第一章
1、蛋白質(zhì)的三維結構稱(chēng)為構象,指的是蛋白質(zhì)分子中所有原子在三維空間中的排布,并不涉及共價(jià)鍵的斷裂和生成所發(fā)生的變化。
2、維持和穩定蛋白質(zhì)高級結構的因素有共價(jià)鍵(二硫鍵)和次級鍵,次級鍵有4種類(lèi)型,即離子鍵、氫鍵、疏水性相互作用和范德瓦力。
3、蛋白質(zhì)的二級結構是指肽鏈中局部肽段的構象,它們是完整肽鏈構象(三級結構)的結構單元,是蛋白質(zhì)復雜的立體結構的基礎,因此二級結構也可以稱(chēng)為構象單元。α螺旋、β折疊是常見(jiàn)的二級結構。
4、一些肽段有形成α螺旋和β折疊兩種構象的可能性(或形成勢),這類(lèi)肽段被稱(chēng)為兩可肽。
5、兩個(gè)或幾個(gè)二級結構單元被連接肽段連接起來(lái),進(jìn)一步組合成有特殊幾何排列的局域立體結構,稱(chēng)為超二級結構。超二級結構的基本組織形式有αα,βαβ和ββ等3類(lèi)。
6、蛋白質(zhì)家族:一類(lèi)蛋白質(zhì)的一級結構有30%以上同源性,或一級結構同源性很低,但它們的結構和功能相似,它們也屬于同一家族。例如球蛋白的氨基酸序列相差很大,但屬于同一家族。
超家族:有些蛋白質(zhì)家族之間,一級結構序列的同源性較低,但在許多情況下,它們的結構和功能存在一定的相似性。這表明它們可能存在共同的進(jìn)化起源。這些蛋白質(zhì)家族屬于同一超家族。
7、結構域是一個(gè)連貫的三維結構,是可互換并且半獨立的功能單位,在真核細胞中由一個(gè)外顯子編碼,由至少40個(gè)以上多至200個(gè)殘基構成最小、最緊密也最穩定的結構,作為結構和功能單位,會(huì )重復出現在同一蛋白質(zhì)或不同蛋白質(zhì)中。
8、蛋白質(zhì)一級結構所提供的信息有哪些?
①同源蛋白質(zhì)的物種差異與生物進(jìn)化。不同物種之間可變殘基差異的數目可提供物種之間親源關(guān)系遠近的信息。
②可以從一級結構推測出蛋白質(zhì)的高級結構。
③在蛋白質(zhì)數據庫中,可根據某種蛋白質(zhì)或其肽段的一級結構對數據庫進(jìn)行同源性搜索,與已知蛋白質(zhì)進(jìn)行序列比較。
④在搜索功能上可能無(wú)關(guān)的蛋白質(zhì)中發(fā)現有相關(guān)的同源性序列,揭示了一些蛋白質(zhì)還可能具有未被認識的新功能。
9、α-螺旋、β-折疊各自的特點(diǎn)?
