1.試述科赫（Robert Koch）原則。
答：科赫(Robert koch)原則包括:1在同樣的特殊疾病中發(fā)現同一種病原菌;2病原體能在體外獲得純培養;3將純培養接種至易感動(dòng)物能引起相同的疾病;4能從感染動(dòng)物體內重新分離出這種病原菌的純培養。
2.臨床微生物學(xué)檢驗的任務(wù)有哪些?
答：臨床微生物學(xué)檢驗的任務(wù)包括:1研究感染性疾病的病原體特征:2提供快速、準確的病原學(xué)診斷;3指導合理應用抗菌藥物;4對醫院感染進(jìn)行監控。
3.哪些環(huán)境因素可影晌細菌的形態(tài)?
答：影響細菌形態(tài)的環(huán)境因素包括:1培養溫度、時(shí)間、培養基的成分、pH、離子濃度等;2機體內的生態(tài)環(huán)境;3環(huán)境中不利于細菌生長(cháng)的物質(zhì),如藥物、抗菌藥物、抗體、過(guò)高的鹽份等。
4.試述細菌的結構及其相應的功能。
答：細菌的基本結構包括:細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)和核質(zhì)等。特殊結構包括:鞭毛、菌毛、艦、芽胞等。
細胞壁的主要成分是肽聚糖,肽聚糖是由多聚糖骨架、四肽側鏈和五肽交聯(lián)橋三部分組成。外膜是革蘭陰性菌細胞壁的主要結構,由磷脂、脂蛋白、脂多糖三部分組成。細胞壁的主要功能是維持細菌的固有外形,起保護菌體的作用。
細胞膜的主要化學(xué)成分為脂類(lèi)、蛋白質(zhì)及少量多糖,其結構為平行的脂質(zhì)雙層,大多為磷脂,其中鑲嵌有多種蛋白質(zhì),這些蛋白質(zhì)可在呈液態(tài)的脂質(zhì)雙層中流動(dòng)變化。細胞膜的主要功能有:1物質(zhì)轉運作用;2分泌作用;3呼吸作用;4生物合成作用。
細胞質(zhì)是細菌新陳代謝的重要場(chǎng)所。核質(zhì)包含有細菌的遺傳物質(zhì)。
鞭毛是細菌的運動(dòng)器官,還可增強細菌的侵襲力。菌毛存在于菌體表面,可分為普通菌毛和性菌毛,其中前者為一種粘附結構,后者具有致育性,可傳遞毒力和耐藥性。
莢膜的功能包括:1保護作用;2致病作用;3免疫原性;4鑒別與分型。芽胞是細菌的休眠體,可幫助細菌渡過(guò)不良的生存狀況。
總之,不論是基本結構還是特殊結構,均有其各自的功能,共同維持細菌的存活及其整體功能。
5.細菌L型有哪些特點(diǎn)?
答：細菌L型有以下特點(diǎn):
(1)細胞壁肽聚糖結構被破壞,或合成受到抑制,造成細胞壁缺陷。
(2)大小不一,形態(tài)各異,染色時(shí)不易著(zhù)色,或著(zhù)色不均勻。
(3)在含血清的高滲低瓊脂培養基中能緩慢生長(cháng),一般2-7d后形成油煎蛋樣小菌落(放大100倍左右才能看見(jiàn))。
(4)保持有親代的遺傳特性,在合適的培養基中生長(cháng),很少回復到母菌型,但原生質(zhì)球在去除誘導物培養時(shí),可以返祖而恢復母菌形態(tài)。
6.芽胞的生物學(xué)意義是什么?
答：產(chǎn)生芽胞的細菌都是革蘭陽(yáng)性菌,主要有需氧芽胞桿菌屬和厭氧芽胞梭菌屬。芽胞的意義:1可在自然界存活多年,成為某些疾病的潛在傳染源;故如懷疑病房、手術(shù)室等被能形成芽胞的細菌污染,必須封閉房間進(jìn)行徹底滅菌;2對理化因素抵抗力強,故芽胞是否被殺死可作為判斷滅菌效果的指標,或評價(jià)某一種消毒滅菌方法效果的根據;3細菌芽胞的形狀、大小、位主等隨菌種而異,具有重要鑒別價(jià)值;4有些芽胞能產(chǎn)生毒素或其他有毒物質(zhì)。
7.試述細菌的化學(xué)組成及其攝取營(yíng)養的方式。
答：細菌的化學(xué)組成除與其他細胞相似,包括水、無(wú)機鹽、蛋白質(zhì)、糖類(lèi)、脂類(lèi)與核酸等主要化合物外,也有與其他生物細胞不同的成分,如:肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨基酸、二氨基庚二酸、吡啶二羧酸等。
細菌通過(guò)以下方式攝取營(yíng)養:1被動(dòng)擴散;2主動(dòng)吸收;3基團轉移。
8.細菌有哪些主要物理性狀?
答：細菌的物理性狀包括:1帶電現象:是區別革蘭陽(yáng)性菌及革蘭陰性菌兩大類(lèi)細菌染色性不同的基礎之一,此外,帶電現象對細菌的鹽凝集,以及與特異性抗體的凝集反應、沉淀反應、理化因素抑菌和殺菌作用等都有密切關(guān)系;2表面積大,有利于同外界進(jìn)行物質(zhì)交換;3半透性與滲透壓。
9.簡(jiǎn)述細菌的人工培養程序并列舉常用的人工培養方法。
答：細菌的人工培養程序為:標本(估計菌量少的標本,先增菌培養)→根據培養目的,接種于適當的培養基→適宜的培養環(huán)境,
根據對氣體的需求,細菌的人工培養方法可分為:1需氧培養(需氧菌與兼性厭氧菌):置于空氣中即可,適于大多數細菌;2厭氧培養(專(zhuān)性厭氧菌):需在無(wú)游離氧的環(huán)境中培養;3二氧化碳培養(少數細菌如腦膜炎奈瑟菌、布魯菌、空腸彎曲菌等):需在含5%-10%C02環(huán)境中培養;4微需氧環(huán)境(僅在5%左右的低氧壓環(huán)境中才能生長(cháng)的細菌的培養)。
10.體外培養時(shí),細菌細胞數量為什么不能保持指數增長(cháng)?
答：由于培養基中營(yíng)養物的不斷耗盡,毒性產(chǎn)物逐漸積聚,細菌經(jīng)過(guò)一段時(shí)間生長(cháng)繁殖后,繁殖速度會(huì )逐漸減慢,死菌數不斷增加,因此,體外培養時(shí),細菌細胞數量不能保持指數增長(cháng)。
11.細菌生長(cháng)曲線(xiàn)分為哪四期?各期有哪些特點(diǎn)?
答：以生長(cháng)時(shí)間為橫坐標,培養物中細菌數的對數為縱坐標繪制的曲線(xiàn),稱(chēng)為生長(cháng)曲線(xiàn)。生長(cháng)曲線(xiàn)分為以下四期:
(1)遲緩期:此期細菌體積增大,代謝活躍,但分裂遲緩,菌數未見(jiàn)增殖。遲緩期長(cháng)短不一,因菌種、接種的菌量、菌齡和培養基而異,一般約為1-4h。
(2)對數增殖期:此期細菌生長(cháng)迅速,菌數呈幾何級數增長(cháng)。此時(shí)細菌的形態(tài)、染色性、生理活性都較典型,對外界環(huán)境因素的作用比較敏感。一般相當于細菌培養8-18h。
(3)穩定期:此期細菌增殖數與死亡數幾乎相等,活菌數保持相對不變。此時(shí)細菌可能出現形態(tài)、生理性狀的變化,一些細菌的合成代謝產(chǎn)物大多在此期內產(chǎn)生,芽胞亦多在此期形成。
(4)衰退期:此期死亡菌數逐漸上升,活菌數急劇減少;細菌形態(tài)顯著(zhù)改變,甚至有的菌體自溶,難以辯認。
12.細菌主要有哪些分解代謝途徑?列舉常用的檢測分解代謝產(chǎn)物的實(shí)驗。
答：細菌分解代謝主要有:糖分解、蛋白質(zhì)分解等。常用的檢測糖分解代謝產(chǎn)物的試驗有糖發(fā)酵試驗、甲基紅試驗、VP試驗等;檢測蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物的試驗有吲哚試驗、硫化氫試驗等。
13.列舉醫學(xué)上有重要意義的細菌合成產(chǎn)物及其特性。
答：醫學(xué)上有重要意義的細菌合成產(chǎn)物主要有:熱原質(zhì)(本質(zhì)為脂多糖,具有耐高溫特性,經(jīng)高壓蒸氣滅菌(
14.何謂細菌素?其特點(diǎn)及意義是什么?
