(lái)海南和廣東等地的白木香種植面積不斷擴大,每年產(chǎn)大量的種子,其資源未得到有效開(kāi)發(fā)利用。本次研究結果表明白木香種子揮發(fā)油具有一定的抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA ) 活性。MRSA對多種抗生素耐藥,而且突變速度極快,被稱(chēng)為“超級細菌”,已成為難題。研究結果為白木香種子的開(kāi)發(fā)提供了新的科學(xué)依據。（作者：劉 俊,梅文莉,崔海濱,吳 嬌,戴好富）