①α-螺旋的特點(diǎn):◆蛋白質(zhì)多肽鏈像螺旋狀盤(pán)曲,每隔3.6個(gè)氨基酸殘基沿中心軸螺旋上升一圈,每上升一圈沿螺旋軸方向上升0.54nm,即每個(gè)氨基酸殘基向上升高0.15nm,每個(gè)氨基酸殘基沿中心軸旋轉100°?!籀?螺旋的穩定性是靠鏈內氫鍵維持的,相鄰的螺圈之間形成鏈內氫鍵,氫鍵的取向幾乎與中心軸平行。氫鍵是由每個(gè)氨基酸殘基的N-H與前面隔3個(gè)氨基酸的C=O形成的,肽鏈上所有的肽鍵都參與了氫鍵的形成,因此α-螺旋相當穩定?!籀?螺旋中氨基酸殘基的側鏈伸向外側。α-螺旋有左手螺旋和右手螺旋兩種,但天然蛋白質(zhì)的α-螺旋,絕大多數為右手螺旋。
②β-折疊的特點(diǎn):◆由兩條或多條幾乎完全伸展的肽鏈平行排列,通過(guò)鏈間氫鍵交聯(lián)而形成。肽鏈的主鏈呈鋸齒狀折疊現象,α-碳原子總是處于折疊的角上,氨基酸的R基團交替分布在片層的兩側?!籀?折疊結構的氫鍵主要是由兩條肽鏈之間形成;也可以在同一肽鏈的不同部分之間形成。幾乎所有肽鍵都參與鏈內氫鍵的交聯(lián),氫鍵與鏈的長(cháng)軸接近垂直?!籀?折疊有兩種類(lèi)型:一為平行式,即所有肽鏈的N-端都在同一邊,另一為反平行式。
第二章
1、DNA是由脫氧核糖核苷酸組成的長(cháng)鏈多聚物,是遺傳物質(zhì)。具有下列基本特性:
①具有穩定的結構,能進(jìn)行復制,特定的結構能傳遞給子代;
②攜帶生命的遺傳信息,以決定生命的產(chǎn)生、生長(cháng)和發(fā)育;
③能產(chǎn)生遺傳的變異,使進(jìn)化永不枯竭。
2、DNA鏈的方向總是理解為從5’—P端到3’—OH端。DNA的一級結構實(shí)際上就是DNA分子內堿基的排列順序。
3、DNA是雙螺旋結構:主鏈由脫氧核糖和磷酸基團以3’,5’—磷酸二酯鍵交互連接構成的,在雙螺旋的外側,堿基在內側,堿基必須配對。一條鏈繞著(zhù)另一條鏈旋轉、盤(pán)繞,一條鏈上的嘌呤與另一條鏈上的嘧啶相互配對,嘌呤與嘧啶以氫鍵保持在一起。
4、雙螺旋DNA熔解成單鏈的現象稱(chēng)為DNA變性。已經(jīng)變性的DNA在一定條件下重新恢復雙鏈的過(guò)程稱(chēng)為復性。
5、染色質(zhì)是以雙鏈DNA為骨架,與組蛋白、非組蛋白以及少量的各種RNA等共同組成絲狀結構。在染色質(zhì)中,DNA和組蛋白的組成非常穩定,非組蛋白和RNA隨細胞生理狀態(tài)不同而有變化。
6、常染色質(zhì)是在細胞間期核內染色體折疊壓縮程度較低,處于伸展狀態(tài),堿性染性著(zhù)色較淺而均勻的那些染色質(zhì)。主要是單一拷貝和中度重復序列。
異染色質(zhì)是在細胞間期核內染色質(zhì)壓縮程度較高,處于凝集狀態(tài),堿性染料著(zhù)色較深的部分。
7、核小體是構成真核生物染色質(zhì)的基本結構單位,是DNA和蛋白質(zhì)構成的緊密結構形式。
8、RNA的種類(lèi)及其各自的特點(diǎn)?