答：某些細菌菌株產(chǎn)生的一類(lèi)具有抗菌作用的蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)與脂多糖的復合物，稱(chēng)為細菌素。細菌素的抗菌譜狹窄,僅對與產(chǎn)生該種細菌素的細菌有近緣關(guān)系的細菌才有作用;由于細菌素具有種和型的特異性,可用于細菌分型和流行病學(xué)調查。
15.簡(jiǎn)述耐藥性質(zhì)粒的分類(lèi)及其特征。
答：耐藥性質(zhì)粒分為二類(lèi):即接合性耐藥質(zhì)粒、非接合性耐藥質(zhì)粒。
接合性耐藥質(zhì)?？梢酝ㄟ^(guò)細菌間的接合進(jìn)行傳遞;非接合性耐藥質(zhì)粒不能通過(guò)細菌接合而通過(guò)噬菌體傳遞。
接合性耐藥質(zhì)粒又稱(chēng)R質(zhì)粒,由兩部分組成即耐藥傳遞因子和耐藥決定因子(r因子)。前者編碼宿主菌產(chǎn)生接合和自主復制的蛋白,具有傳遞基因功能,后者決定對藥物的耐受性。通過(guò)耐藥質(zhì)粒的轉移,耐藥菌可將耐藥基因轉移至敏感菌,使后者成為耐藥菌。
16.轉位因子分哪幾類(lèi)?轉座子有哪些特點(diǎn)?
答：轉位因子主要有三類(lèi):插入順序、轉座子、轉座噬菌體。
轉座子特點(diǎn):1攜帶有與插入功能無(wú)關(guān)的基因;2能整合到受體DNA的多個(gè)“熱點(diǎn)""上。
17.微生物變異可表現在哪些方面?并給予分型。
答：微生物變異現象可見(jiàn)于微生物的各種性狀,表現為形態(tài)、結構、菌落、抗原性、毒力、酶活性、耐藥性、空斑、宿主范圍等的變異?？煞譃榉沁z傳型變異和遺傳型變異。
微生物在一定的環(huán)境條件下發(fā)生的變異,不能穩定地傳給子代,當環(huán)境條件改變,可能恢復原來(lái)性狀,稱(chēng)為非遺傳型變異;微生物的基因型發(fā)生改變,變異的性狀能穩定地傳給子代,并且不可逆轉,稱(chēng)為遺傳型變異。
18.細菌耐藥性是怎樣產(chǎn)生的?
答：細菌耐藥性的產(chǎn)生可以通過(guò)細菌染色體耐藥基因的突變、耐藥質(zhì)粒的轉移和轉座子的插入,使細菌產(chǎn)生一些新的酶類(lèi)或多肽類(lèi)物質(zhì),破壞抗菌藥物或阻擋藥物向靶細胞穿透,或發(fā)生新的代謝途徑,從而產(chǎn)生對抗生素的耐藥性,造成臨床藥物治療的失敗。
19.簡(jiǎn)述細菌基因突變的類(lèi)型和機制。
答：細菌基因突變的類(lèi)型和機制:1堿基的置換:在DNA鏈上一個(gè)或幾個(gè)堿基可以發(fā)生置換。堿基的改變影響到密碼組成,導致所編碼的氨基酸改變而影響蛋白質(zhì)功能;2堿基的插入和缺失:當核苷酸序列插入或缺失一個(gè)堿基,則使此后的序列中堿基發(fā)生移碼突變,導致密碼子錯誤,從而造成蛋白質(zhì)的改變以致影響酶所催化的化學(xué)反應性質(zhì),導致生物體遺傳性狀的改變;3能在細菌質(zhì)粒和質(zhì)粒之間,質(zhì)粒和染色體或染色體不同部分之間自行轉移的大段核苷酸構成的轉位因子也可以發(fā)生插入、缺失或倒置,轉位因子引起的突變同時(shí)涉及許多基因的改變,不能返祖。
20.簡(jiǎn)述正常菌群概念及其生物學(xué)意義。
答：人體的體表及與外界相通的腔道寄居著(zhù)一定種類(lèi)和數量的微生物,在一定條件下,微生物與宿主、微生物與微生物之間相互制約,相互依賴(lài),長(cháng)期適應,處于微生態(tài)平衡。正常定植于人體各部位的細菌群稱(chēng)為正常菌群。正常菌群對構成生態(tài)平衡起重要作用,其生物學(xué)意義主要是:1生物拮抗;2促進(jìn)機體免疫;3與衰老有關(guān);4合成維生素和細菌素。
21.機體對細菌感染的免疫反應主要有哪些?
答：細菌感染?？煞譃榘饩腥竞桶麅染腥緝深?lèi),機體對這兩類(lèi)感染的免疫反應亦有差異。機體對細菌感染的免疫反應包括:1抗胞外菌免疫:以中性粒細胞的調理吞噬,以及抗體和補體的溶菌作用為主,見(jiàn)于葡萄球菌、鏈球菌、奈瑟菌、許多革蘭陰性桿菌等細菌的感染;2抗胞內菌免疫:主要依靠細胞免疫。見(jiàn)于結核分校桿菌、麻風(fēng)分校桿菌、布魯菌、沙門(mén)菌等細菌感染;3抗毒素免疫:指抗細菌外毒素的免疫,是以抗體為主的免疫反應。見(jiàn)于白喉、破傷風(fēng)、氣性壞疽等以外毒素致病的病原菌感染。
22.內毒素、外毒素有哪些特性?
答：內毒素的主要特性:1為革蘭陰性菌的細胞壁成分,細菌死亡裂解時(shí)釋放;2其本質(zhì)為脂多糖,耐熱,加熱
外毒素的主要特性:1多為革蘭陽(yáng)性菌及少數陰性菌合成和分泌;2大多為多肽,易被熱、紫外線(xiàn)及化學(xué)劑變性,經(jīng)甲醛脫毒成類(lèi)毒素;3具特異的組織親和性,據其所損害的靶組織不同分為神經(jīng)毒、細胞毒、腸毒素三類(lèi)。
23.微生物感染的免疫防治措施有哪些?
答：對微生物感染的人工免疫防治措施包括:人工主動(dòng)免疫、人工被動(dòng)免疫。用病原微生物或其特異抗原、毒素等制成減毒活疫(菌)苗、死疫(菌)苗、類(lèi)毒素等生物制品,給易感人群接種,使體內產(chǎn)生抗該病原微生物或毒素的特異性免疫力,稱(chēng)為人工主動(dòng)免疫。人工被動(dòng)免疫是用含抗某種病原微生物或毒素特異性抗體的免疫球蛋白或免疫血清等生物制品給已(疑)感人群注射,或注射細胞因子等細胞免疫制劑,使之獲得特異性免疫力。
24.何謂微生物感染的化學(xué)預防?
答：微生物感染的化學(xué)預防是使用抗微生物藥物對某些微生物感染進(jìn)行治療性預防,以及用于外科手術(shù)病人和高危對象等,以預防可能會(huì )發(fā)生的微生物感染。
25.抗感染治療時(shí)合理選藥應考慮哪些因素?
答：“安全、有效、經(jīng)濟""可概括為合理使用抗感染治療的基本原則。合理的抗感染選藥方案取決于以下幾個(gè)方面:1病原微生物:病原學(xué)診斷及藥敏試驗,為合理選藥提供實(shí)驗依據;2根據藥敏試驗結果和擬選藥物的臨床藥理學(xué)特點(diǎn);3根據感染部位、病人的基礎疾病和免疫狀態(tài);4擬選藥物的臨床試驗和既往的應用經(jīng)驗等。
26.何謂固有耐藥、獲得耐藥?
答：固有耐藥是指某一病原微生物對某種抗微生物藥物的天然耐藥性,這種耐藥性代代相傳。編碼這種耐藥性的基因位于病原微生物的染色體上。獲得耐藥是指病原微生物接觸抗微生物藥物以后,通過(guò)產(chǎn)生抗微生物藥物滅活酶,或改變其細胞外膜的通透性,阻止抗微生物藥物進(jìn)入菌體內抵達靶位,或改變靶位蛋白、降低其與抗微生物藥物的親和性等方式使自身具有抵御抗微生物藥物抑殺作用的能力。獲得耐藥還可通過(guò)耐藥基因以質(zhì)粒接合和轉座子轉移等方式傳播和擴散。
27.臨床實(shí)踐中,采取哪些措施可預防和延遲細菌耐藥性的產(chǎn)生?