①RNA分為rRNA,tRNA,mRNA。
②rRNA二級結構為莖狀;tRNA二級結構呈三葉草形,三級結構形狀像一個(gè)倒寫(xiě)L字母;真核細胞mRNA3′端有一段長(cháng)約200核苷酸的PloyA,5′端有一個(gè)帽子結構。
③在蛋白質(zhì)合成中的作用:mRNA作為蛋白質(zhì)多肽鏈合成的直接模板,其5′端帽子結構可能與蛋白質(zhì)合成的正確起始有關(guān),可協(xié)助核糖體與mRNA相結合,使翻譯作用在A(yíng)UG處開(kāi)始。rRNA與蛋白質(zhì)結合形成核糖體,是蛋白質(zhì)合成場(chǎng)所。tRNA的主要作用是轉運氨基酸,在蛋白質(zhì)合成起接頭作用。
第三章 基因和基因組
1、基因被定義為轉錄功能單位,是編碼一種可擴散產(chǎn)物的一段DNA序列,其產(chǎn)物可以是蛋白質(zhì)或RNA。一個(gè)完整的基因應該由兩部分組成,即編碼區和調控區。
2、基因組是一種生物染色體內全部遺傳物質(zhì)的總和,包括構成基因和基因之間區域的所有DNA。所謂總和,還應該指該物種的不同DNA功能區域在DNA分子上結構分布和排列的情況?;蚪M以及基因一般以DNA的長(cháng)度和序列表示。
3、病毒基因組的結構特點(diǎn):
①與細菌相比較,病毒的基因組很小,所含遺傳信息量較小,只能編碼少數的蛋白質(zhì)。
②病毒基因組由DNA或RNA組成。核酸的結構可以是單鏈或雙鏈、閉合環(huán)狀或線(xiàn)狀分子。
③常有基因重疊現象,即同一DNA分子序列可以編碼2種或3種蛋白質(zhì)分子。
4、細菌基因組的一般特點(diǎn):
①基因組通常僅由一條環(huán)狀雙鏈DNA分子組成。但現發(fā)現有越來(lái)越多的線(xiàn)形基因組。
②只有一個(gè)復制起始點(diǎn)。
③有操縱子的結構。數個(gè)相關(guān)(參與一個(gè)生化過(guò)程)的結構基因串聯(lián)在一起,受同一調控區調節,合成多順?lè )醋觤RNA。
④編碼蛋白質(zhì)的結構基因是單拷貝的,但rRNA基因往往是多拷貝的。
⑤非編碼的DNA所占比例少,類(lèi)似病毒基因組。
⑥基因組DNA具有多種調控區,如復制起始區、復制終止區、轉錄啟動(dòng)子、轉錄終止區等特殊序列。
⑦與真核生物類(lèi)似,具有可移動(dòng)的DNA序列。
5、真核生物基因組特點(diǎn):
①基因組的分子量大。低等真核生物大約107-108 bp,而高等真核生物為5×108-1010 bp
②真核生物細胞往往有很多染色體,一般呈線(xiàn)狀。每個(gè)染色體DNA有很多復制起始點(diǎn)。
③細胞核DNA與蛋白質(zhì)穩定地結合成染色質(zhì)的復雜結構。染色質(zhì)內除了含有DNA和組蛋白外,還有大量非組蛋白。
④由于存在核膜,細胞被分隔成細胞核和細胞質(zhì),因此,在基因表達中,轉錄和翻譯在時(shí)間和空間上是分隔的,不偶聯(lián)的。
⑤基因組的大量序列是非編碼序列,有大量重復序列。
⑥真核生物的蛋白質(zhì)基因往往是單拷貝存在,轉錄產(chǎn)物是單順?lè )醋觤RNA。
⑦存在一些可移動(dòng)的DNA序列。
⑧絕大多數真核生物基因含有內含子,因而基因編碼區是不連續的。
⑨真核生物基因內部也可能含有大量的重復序列。
6、基因家族:一組功能類(lèi)似、結構具有同源性的基因稱(chēng)為基因家族?;蚣易宓姆诸?lèi)有多種方式?;蚣易甯鞒蓡T在結構上非常類(lèi)似,具有保守性,如rRNA基因家族,但基因之間的間隔區可以有很大的長(cháng)度差異和序列差異。重要的基因家族:rRNA基因家族、5S rRNA基因、組蛋白基因家族、珠蛋白基因家族、生長(cháng)激素基因家族、超基因。