答：臨床實(shí)踐中預防和延遲細菌耐藥性的產(chǎn)生應做到:1針對感染病原菌選擇已知抗菌作用最強藥物,在可能情況下應盡量選用窄譜藥物;2使用抗菌藥物時(shí),劑量應給夠,療程應給足,以徹底殺滅感染病原菌,減少耐藥變異菌株衍生的危險性;3針對感染病原菌使用已知能阻止其耐藥性發(fā)生的聯(lián)合用藥方案;4使用抗菌藥物進(jìn)行化療預防時(shí)一定要有明顯指征,療程要盡可能短,以避免篩選出或誘導出耐藥菌株;5避免環(huán)境的抗菌藥物污染;6對已知耐藥菌感染的病人應予以隔離,對其醫療護理后應認真進(jìn)行洗手和其他隔離預防措施,以避免耐藥菌株的傳播和交叉感染的發(fā)生;7醫院應加強耐藥菌的流行病學(xué)監測,發(fā)現問(wèn)題立即處理,制定或修訂控制措施;3醫院應加強抗菌藥物的管理,制定和施行防止濫用抗菌藥物的措施。
28.請寫(xiě)出原核生物界的分類(lèi)等級。
答：原核生物界的分類(lèi)等級和其他生物界相同,依次為界、門(mén)、綱、目、科、屬、種。有時(shí)在兩個(gè)相鄰等級之間可添加次要的分類(lèi)單位,如亞門(mén)、亞綱、亞屬、亞科,科和屬之間還可添加族。
29.何謂菌株、種、屬、科、標準株?
答：同一菌種不同來(lái)源的細菌稱(chēng)為該菌的不同菌株。種是細菌分類(lèi)的基本單位,形態(tài)學(xué)和生理學(xué)性狀相同的細菌群體構成一個(gè)菌種;性狀相近、關(guān)系密切的若干菌種組成屬;相近的屬歸為一個(gè)科。同一菌種的各個(gè)細菌性狀基本相同,但在某些方面可能存在差異,差異較明顯的稱(chēng)亞種和變種,差異微小的為型。
具有某種細菌典型特征的菌株稱(chēng)為該菌的標準株,在細菌的分類(lèi)、鑒定和命名時(shí)都以標準菌株為依據,標準菌株也可以作為質(zhì)量控制的標準。
30.細菌的分類(lèi)方法有哪些?
答：細菌的分類(lèi)是在對細菌的大量分類(lèi)標記進(jìn)行鑒定和綜合分析的基礎上進(jìn)行的。用作細菌的分類(lèi)標記有形態(tài)學(xué)、生理生化學(xué)、免疫血清學(xué)、免疫化學(xué)及遺傳學(xué)等方面的生物學(xué)性狀。主要分類(lèi)方法有:1按細菌生理學(xué)與生物化學(xué)的特征,常用的分類(lèi)方法有兩種,即傳統分類(lèi)法和數值分類(lèi)法;2按遺傳學(xué)特征進(jìn)行分類(lèi)的遺傳學(xué)分類(lèi)法。
31.簡(jiǎn)述臨床微生物學(xué)實(shí)驗室進(jìn)行體外抗菌藥物敏感試驗的目的和指征。
答：臨床微生物學(xué)實(shí)驗室進(jìn)行體外抗菌藥物敏感試驗的目的和指征是:1對其敏感性不能預測的臨床分離菌株必須常規進(jìn)行藥敏試驗,以供臨床選擇治療藥物時(shí)參考;2臨床因療效差而考慮更換抗菌藥物時(shí),應對擬選藥物進(jìn)行藥敏試驗;3了解所在醫院或地區常見(jiàn)病原菌耐藥性的變遷情況,定期通報臨床,有助于臨床的經(jīng)驗治療選藥;4評價(jià)新抗菌藥物的抗菌譜和抗菌活性等藥效學(xué)特性;5對細菌耐藥譜進(jìn)行分析和分型有助于某些菌種的鑒定,并作為醫院感染流行病學(xué)調查的手段之一。
32.葡萄球菌屬藥敏試驗時(shí)為什么在所有β-內酰胺類(lèi)抗菌藥中,只需測試青霉素及苯唑西林的敏感性?
答：因為根據青霉素及苯唑西林的敏感性,可推斷一系列β-內酰胺類(lèi)抗菌藥物的敏感性。如青霉素敏感的葡萄球菌對其他青霉素、頭孢菌素類(lèi)及卡巴配能類(lèi)也敏感,青霉素耐藥,苯唑西林敏感菌株對不耐β-內酰胺酶的青霉素耐藥,但β-內酰胺膠酶穩定的青霉素、β-內酰胺酶抑制劑復合制劑、頭孢菌素類(lèi)及卡巴配能類(lèi)抗菌藥物敏感。耐苯唑西林葡萄球菌(Methicillin resistant staphylococcus,MRS)對現存所有β-內酰胺類(lèi)抗菌藥物耐藥。因此,只需測試青霉素及苯唑西林的敏感性,即可推斷一系列β-內酰胺類(lèi)抗菌藥物的敏感性。其他青霉素類(lèi)、β-內酰胺酶抑制劑復合制劑、頭孢菌素類(lèi)及卡巴配能類(lèi)抗菌藥物不需常規測試。
33.何謂抑菌試驗?主要包括哪些實(shí)驗方法?
答：抑菌試驗用于測定抗菌藥物體外抑制細菌生長(cháng)的效力。實(shí)驗方法主要有進(jìn)行定性測定的紙片擴散法、定量測定的稀釋法和E試驗法。
34.簡(jiǎn)述K-B紙片瓊脂擴散法原理及影晌因素。
答：K-B紙片瓊脂擴散法原理:將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上。紙片中所含的藥物吸取瓊脂中的水分溶解后不斷地向紙片周?chē)鷧^域擴散形成遞減的梯度濃度。在紙片周?chē)志鷿舛确秶鷥葴y試菌的生長(cháng)被抑制,從而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度,并與該藥對測試菌的最低抑菌濃度(MIC)呈負相關(guān)關(guān)系,即抑菌圈愈大,MIC愈小。
影響紙片法藥敏試驗結果的因素有:1培養基的質(zhì)量,如pH、深度、硬度和表面濕度等。對每批商品化或自配MH瓊脂必須用標準質(zhì)控菌株進(jìn)行檢測,合格后方能使用;2藥敏紙片的質(zhì)量,含藥量和保存方式;3接種菌量正確與否是影響結果的重要因素之一,取決于麥氏比濁標準的配制,正確使用和保存;4試驗操作質(zhì)量;5孵育條件,溫度和時(shí)間;6抑菌圈測量工具的精度;7質(zhì)控標準菌株本身的藥敏特性是否合格,有無(wú)變異。
35.瓊脂稀釋法有哪些優(yōu)點(diǎn)?
答：瓊脂稀釋法的優(yōu)點(diǎn)是可同時(shí)做多株菌株的MIC測定,結果重復性好,易于發(fā)現污染或耐藥突變菌,是開(kāi)發(fā)新藥體外藥敏試驗時(shí)常用的經(jīng)典參照標準。
36.簡(jiǎn)述E試驗原理。
答：E試驗原理:E試驗結合了稀釋法和擴散法的原理和特點(diǎn),操作簡(jiǎn)便同擴散法,但可以同稀釋法一樣直接定量出測試藥物對測試菌的最低抑菌濃度(MIC),結果準確、重復性好。與紙片瓊脂擴散法的主要區別在于E試驗所用的是一條寬5mn、長(cháng)50mn,內含干化、穩定的、濃度由高至低呈指數梯度分布的一種抗菌藥物的商品化塑料試條,試條上面標出該抗菌藥物的濃度刻度(μg/ml),濃度梯度范圍一般為15個(gè)自然對數。
37.簡(jiǎn)述體外聯(lián)合藥物敏感試驗指征。
答：臨床上常因以下情況聯(lián)合使用抗菌藥物:1用于病原菌尚未確定的急、重癥感染的經(jīng)驗治療,以擴大病原治療的覆蓋面;2治療多種細菌所引起的混合感染;3對于某些耐藥菌可取得協(xié)同抗菌作用;4減少或推遲治療過(guò)程中細菌耐藥性的產(chǎn)生;5減少某些治療指數低的抗菌藥物的用量從而減輕其毒副作用。
38.抗菌藥物聯(lián)合應用后有哪些結果?
答：抗菌藥物聯(lián)合運用后的結果有4種類(lèi)型:1協(xié)同作用,即兩種抗菌藥物聯(lián)合后的活性顯著(zhù)大于其單獨抗菌活性的總和;2相加作用,兩種抗菌藥物聯(lián)合后的活性等于其單獨抗菌活性的總和;3無(wú)關(guān)作用,兩種抗菌藥物聯(lián)合后的活性等于其單獨抗菌活性;4拮抗作用,兩種抗菌藥物聯(lián)合后的活性顯著(zhù)低于其單獨抗菌活性,即一種抗菌藥物的活性被另一種抗菌藥物削弱。
39.何謂MRS株?其臨床意義是什么?
答：MRS是耐甲氧西林葡萄球菌(Methicillin resistant staphylococcus)的英文縮寫(xiě)。MRS株意味著(zhù),不論藥敏試驗結果如何,對所有β-內酰胺類(lèi)抗菌藥物臨床治療無(wú)效;對氟喹諾酮類(lèi)、氨基糖甙類(lèi)、大環(huán)內酯類(lèi)等抗菌藥物的耐藥性也同時(shí)升高。
40.腸球菌進(jìn)行氨基糖甙類(lèi)高耐篩選試驗有何臨床意義?
答：當氨基糖試類(lèi)高耐篩選試驗敏感時(shí),提示氨基糖甙類(lèi)與其他抗菌藥物有協(xié)同作用,臨床治療腸球菌感染時(shí)可用青霉素或氨芐西林聯(lián)合一種氨基糖苷類(lèi),或萬(wàn)古霉素聯(lián)合一種氨基糖甙類(lèi)。但若氨基糖甙類(lèi)高耐篩選試驗耐藥,則氨基糖試類(lèi)與以上抗菌藥物無(wú)協(xié)同作用,不可聯(lián)合使用。
41.何謂產(chǎn)ESBL株,其臨床意義是什么?
答：ESBL是超廣譜β-內酰胺酶(extended -spectrum β-lactamase,ESBL)的英文縮寫(xiě)。產(chǎn)ESBL株意為克雷伯菌屬及大腸埃希菌等由于產(chǎn)超廣譜β-內酰胺酶,對頭孢菌素及氨曲南無(wú)論體外藥敏試驗結果如何,臨床治療都是無(wú)效的。產(chǎn)ESBL株對其他藥物也可能耐藥,如氨基糖苷類(lèi)及復方新諾明。
42.試述葡萄球菌的表面抗原的組成。
答：葡萄球菌的表面抗原主要有:
(1)蛋白抗原:葡萄球菌細胞壁的一種蛋白成分,稱(chēng)為葡萄球菌A蛋白(SPA),是具有種、屬特異性而元型特異性的完全抗原。SPA具有抗吞噬細胞吞噬的作用,可與人免疫球蛋白IgG的Fc段非特異性的結合而不影響Fab段,故可用之作為檢測各種抗原和抗體的實(shí)驗診斷試劑。
(2)多糖抗原:為具有型特異性的半抗原,金黃色葡萄球菌細胞壁所含的多糖抗原為核糖醇磷壁酸,檢測其刺激機體所產(chǎn)生的磷壁酸抗體有助于金黃色葡萄球菌感染的診斷與預后判斷,表皮葡萄球菌等凝固酶陰性葡萄球菌的細胞壁多糖抗原為甘油磷壁酸。
43.鏈球菌在血平板上有哪幾種特征性溶血觀(guān)象?
答：鏈球菌在血平板上形成三種特征性溶血試驗現象:
(1)甲型(α)溶血:菌落周?chē)霈F較窄的草綠色溶血環(huán),習慣上稱(chēng)這類(lèi)菌為甲型溶血性鏈球菌,即草綠色鏈球菌。
(2)乙型(β)溶血:菌落周?chē)霈F較寬的透明溶血環(huán),這類(lèi)菌被稱(chēng)為乙型溶血性鏈球菌,能產(chǎn)生溶血素O等毒素,致病性強。
(3)丙型(r)溶血:菌落周?chē)鸁o(wú)溶血環(huán),故這類(lèi)菌又稱(chēng)為不溶血鏈球菌。
44.為什么肺炎鏈球菌肺炎患者早期應作血液培養?
答：肺炎鏈球菌肺炎患者早期表現為菌血癥,血培養陽(yáng)性率很高。故應在病人畏寒、發(fā)熱時(shí),尤其是在使用抗菌藥物前積極抽送血培養,血培養的敏感性和特異性均大于痰培養,其臨床價(jià)值是后者不可比擬的。
45.肺炎鏈球菌的主要鑒定依據是什么? ?
答：肺炎鏈球菌主要鑒定依據是:
(1)菌體形態(tài):呈矛頭狀成雙排列,坦面相鄰,尖端向外的革蘭陽(yáng)性雙球菌。
(2)血平極上的菌落特征:直徑0.5-1.5mn,灰白色,半透明,表面光滑(有些菌株可表現為粘液狀)的扁平菌落,周?chē)h(huán)繞草綠色溶血環(huán)。培養或放置24h以上培養物,由于肺炎鏈球菌的自溶作用,其菌落中央可凹陷致邊緣隆起而呈臍窩狀。
(3)生化鑒定:optochin敏感試驗陽(yáng)性,膽鹽溶菌試驗陽(yáng)性。
46.如何評價(jià)和報告鏈球菌的培養結果?
答：(1)乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌系毒力強的致病菌,無(wú)論從任何標本中分離出均應報告臨床。
(2)及時(shí)鑒定和報告咽部標本中中分離出的化膿性鏈球菌,有利于臨床早期進(jìn)行適當的抗菌治療以減少?lài)乐睾蟀l(fā)癥,如風(fēng)濕熱和腎小球腎炎的產(chǎn)生。
(3)草綠色鏈球菌群在重癥感染,如敗血癥和心內膜炎時(shí)應考慮鑒定到種。
(4)從膿液標本和創(chuàng )傷感染部位等處分離出的米勒鏈球菌組多為病原菌而非污染菌。
47.腸球菌與同科的鏈球菌在生理學(xué)上的顯著(zhù)區別是什么?
答：腸球菌與同科的鏈球菌在生理學(xué)上顯著(zhù)區別是:腸球菌能在高鹽(6.5%NaCl)、高堿(pH9.6)條件下,40%膽汁培養基上,和
48.試述噬菌體的概念及其實(shí)際意義?
答：噬菌體具有體積微小,結構簡(jiǎn)單和嚴格的寄生性,必須在活的宿主細胞(如細菌)內繁殖,對寄生的宿主細胞表現出高度特異性,通常能將宿主細胞裂解,為一類(lèi)屬于病毒的微小生物,稱(chēng)之為噬菌體。
其實(shí)際意義是可根據噬菌體寄生宿主菌細胞的高度特異性,并使其裂解這一特點(diǎn)用于細菌鑒定,亦可用于流行病學(xué)調查時(shí)的細菌分型。
49.簡(jiǎn)述送檢腦脊液細菌培養樣本的質(zhì)量要求?
答：(1)以無(wú)菌技術(shù)由腰椎穿刺采集腦脊液3-5ml盛于無(wú)菌容器中立即送檢,厭氧培養則應床邊接種。
(2)天冷時(shí)宜將標本置于
50.試述腸桿菌科的致病因素。
答：(1)內毒素:可引起發(fā)熱、白細胞變化及代謝改變等,嚴重者可致休克。
(2)腸毒素:可致腹瀉。
(3)其他致病因素:如穿透腸道上皮和粘附于粘膜的能力等。
51.簡(jiǎn)述淋病奈瑟菌的培養特點(diǎn)和生化反應。
答：培養特點(diǎn):巧克力平板和專(zhuān)用選擇性培養基中生長(cháng),初次分離需提供5%左右的C0↓<2>和濕潤環(huán)境,培養溫度
生化反應:氧化酶、觸酶試驗陽(yáng)性,對糖類(lèi)的生化活性最低,只能氧化分解葡萄糖。
52.腸桿菌科在細菌形態(tài)、培養和生化特性上有何共同特征?