7、超基因:是指一組由多基因和單基因組成的更大的基因家族。在高等真核細胞中,一個(gè)基因簇內含有數百個(gè)功能相關(guān)的基因,它們可能是由基因擴增后結構上輕微變化而產(chǎn)生的,這些基因的結構有程度不等的同源性,功能上仍保持原始基因的基本功能,或者進(jìn)化成具有相關(guān)而不同的新功能,這樣的一簇基因稱(chēng)為超基因家族。有免疫球蛋白超基因家族、核受體超基因家族、細胞因子超基因家族等。
8、在初始轉錄產(chǎn)物hnRNA加工產(chǎn)生成熟的mRNA時(shí),被切除的非編碼序列稱(chēng)為內含子。在成熟的mRNA或蛋白質(zhì)中存在的序列稱(chēng)為外顯子。基因的不連續性是真核生物基因所特有的,但不是所有真核生物基因都一定具有這種不連續性。
9、內含子的功能:
①含有可閱讀框架(ORF),內含子的ORF可能編碼酶或蛋白質(zhì),其中包括逆轉錄酶、成熟酶。
②含有各種剪接信號碼,內含子編碼的成熟酶直接參與內含子本身的剪接功能。
③對基因表達有影響,內含子對基因表達在多個(gè)水平上施加影響。內含子中的增強子序列增加了基因轉錄的起始反應。
10、人類(lèi)基因組計劃(HGP)的總體目標是要完成人類(lèi)全部24條染色體3×109bp序列的分析。具體包括:
①人類(lèi)基因組作圖(遺傳學(xué)圖譜、物理圖譜) 。
②對基因組DNA進(jìn)行切割和克隆。
③測定基因組的全部DNA序列。
④基因的鑒定。
⑤信息系統的建立、信息的儲存和處理以及相應軟件的開(kāi)發(fā)。
11、結構基因組學(xué):以全基因組測序為目標的基因結構研究,闡述基因組中基因的位置和結構,為基因功能的研究奠定基礎。
12、功能基因組學(xué):是利用結構基因組學(xué)提供的信息,以大規模實(shí)驗方法及統計與計算機分析,全面系統地分析全部基因的功能。
13、蛋白質(zhì)組:是一個(gè)基因組在特定細胞內所表達的蛋白質(zhì)。對于一種生物來(lái)說(shuō),它的基組DNA基本上是恒定的,但蛋白質(zhì)組是動(dòng)態(tài)的。也就是不同組織的細胞中蛋白質(zhì)組是不同的,在同一細胞的不同生長(cháng)狀態(tài)、病理狀態(tài)下也是不一樣的。蛋白質(zhì)組只指某一特定時(shí)間內的蛋白質(zhì)集合體。
14、生物信息學(xué):是用數理和信息科學(xué)的觀(guān)點(diǎn)、理論和方法去研究生命現象,組織和分析呈指數增長(cháng)的生物學(xué)數據的一門(mén)學(xué)科。生物信息學(xué)位于生物、計算機、數學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域的交叉點(diǎn)上,其研究目標是揭示“基因組信息結構的復雜性及遺傳語(yǔ)言的根本規律”。生物信息學(xué)包含了基因組信息學(xué)、蛋白質(zhì)結構模擬和藥物設計等3個(gè)組成部分。目前的研究包括下面幾個(gè)方面:
①相關(guān)信息的收集、儲存、管理與提供。
②新基因的發(fā)現和鑒定。
③非編碼區的信息結構分析。
④大規?;蚬δ鼙磉_譜的分析。
⑤蛋白質(zhì)分子空間結構預測、模擬和分子設計。
⑥藥物開(kāi)發(fā)。
第五章 基因工程原理
一、基本概念
1.基因工程:是對攜帶遺傳信息的分子進(jìn)行設計和施工的分子工程,包括基因重組、克隆和表達。核心是構建重組體DNA的技術(shù)。
2.基因組DNA文庫:是某一生物體的染色體全部DNA序列被隨機切割成適當大小的片段后,插入到載體內構成的DNA文庫。理論上,全部重組克隆含有該生物全部遺傳信息的總和。
3.cDNA基因文庫:是從某類(lèi)真核細胞分離總的polyA+-mRNA,經(jīng)逆轉錄合成互補的 DNA,從單鏈的cDNA用DNA聚合酶合成雙鏈cDNA。全部雙鏈cDNA插入到載體那,構成重組DNA。重組載體轉化 E.coli后得到的克隆總和。