答：腸桿菌科細菌具有以下共同特性:革蘭陰性桿菌,無(wú)芽胞,多有鞭毛,能運動(dòng),在普通培養基和麥康凱培養基上生長(cháng)良好,兼性厭氧,在有氧和無(wú)氧條件下均可生長(cháng)。
主要生化特性包括:發(fā)酵葡萄糖(產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣),觸酶陽(yáng)性,氧化酶陰性,可將硝酸鹽還原至亞硝酸鹽。
53.試述腸桿菌科細菌的抗原構造。
答：腸桿菌科細菌的主要抗原構造復雜,主要包括菌體(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面抗原三種:
(1)0抗原。是細菌細胞壁的成分,其化學(xué)成分是脂多糖。脂多糖分子是一個(gè)以核心多糖為中心的三層結構,腸桿菌科各屬細菌的核心多糖相同,核心多糖的內側是類(lèi)脂A,為內毒素的毒性成分,核心多糖的外側是由重復的低聚糖組成的多糖鏈,決定0抗原的特異性。
(2)H抗原。是不耐熱的蛋白抗原,由鞭毛蛋白多肽鏈上的氨基酸序列和空間構型決定H抗原的特異性。
(3)表面抗原。是包繞在O抗原外側的不耐熱的多糖抗原,由粘液或莢膜多糖的結構決定表面抗原的特異性,表面抗原在不同菌屬中有不同的名稱(chēng),如大腸埃希菌的K抗原、傷寒沙門(mén)菌的Vi抗原和志賀菌的K抗原等。
0抗原和H抗原是腸桿菌科血清學(xué)分群和分型的依據,表面抗原存在時(shí)可阻斷O抗原與相應抗體之間的反應,加熱處理能消除表面抗原的阻斷作用。
54.簡(jiǎn)述大腸埃希菌的生化特性。
答：本菌發(fā)酵多種糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,吲哚、甲基紅、VP、枸櫞酸鹽(IMViC)的結果為++--,在克氏雙糖鐵瓊脂(KLA)上斜面和底層均產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、H↓<2>S陰性,動(dòng)力、吲哚、尿素(MIU)培養基上的反應結果為++-,一般不產(chǎn)生硫化氫(但近來(lái)發(fā)現產(chǎn)硫化氫菌株,應引起注意)。
55.根據其不同的血清型別、毒力和所致臨床癥狀不同,可將致瀉的大腸埃希菌分為哪五類(lèi)?
答：(1)腸毒素型大腸埃希菌(ETEC),引起霍亂樣腸毒素腹瀉(水瀉)。
(2)腸致病型大腸埃希菌(EPEC),主要引起嬰兒腹瀉。
(3)腸侵襲型大腸埃希菌(EIEC),可侵入結腸粘膜上皮,引起志賀樣腹瀉(粘液膿血便)。
(4)腸出血型大腸埃希菌(EHEC),又稱(chēng)產(chǎn)志賀樣毒素(VT)大腸埃希菌(SLTEC或VTEC),至少有一個(gè)血清型(0157:H7),可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征(HUS)。
(5)腸凝聚型大腸埃希菌(EAggEC),也是新近報道的一種能引起腹瀉的大腸埃希菌。
56.試迷沙門(mén)菌的抗原構造。
答：沙門(mén)菌的抗原構造主要有三種。即菌體抗原(0抗原)、鞭毛抗原(H抗原)和表面抗原(Vi抗原、M抗原和5抗原)。
57.為什么CDC提出應將大腸埃希菌O157：H7列為常規檢測項目?
答：EHEC的血清型＞50種,最具代表性的是O157:H7,在北美許多地區, O157:H7占腸道分離病原的第二位或第三位(多于志賀菌和耶爾森菌),是從血便中分離到的最常見(jiàn)的病原菌,分離率占血便的40%,6、7、8三個(gè)月O157:H7感染的發(fā)生率最高。
且O157是4歲以下兒童急性腎功能衰竭的主要病原菌,所以CDC提出應將大腸埃希菌O157:H7列為常規檢測項目。
58.試述沙門(mén)菌變異性。
答：沙門(mén)菌屬在一定條件下發(fā)生變異,主要表現為:
(1)S-R變異 自臨床標本初次分離的菌株一般都是光滑型,但經(jīng)人工培養、傳代后可逐漸變成粗糙型菌落,此時(shí)菌體表面的特異多糖抗原喪失,在生理鹽水中可出現自凝。
(2)H-0變異 是指有鞭毛的沙門(mén)菌失去鞭毛的變異。
(3)相位變異具有雙相H抗原的沙門(mén)菌變成只有其中某一相H抗原的單相菌,稱(chēng)相位變異。
(4)V-W變異 是指沙門(mén)菌失去Vi抗原的變異。
59.在沙門(mén)菌鑒定過(guò)程中,如何處理血清凝集反應中的問(wèn)題?
答：與多價(jià)抗血清不凝集時(shí),可在玻璃試管內用生理鹽水將細菌制成濃菌液,煮沸15-30min,冷卻后再次做凝集試驗,因Vi抗原能阻斷0凝集反應,而煮沸處理能破壞菌體表面的Vi抗原。
僅出現單相H抗原(第一相或第二相)時(shí),需用位相分離的方法誘導出另一相抗原后再進(jìn)行檢查。
60.志賀菌的鑒定要點(diǎn)是什么?如何與類(lèi)志賀鄰單胞菌進(jìn)行鑒別?
答：志賀菌的鑒定要點(diǎn)是:
(1)無(wú)動(dòng)力,賴(lài)氨酸陰性。
(2)發(fā)酵糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(福氏志賀6型、鮑氏志賀菌13和14型、痢疾志賀菌3型除外)。
(3)分解粘多糖,在醋酸鹽和枸櫞酸鹽瓊脂上產(chǎn)堿。
志賀菌屬與類(lèi)志賀鄰單胞菌可用動(dòng)力和氧化酶試驗加以鑒別,志賀菌屬均為陰性,而類(lèi)志賀鄰單胞菌為陽(yáng)性。
61.肺炎克雷伯菌初次分離培養基上菌落有何特點(diǎn)?
答：在初次培養基上可形成較大、凸起、灰白色粘液型的菌落。菌落大而厚實(shí)、光亮,相鄰菌落容易發(fā)生融合,用接種針沾取時(shí)可挑出長(cháng)絲狀細絲。在MAC培養基上發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,形成較大的粘液型、紅色的菌落,紅色可擴散至菌落周?chē)呐囵B基中。
62.試述變形桿菌的鑒定依據是什么?
答：菌落在營(yíng)養瓊脂和血瓊脂平板上遷徙生長(cháng),在腸道選擇培養基上乳糖不發(fā)酵,呈無(wú)色菌落,在SS瓊脂上產(chǎn)硫化氫,菌落中心呈黑色。
根據氧化酶陰性,脲酶陽(yáng)性,苯丙氨酸脫氨酶陽(yáng)性,KIA:斜面產(chǎn)堿,底層產(chǎn)酸產(chǎn)氣,H↓<2>S+,可初步鑒定為變形桿菌屬。
63.臨床常見(jiàn)的需氧革蘭陽(yáng)性桿菌有哪些?
答：臨床常見(jiàn)的需氧革蘭陽(yáng)性桿菌有棒狀桿菌屬中的白喉棒狀桿菌、芽胞桿菌屬中的炭疽桿菌和蠟樣芽胞桿菌,李斯特菌屬中產(chǎn)單核細胞李斯特菌、丹毒絲菌屬中紅斑丹毒絲菌和加德納菌屬中的陰道加德納菌。
64.簡(jiǎn)述炭疽芽胞桿菌生物學(xué)性狀。
答：(1)取自病人或病畜的新鮮標本直接涂片時(shí),常單個(gè)存在或呈短鏈,經(jīng)培養后則形成長(cháng)鏈,呈竹節狀排列。
(2)芽胞多在有氧下形成,有毒菌株可有明顯的莢膜。
(3)本菌為需氧或兼性厭氧菌,生長(cháng)條件不嚴格,最適溫度為
(4)在血平板上不溶血,在肉湯培養基中由于形成長(cháng)鏈而呈絮狀沉淀生長(cháng)。
(5)在明膠培養基中經(jīng)
有毒菌株在NaHCO↓<3>血瓊脂平板上置5%C0↓<2>
能分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、蕈糖,有些菌株能遲緩發(fā)酵甘油和水楊素,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。能水解淀粉,不發(fā)酵鼠李糖、半乳糖等其他糖類(lèi),能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,不產(chǎn)生吲哚和硫化氫,不利用枸櫞酸鹽,不分解尿素,在牛乳中生長(cháng)2-4d牛乳凝固,然后緩慢陳化,卵磷脂酶弱陽(yáng)性,觸酶陽(yáng)性。
65.炭疽芽胞桿菌有哪些主要的鑒定試驗?
答：炭疽芽胞桿菌是引起人畜共患急性傳染病一炭疽病的病原菌。本菌發(fā)病急,死亡率高,因此實(shí)驗室檢驗有重要意義,主要的鑒定試驗如下:1噬菌體裂解試驗;2串珠試驗;3青霉素抑制試驗;4串珠和青霉素抑制聯(lián)合試驗;5重碳酸鹽毒力試驗;6動(dòng)物試驗;7植物凝集素試驗。
66.如何提高流感嗜血桿菌培養陽(yáng)性率?
答：(1)流感嗜血桿菌初次培養應在5%-10%C0↓<2>環(huán)境。
(2)生長(cháng)中需要X、V因子,故可在培養基中添加此因子。
(3)應用選擇性培養基,如巧克力瓊脂,并加入一定量抗生素,1ml培養基中含萬(wàn)古霉素50μg、桿菌肽300μg、氯林可霉素1μg,嗜血桿菌分離率可達96.7%。
67.一患者食用海味發(fā)生食物中毒,取其嘔吐物培養得到一種動(dòng)力陽(yáng)性菌,血清制功試驗陰性,移種KIA、MIU培養基:葡萄糖(+)、乳糖（-）、H↓<2>S(-)、動(dòng)力(+)、吲哚(+)、尿素酶(-),氧化酶(+),該菌很可能為何種菌?如何進(jìn)一步鑒定。
答：(1)引起食物中毒的革蘭陰性桿菌,一般有某些沙門(mén)氏菌、變形桿菌、小腸結腸炎耶爾森菌以及副溶血性弧菌等,提示結果分析可能為耐鹽的副溶血性弧菌。
(2)進(jìn)一步的鑒定試驗包括嗜鹽試驗、生化反應及血清學(xué)試驗。
68.簡(jiǎn)述厭氧菌在厭氧條件下生存的機制。
答：厭氧菌慶氧機制:
(1)缺乏細胞色素酶和細胞色素氧化酶。在有氧的情況下,培養基中的物質(zhì)被氧化,轉變成氧化型的物質(zhì)較多,需要氧化還原電勢較高的酶如細胞色素酶和細胞色素氧化酶,才能將其氧化。而厭氧菌不具備這些酶類(lèi),不能氧化電勢高的物質(zhì),最后因能量供應不足而死亡。
(2)缺乏觸酶和過(guò)氧化氫酶。有氧時(shí),細菌生長(cháng)由需氧脫氫酶催化有氧氧化,產(chǎn)生過(guò)氧化氫。它能抑制乙酰輔酶A的分解,因而阻礙細菌的脂類(lèi)代謝。厭氧菌缺乏此酶,不能分解H↓<2>0↓<2>,而致代謝終止死亡。
(3)缺乏超氧化物歧化酶。某些細菌氧化代謝的最終產(chǎn)物是超氧化物自由基0↓<2>-，具有高氧化能力,對細菌的毒害作用比H↓<2>0↓<2>大得多,而厭氧菌無(wú)此歧化酶,不能解除其毒害。
綜上所述,厭氧菌由于缺乏與需氧菌類(lèi)似的一些酶類(lèi),不能耐受0↓<2>，故而不能在有氧環(huán)境中生存。
69.寫(xiě)出五種臨床上常見(jiàn)的厭氧菌的名稱(chēng)及所致疾病。
答：1破傷風(fēng)梭菌:破傷風(fēng);2產(chǎn)氣莢膜梭菌:氣性壞疽;3肉毒梭菌:食物中毒;4脆弱類(lèi)桿菌:腸道,生殖道,顱內等感染;5難辨梭菌:偽膜性腸炎等。
70.分離培養厭氧菌失誤的原因有哪些?
答：如果臨床懷疑有厭氧菌感染的標本,而分離培養為陰性,可能有下述失誤。
(1)培養前未作標本的直接涂片和染色鏡檢。
(2)標本在空氣中放置太久或接種的操作時(shí)間過(guò)長(cháng)。
(3)未用新鮮配制的培養基。
(4)未用選擇培養基,以抑制兼性厭氧菌生長(cháng)。
(5)培養基未加必要的補充物質(zhì),如氯化血紅素、維生素K1等,它們對類(lèi)桿菌特別是產(chǎn)黑素類(lèi)桿菌的生長(cháng)有促進(jìn)作用,所以未加上述必要補充物質(zhì)的培養基,厭氧菌不生長(cháng)。
(6)用硫乙醇酸鹽作為唯一厭氧菌培養基,而有些厭氧菌在該培養基中不能生長(cháng),故初代培養不應用硫乙醇酸鈉。
(7)沒(méi)有合適的厭氧缸或厭氧裝置,或厭氧裝置漏氣,或其他原因導致厭氧環(huán)境不適宜(如厭氧缸內催化劑失活或氧化還原指示劑失效等)。
(8)培養時(shí)間不足。
(9)厭氧菌的鑒定材料有問(wèn)題,如鑒定用的培養基、試劑和抗生素紙片失效,都可能導致鑒定錯誤。
71.試述產(chǎn)氣莢膜梭菌的鑒定依據。
答：產(chǎn)氣莢膜梭菌的鑒定依據是:
(1)革蘭陽(yáng)性粗大桿菌、短粗方頭,常伴其他雜菌,芽胞不易看到,可見(jiàn)莢膜。
(2)菌落特征和糖發(fā)酵反應,特別是“洶涌發(fā)酵""現象。
(3)Nagler氏試驗陽(yáng)性。
(4)動(dòng)物試驗(血性水腫、泡沫肝等)。
(5)揮發(fā)性代謝產(chǎn)物的測定(主要為乙酸和丁酸,有時(shí)也形成丁醇)。
72.什么叫Koch現象?
答：結核的特異性免疫是通過(guò)結核分校桿菌感染后所產(chǎn)生的。實(shí)驗證明,將有毒結核分枝桿菌純培養物初次接種于健康豚鼠,不產(chǎn)生速發(fā)型過(guò)敏反應,而經(jīng)10-14d,局部逐漸形成腫塊,繼而壞死、潰瘍,細菌侵入附近的淋巴結,再通過(guò)淋巴-血流向全身播散。局部潰瘍經(jīng)久不愈,直至動(dòng)物死亡。若在8-12周之前給動(dòng)物接種減毒的或小量結核分校桿菌(即行人工感染),則局部反應提前出現,于2-3d內發(fā)生紅腫硬結,后有潰瘍形成但很快趨于痊愈,且附近淋巴結不受侵犯,亦無(wú)細菌周身播散。此為Koch在1891年觀(guān)察到的后為Rich所描述,故稱(chēng)為Koch現象。
73.非結核分枝桿菌Runyon分類(lèi)有幾群?每群各舉2例。
答：非結核分校桿菌Runyon分類(lèi)有四群:
(1)堪薩斯分枝桿菌、海分枝桿菌。
(2)瘰疬癡分枝桿菌、蘇爾加分枝桿菌。
(3)鳥(niǎo)-胞內復合分校桿菌、蟾分枝桿菌。
(4)偶發(fā)分枝桿、龜分枝桿菌。
74.試述結核菌分枝桿菌培養特性。
答：本菌為專(zhuān)性需氧菌,在元氧條件下迅速死亡。為兼性細胞內寄生菌,在細胞內外均可發(fā)育繁殖,強毒菌株可長(cháng)期生存于巨噬細胞內。生長(cháng)條件37℃,pH6.4-7.0。具有強的疏水性,菌落不易乳化于水及生理鹽水。
本菌繁殖周期較多數細菌長(cháng),在最佳培養基上至少14-15h繁殖一代。群體生長(cháng)于以雞蛋為基礎的固體培養基上,初次分離需4-8周,次代培養仍需2-4周。營(yíng)養要求尤高,需要卵黃、血液、馬鈴薯淀粉等有機物質(zhì),碳、氮、磷、鉀、鎂、鐵等無(wú)機鹽類(lèi)以及氨基酸、菸酸、核黃素等。
75.試述麻風(fēng)分枝桿菌形態(tài)與染色特性。