4.扣除文庫:將兩種不同組織來(lái)源的mRNA進(jìn)行比較,用扣除雜交排除相同部分,即共同表達的那部分mRNA,選出剩余有差異的,特異表達的mRNA構建成cDNA文庫。
5.分子雜交:是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下可按堿基配對的原則退火成雙鏈的過(guò)程。是分子生物學(xué)最常用的方法之一。
6.PCR:即聚合酶鏈式反應,擴增樣品中的DNA量和富集眾多DNA分子中的一個(gè)特定的DNA序列的一種技術(shù)。在該反應中,使用與目的DNA序列互補的寡核苷酸作為引物,進(jìn)行多輪DNA合成。其中包括DNA變性、引物退火和在TaqDNA聚合酶催化下的DNA合成。
7.物理圖譜:是DNA片段上限制性?xún)惹忻该盖形稽c(diǎn)的圖譜,表示各種限制性?xún)惹忻缸R別位點(diǎn)在DNA序列上的線(xiàn)性排列。指的是DNA序列上兩點(diǎn)間的實(shí)際距離。
8.Southern雜交:用于檢測DNA片段混合物中存在特定序列的技術(shù)。又稱(chēng)Southern印跡。檢驗的目的DNA通常用一種或一種以上的限制性?xún)惹忻该盖?,得到各種特定長(cháng)度的片段,在凝膠電泳中依長(cháng)度分成條帶,DNA片段原位地轉移到NC膜或尼龍膜上。然后,膜上的DNA片段與標記的探針DNA進(jìn)行雜交,已雜交的DNA片段可通過(guò)標記的探針進(jìn)行放射性或顯色反應定位。
9.Northern雜交:從真核生物的特定組織或發(fā)育階段的細胞分離出全部RNA或mRNA,用變性凝膠電泳分離后轉移到NC膜上。用變性的探針DNA對NC膜上的RNA進(jìn)行雜交。從顯影或顯色反應判斷陽(yáng)性雜交的存在。
10.亞克?。?/strong>當載體中插入的外源DNA片段太大,難以作摹寫(xiě)分析或操作時(shí),需要對該克隆片段作些再切割,將大的DNA片段切稱(chēng)較小的片段,然后再與另外的新載體重組,并進(jìn)行轉化程序,這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為亞克隆。
二、思考題
1.PCR技術(shù)原理的是什么?
PCR技術(shù)是利用兩種寡核苷酸引物,分別與雙鏈DNA片段的兩端互補,形成DNA聚合酶反應中的模板和引物的關(guān)系,這是PCR技術(shù)的核心。PCR聚合酶反應體系的一些重要條件包括:模板、一對寡核苷酸引物、4種底物dNTP和Tap DNA聚合酶。反應分為3步:雙鏈模板DNA變性、退火和鏈的延伸。
2.基因工程中工具酶的種類(lèi)?
①限制性?xún)惹忻福?strong>②DNA連接酶,③DNA聚合酶,④逆轉錄酶,⑤RNA聚合酶。
3.DNA聚合酶的特點(diǎn)?
①需要提供合成模板;
②不能起始新的DNA鏈,必須要有引物提供3'-OH;
③合成的方向都是5'→3';
④除聚合DNA外還有其它功能;
⑤以脫氧核苷酸三磷酸(dNTP)為前體催化合成DNA。
4.熟悉基因工程載體的種類(lèi)和特點(diǎn)?
①種類(lèi):質(zhì)粒載體,λ噬菌體載體,M13噬菌體載體,柯斯質(zhì)粒載體,細菌人工染色體,酵母人工染色體,動(dòng)物病毒載體
②特點(diǎn):◆載體DNA是單個(gè)復制單元,在宿主細胞內應具有獨立復制能力;◆分子量盡可能的小,便于細胞中分離純化,離體條件下操作;◆含有多種限制行內切酶的單一切點(diǎn);◆載體內有不影響其復制,生長(cháng)的非必要區域;◆具有多種選擇行標記。
5.基因工程載體的基本要求,基因工程的基本步驟?