答：麻風(fēng)分枝桿菌亦為抗酸桿菌,但較結核分枝桿菌短而粗,大小約1-8μm×0.3-0.5μm,抗酸染色著(zhù)色均勻,呈束狀或團狀排列。麻風(fēng)分枝桿菌為典型的胞內寄生菌,有該菌存在的細胞胞質(zhì)呈泡沫狀稱(chēng)為麻風(fēng)細胞。用藥后細菌可斷裂為顆粒狀、鏈桿狀等,著(zhù)色不均勻,叫不完整染色菌。革蘭染色陽(yáng)性,無(wú)動(dòng)力,無(wú)莢膜,亦無(wú)芽胞。
76.BACTEC-460系統檢測分枝桿菌的基本原理。
答：BACTEC-460自動(dòng)快速檢測儀的主要原理是測定分枝桿菌的代謝產(chǎn)物。在指定專(zhuān)用的7H12或12B培養瓶中加入放射性14C棕櫚酸產(chǎn)物,當檢測標本經(jīng)處理接種于該培養基內,如果有分枝桿菌存在,分枝桿菌代謝時(shí)將產(chǎn)生中間產(chǎn)物和終末產(chǎn)物,如利用培養瓶中標記14C棕櫚酸產(chǎn)物而產(chǎn)生帶有放射性的14C0↓<2>,BACTEC儀將培養基中14C0↓<2>送入電 ]xFZ'l|&l)
離室,并自動(dòng)顯示測定結果。以生長(cháng)指數(growth index,GI)表示,連續觀(guān)察,如果GI升高達某一程度,則報告有分枝桿菌生長(cháng),即為陽(yáng)性。
77.簡(jiǎn)述病毒的特點(diǎn)。
答：病毒具有如下特點(diǎn):不具有細胞結構;只具有一種類(lèi)型的核酸(RNA或DNA);特殊的繁殖方式——復制;缺乏完整的酶系統和能量合成系統;不具有核糖體;絕對的細胞內寄生。
78.簡(jiǎn)述細胞培養的基本條件。
答：細胞培養的基本條件為:1水,主要作為溶劑。2無(wú)機鹽,如Na↑<+>、K↑<+>、Mg++、Ca++、Cl↑<->、HCO↓<3>-。其作用是:作為細胞的正常組成成分;維持滲透壓和酸堿平衡;促進(jìn)細胞貼壁;作為細胞代謝過(guò)程中某些酶的激活劑。3碳水化合物,主要為葡萄糖等單糖,其作用是:為細胞提供能量;維持滲透壓。4有機氮,主要為蛋白質(zhì)及各種氨基酸,此類(lèi)物質(zhì)在血清、血漿、水解酪蛋白中含量很豐富,其作用是:作為細胞的重要組成部分;幫助細胞貼壁;促進(jìn)細胞生長(cháng);解除某些物質(zhì)對細胞的毒性作用。5維生素,主要作為某些酶的輔酶參與細胞的新陳代謝。6其他營(yíng)養物質(zhì),如嘧啶、核糖及脫氧核糖、激素等。
79.在實(shí)驗動(dòng)物中,悉生動(dòng)物與普通動(dòng)物相比有何優(yōu)點(diǎn)?
答：悉生動(dòng)物有如下優(yōu)點(diǎn):悉生動(dòng)物作為實(shí)驗動(dòng)物無(wú)傳染病及寄生蟲(chóng)感染;試驗結果明確;所需動(dòng)物數少;利于長(cháng)期的實(shí)驗觀(guān)察,實(shí)驗中死亡率低,存活率高;能利用它對實(shí)驗進(jìn)行準確設計,故由其得出的實(shí)驗結果具有較高的統計價(jià)值。
80.為什么病毒必須在活的敏感細胞內才能生長(cháng)繁殖?
答：因為:1病毒本身沒(méi)有合成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所一核糖體,故必須借助宿主細胞的核糖體合成蛋白質(zhì);2由于病毒缺乏完整而又必須的酶,故必須借助細胞的某些酶才能復制;3只有敏感細胞上才有病毒的受體,病毒與受體結合后才能進(jìn)入細胞內生長(cháng)繁殖。
81.什么是干擾缺損病毒?
答：干擾缺損病毒(DI顆粒)是指在病毒感染時(shí)產(chǎn)生的一類(lèi)亞基因缺失突變體,它們因失去了其親代病毒基因組中的復制必需片段,故不能單獨進(jìn)行復制,而必須在其同型的完全病毒的輔助下,由完全病毒提供DI顆粒已喪失的但又為復制所必需的基因功能才能復制。同時(shí),由于DI顆粒與完全病毒競爭復制所必需的基因產(chǎn)物,從而可抑制完全病毒的復制。
82.簡(jiǎn)述病毒復制的基本過(guò)程。
答：病毒復制的基本過(guò)程為:1吸附,即病毒顆粒與細胞膜的受體發(fā)生相互作用后病毒顆粒特異性地吸附于宿主細胞表面;2穿入,病毒吸附于宿主細胞膜后以各種不同的方式進(jìn)入細胞,此即穿入;3脫殼,病毒在宿主細胞內脫去核殼,病毒核酸隨后進(jìn)入細胞的一定部位;4病毒大分子的生物合成,病毒基因組進(jìn)入宿主細胞后,一方面表達與合成病毒復制過(guò)程中所必需的結構蛋白和非結構蛋白,另一方面進(jìn)行復制合成子代病毒核酸;5裝配與釋放,病毒核酸與殼體蛋白合成完畢后,在細胞核內或胞漿內裝配成熟為病毒顆粒(核衣殼),此即子代病毒體,然后子代病毒體以不同方式從感染細胞中釋放到細胞外環(huán)境。
83.簡(jiǎn)述病毒鑒定的基本原則。
答：鑒定病毒的基本原則包括:根據病毒的生物學(xué)特性如病毒的形態(tài)、大小與結構等加以鑒定;根據病毒的宿主范圍及受染宿主的癥狀加以鑒定;根據病毒的理化性質(zhì)如核酸的類(lèi)型及其對理化因素的抵抗能力等加以鑒定:根據病毒的血清學(xué)反應加以鑒定。
84.簡(jiǎn)述病毒分類(lèi)的基本原則。
答：分類(lèi)的基本原則包括:1核酸的類(lèi)型、結構和分子量等;2病毒體的形態(tài)、大小與基本結構;3病毒體對乙醚、氯仿等脂溶劑的敏感性;4血清學(xué)性質(zhì)與抗原關(guān)系;5病毒在細胞培養上的繁殖特征;6對除脂溶劑以外的其他理化因子的敏感性;7流行病學(xué)特征。
85.什么是細胞病變效應,它在病毒鑒定中有何意義?
答：細胞病變效應(CPE)是指病毒在宿主細胞中復制后導致細胞內發(fā)生一系列變化,如:開(kāi)始時(shí),細胞核發(fā)生變化,染色質(zhì)著(zhù)邊,核濃縮,隨后細胞膜發(fā)生變化,失去黏附作用,細胞變圓,從培養瓶壁脫落,或細胞互相融合等。這些變化可通過(guò)顯微鏡檢查。各種病毒產(chǎn)生CPE各不相同,各有其特點(diǎn),故可借以初步鑒定病毒種屬,并可作為病毒增殖的指標。
86.鑒定病毒時(shí)常用的血清學(xué)反應有哪幾種?
答：鑒定病毒時(shí)常用的血清學(xué)反應有:中和試驗、血凝抑制試驗、酶聯(lián)免疫試驗、放射免疫試驗、免疫熒光技術(shù)、補體結合試驗、膠乳凝集試驗、免疫電鏡技術(shù)等。
87.什么是溫度敏感突變株?有何用途?
答：溫度敏感突變株(ts株)為病毒的一種突變形式。其特點(diǎn)是病毒突變后在較低溫度下能夠繁殖,但在較高溫度下不能夠繁殖。ts突變株常為減毒株,用于病毒遺傳學(xué)研究及制備疫苗。
88.純化病毒過(guò)程中應注意哪些問(wèn)題?