①基本要求:
◆載體能夠獨立復制,具有復制起點(diǎn)。
◆應具有靈活的克隆位點(diǎn)和方便的篩選標記。
◆應具有很強的啟動(dòng)子,能為大腸桿菌RNA聚合酶所識別。
◆應具有阻遏子,使啟動(dòng)子受到控制,只有當誘導時(shí)才能進(jìn)行轉錄。
◆應具有很強的終止子,只轉錄克隆的基因,所產(chǎn)生的mRNA較為穩定。
◆所產(chǎn)生的mRNA必須具有翻譯的起始信號AUG和SD序列,以便轉錄后順利翻譯。
②基本步驟:
◆目的DNA的獲得;◆載體的選擇與構建;
◆目的DNA與載體的重組;◆重組DNA的轉化或轉染;
◆篩選含有重組DNA分子的宿主細胞,獲得克隆。
6.DNA文庫構建的基本步驟?
①細胞核DNA的分離;
②適當的限制性?xún)惹忻该盖蠨NA;
③DNA片段與載體的連接,導入E.coli等工程菌株;
④基因文庫特性的檢測,篩選。
第六章
一、名詞解釋
1.DNA半保留復制:DNA復制時(shí),親代DNA雙螺旋結構解開(kāi),分別以解開(kāi)的兩股單鏈為模板,以dNTP為原料,按照堿基互補的原則,合成與模板鏈互補的新鏈,從而形成兩個(gè)子代DNA雙鏈,其結構與親代DNA雙鏈完全一致。因子代DNA雙鏈中的一股單鏈源自親代,另一股單鏈為合成的新鏈,形成的雙鏈與親代雙鏈的堿基序列完全一致,故稱(chēng)為半保留復制。
2.復制叉:原核生物DNA的復制從單一起點(diǎn)開(kāi)始,雙螺旋結構被打開(kāi),分開(kāi)的兩股單鏈分別作為新DNA合成的模板,DNA合成從起點(diǎn)開(kāi)始向兩個(gè)方向進(jìn)行,與單一起點(diǎn)相連的局部結構形狀呈“Y”型,稱(chēng)復制叉結構。
3.復制子:基因組中能獨立進(jìn)行復制的DNA單位稱(chēng)為復制子或復制單位。它含有控制復制起始或終止的特定位點(diǎn),從復制起始點(diǎn)到終止點(diǎn)的區域為一個(gè)復制子。
4.半不連續復制:復制過(guò)程中,催化DNA 合成的DNA聚合酶只能催化核苷酸從5’→3’方向合成,以3’→ 5’鏈為模板時(shí),新生的DNA以5’→3’方向連續合成;而以5’→3’為模板只能合成若干反向互補的岡崎片段,這些片段再相連成完整的新鏈,故稱(chēng)半不連續復制。
5.前導鏈:與復制叉移動(dòng)的方向一致,通過(guò)連續的5ˊ-3ˊ聚合合成的新的DNA鏈。
6.滯后鏈:與復制叉移動(dòng)的方向相反,通過(guò)不連續的5ˊ-3ˊ聚合合成的新的DNA鏈。
7.岡崎片段:DNA雙鏈是反向平行的,復制時(shí),親代雙鏈DNA在復制叉處打開(kāi),由于新鏈的合成具有方向性,即從5’→3’,以5’→3’DNA鏈為模板合成反向互補的新鏈時(shí),只能合成小片段DNA,這些片段根據發(fā)現者命名為岡崎片斷。
二、思考題
1.DNA復制的特征?
①絕大多數DNA和RNA的生物合成,均按照堿基配對原則,以預先存在的DNA鏈為模板,逐個(gè)復制,生成新的拷貝。
②DNA或RNA鏈的生物合成只能以5′→3′方向進(jìn)行。
③特異的聚合酶類(lèi)催化核酸的生物合成。
④在核酸生物合成中,聚合酶的底物核苷酸要求總是5′核糖核苷酸,即5′-NTP或5′-dNTP。
⑤RNA聚合酶進(jìn)行聚合反應時(shí),能夠直接以NTP為底物,逐個(gè)聚合,即從頭合成RNA。
2.復制過(guò)程的幾個(gè)階段?
以E.coli為例,DNA復制過(guò)程分為三個(gè)階段:
①起始:從DNA上控制復制起始的序列即起始點(diǎn)開(kāi)始復制,形成復制叉。復制方向多為雙向,也可以是單向,若以雙向進(jìn)行復制,兩個(gè)方向的復制速度不一定相同。由于DNA聚合酶不能從無(wú)到有合成新鏈,所以DNA復制需要有含3′-OH的引物,引物由含有引物酶的引發(fā)體合成一段含3~10個(gè)核苷酸的RNA片段。
②延長(cháng):DNA復制時(shí),分別以?xún)蓷l親代DNA鏈為模板,當復制叉沿DNA移動(dòng)時(shí),以親代3′→5′鏈為模板時(shí),子鏈的合成方向是5′→3′,可連續進(jìn)行;以親代5′→3′鏈為模板時(shí),子鏈不能以3′→5′方向合成,而是先合成出許多5′→3′方向的岡崎片段,然后連接起來(lái)形成一條子鏈。
③終止:當一個(gè)岡崎片段的3′-OH與前一個(gè)岡崎片段的5′-P接近時(shí),復制停止,由DNA聚合酶Ⅰ切除引物,填補空隙,連接酶連接相鄰的DNA片段。
3.線(xiàn)粒體DNA的復制模式?
4.DNA鏈延伸的幾個(gè)階段?
5.真核與原核生物的復制相同點(diǎn)與差異之處?
①相同點(diǎn):◆復制起始點(diǎn)都含有若干短的重復序列的獨特DNA片段;◆這些短的重復序列北多種結合蛋白所識別,這些蛋白質(zhì)在ori位點(diǎn)上的復合物對復制機構的裝配起著(zhù)關(guān)鍵的作用?!魪椭破鹗键c(diǎn)是富含A-T的DNA序列。有利于雙螺旋DNA的解鏈。
②差異:◆真核生物的DNA比原核DNA分子大得多且不裸露,與組蛋白結合成核小體,以染色質(zhì)結構形式存在;◆真核的每條染色體有多個(gè)復制起始位點(diǎn),而原核只有一個(gè)起始位點(diǎn);◆真核染色體在全部復制完成之前各個(gè)起始點(diǎn)上不能開(kāi)始新一輪的復制,受到一種復制的調控。而原核DNA的起始點(diǎn)可以連續地開(kāi)始新的復制事件,表現為一個(gè)復制子上有多個(gè)復制叉存在。
6.DNA損傷修復的種類(lèi)?
DNA的修復方式可分為直接修復和取代修復兩大類(lèi)。
直接修復包括光復活、轉甲基作用和直接連接作用,均屬于無(wú)差錯修復。
取代修復包括切除修復、重組修復和SOS修復,后兩者屬于有差錯傾向修復。
7.原核DNA聚合酶的一般特性?
原核細胞有三種DNA聚合酶,都與DNA鏈的延長(cháng)有關(guān)。
DNA聚合酶Ⅰ是單鏈多肽,可催化單鏈或雙鏈DNA的延長(cháng);
DNA聚合酶Ⅱ則與低分子脫氧核苷酸鏈的延長(cháng)有關(guān);
DNA聚合酶Ⅲ在細胞中存在的數目不多,是促進(jìn)DNA鏈延長(cháng)的主要酶。
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