答：純化病毒過(guò)程中應注意:1保持病毒的感染性,如嚴格控制溫度,pH等;2選擇適宜的純化材料,如無(wú)其他病毒污染,含病毒量較多,雜質(zhì)少并易于處理;3選擇合適的提純方法;4建立靈敏的病毒測定和鑒定方法。
89.簡(jiǎn)述病毒的遺傳物質(zhì)變異的主要機理。
答：病毒發(fā)生變異的主要機理有:1病毒基因突變,即病毒基因組因自發(fā)的或經(jīng)誘導后其基因核苷酸順序發(fā)生改變,主要有點(diǎn)突變和缺失突變;2病毒基因重組,即來(lái)自?xún)蓚€(gè)或多個(gè)病毒顆粒的遺傳物質(zhì)重配于子代重組體病毒中,病毒重組體含有來(lái)自?xún)蓚€(gè)或多個(gè)不同病毒基因組的核酸序列,出現與親代病毒不同的基因型和表型。主要有兩種方式:分子內重組和基因重配。
90.簡(jiǎn)述持續性感染發(fā)生的機制及分類(lèi)?各舉一例說(shuō)明。
答：導致持續性感染發(fā)生的機制有:1病毒因素,如病毒基因組與細胞染色體整合、病毒無(wú)免疫原性或較弱、病毒致細胞病變效應較弱、病毒發(fā)生變異和病毒感染后產(chǎn)生干擾缺損病毒;2宿主因素,如病毒在機體受保護部位生長(cháng)、機體產(chǎn)生非中和抗體和機體產(chǎn)生免疫耐受及細胞免疫缺陷等。
持續性感染分為:1潛伏性感染:病毒在初次感染后,以某種形式在細胞內長(cháng)期潛伏下來(lái),既不繁殖,也不致病,且潛伏期內檢不出病毒,但在某些條件下可被激活,病毒開(kāi)始繁殖并致病,如HSV、EBV、CMV等;2慢性感染:某些病毒在急性感染后,可轉入慢性持續性感染,機體能很長(cháng)時(shí)間或終身不斷地產(chǎn)生有感染性的病毒顆粒,如HBV;3慢病毒感染:病毒進(jìn)入機體后,短期內不產(chǎn)生任何癥狀,經(jīng)過(guò)長(cháng)期潛伏后,病毒表現出致病性,這類(lèi)感染發(fā)病緩慢,逐漸發(fā)展終致機體死亡。如麻彥病毒引起的亞急性硬化性全腦炎。
91.簡(jiǎn)述干擾素的抗病毒機理。
答：干擾素作用于敏感細胞后使之產(chǎn)生抗病毒蛋白從而阻止病毒的復制與合成。干擾素分三種:α-干擾素,主要由白細胞產(chǎn)生;β-干擾素,由成纖維母細胞產(chǎn)生;γ-干擾素,由淋巴細胞產(chǎn)生。干擾素的抗病毒機理為:干擾素作用于敏感細胞后產(chǎn)生抗病毒蛋白(AVP),抗病毒蛋白(AVP)主要有兩種:一種為蛋白激酶,它可以阻斷病毒蛋白質(zhì)的合成;另一種為2’-5’A合成酶,它可以降解病毒mRNA。干擾素主要通過(guò)抗病毒蛋白發(fā)揮抗病毒作用。
92.如何采集和保存病毒標本?
答：采集樣本時(shí)間最好在發(fā)病初期或者入院當天;標本應收集于無(wú)菌容器中;標本一般應從感染的部位采取。對于分離培養病毒的標本要快速送到實(shí)驗室,并立即處理和接種。對于需較長(cháng)時(shí)間凍存的標本,最好置于-70℃。
93.試介紹幾種病毒分離培養方法?
答：組織培養和雞胚接種,動(dòng)物接種。其中組織培養又包括器官培養,組織塊培養、單層細胞培養。單層細胞培養又分為原代、次代細胞培養、二倍體細胞株和傳代細胞系培養。
94.簡(jiǎn)述流感病毒的形態(tài)與結構。
答：流感病毒顆粒具有多形性,一般呈粗糙球形,直徑為80-120nm,有時(shí)呈絲狀體,在新分離的毒株中多見(jiàn)。流感病毒的結構由內向外依次分為核心、基質(zhì)蛋白(M蛋白)和包膜三個(gè)部分。
95.流感病毒的快速診斷方法有哪幾種?
答：(1)免疫方法檢測標本中抗原如IFA、EIA及放射免疫技術(shù)均可檢測培養物及標本中的抗原。
(2)分子雜交檢測病毒RNA。
(3)RT-PCR檢測培養物及標本中流感病毒RNA,并能進(jìn)行病毒分型及分亞型。
(4)免疫電鏡技術(shù)。
96.人類(lèi)腸道病毒的主要種類(lèi)及共同的生物學(xué)性狀是什么?
答：人類(lèi)腸道病毒主要有脊髓灰質(zhì)炎病毒,柯薩基病毒A和B組、?？刹《炯靶滦湍c道病毒5個(gè)亞屬或亞群。其共同生物學(xué)性狀為:腸道病毒是小病毒,由簡(jiǎn)單的病毒衣殼和單正股RNA組成。衣殼含4種蛋白質(zhì),以60個(gè)重復原粒單位排列成20面體。人類(lèi)腸道病毒的RNA為單一分子,長(cháng)約7.4kb,該RNA既充當病毒蛋白質(zhì)翻譯的模板,又充當RNA復制的模板。能在猴腎、人胚腎、人羊膜細胞、Hp-2、Hela細胞等細胞進(jìn)行培養。腸道病毒對酸穩定,耐乙醚,對紫外線(xiàn)、干燥、熱均敏感。
97.檢測腸道病毒核酸時(shí)如何采集和保存標本?
答：在未提取RNA之前,應注意保護病毒衣殼的完整,以避免體液中的核糖核酸酶對RNA分子的破壞。標本冰凍前可加入核糖核酸酶抑制劑,因其在冰凍融化過(guò)程中有保護病毒體RNA的作用。
98.請列出肝炎病毒的種類(lèi)及各自的英文縮寫(xiě)?
答：肝炎病毒可分為甲型、乙型、丙型、丁型和戊型、庚型等肝炎病毒。英文縮寫(xiě)分別為HAV、HBV、HCV、HDV、HEV和HGV。
99.簡(jiǎn)述甲型肝炎病毒與腸道病毒的主要區別?
答：HAV屬于小RNA病毒科嗜肝病毒,其與腸道病毒的區別為:
1HAV基因組含G+C mol%僅為38%;2HAV的結構蛋白(VP1-4)大小不同于腸道病毒;3HAV復制周期長(cháng),細胞培養需14-21d,腸道病毒短,一般2-3d;4HAV在
100.人體感染甲型肝炎病毒后主要產(chǎn)生哪幾種抗體?哪種抗體對急性甲型肝炎具有診斷意義?
答：人體感染甲肝病毒后,主要產(chǎn)生抗HAV-IgG,抗HAV-IgM和HAV-IgA三種抗體,其中抗HAV-IgM對急性甲型肝炎具有診斷意義。
答：乙肝病毒有小球型顆粒、管型顆粒和大球型顆粒三種特有顆粒。小球型顆粒主要含有HBSAg。管型顆粒本質(zhì)為HBsAg,也帶有少部分前S2及極少前S1抗原。大球型顆粒又稱(chēng)Dane顆粒含有HBsAg,前S2及前S1抗原、核心抗原和e抗原。
102.簡(jiǎn)述幾種HBV的傳播方式?
答：HBV的主要傳染源為患者或無(wú)癥狀HBsAg攜帶者。其傳播方式可因帶HBV血液、血液制品及血污染的器械針頭經(jīng)血源傳染,其次密切接觸,尤其是性接觸以及母嬰傳染也是常見(jiàn)的傳播方式。
103.簡(jiǎn)述HBeAg測定的臨床意義?
答：(1)HBV感染過(guò)程的早期或在慢性活動(dòng)性乙型肝炎中,血循環(huán)有e抗原出現。
(2)HBeAg和Dane顆粒出現的時(shí)間相平行,且HBeAg與病毒DNA多聚酶在循環(huán)中的消長(cháng)動(dòng)態(tài)也基本一致。因此,檢測HBeAg陽(yáng)性可作為HBV處在復制狀態(tài)及血清具有傳染性的一個(gè)標志。
104.試述丙型肝炎病毒基因產(chǎn)物及其編碼的抗原成分及實(shí)驗室檢查方法。
答：(1)核衣殼蛋白由C區基因編碼,含有191個(gè)氨基酸殘基,分子量約22kD。
(2)包膜蛋白由C區相鄰的E1區編碼,約由576bp組成,編碼192個(gè)氨基酸,分子量約33kD。
(3)非結構蛋白由NS2-NS5區編碼。
目前臨床上用于診斷丙型肝炎病毒感染的實(shí)驗室方法有EIA檢測抗HCV,如ELISA法檢測抗HCV IgG和抗HCV IgM及RIBA確證試驗,PCR檢測HCV-RNA。
105.為什么HDV只在感染了HBV的人中才能發(fā)生?
答：丁型肝炎病毒(HDV)是一種缺陷病毒,不能獨立復制,需要HBV輔助才能增殖,即需要借助于HBsAg作HDV的外膜蛋白而裝配成完整的HDV顆粒,因此,HDV只在感染了HBV的人中才能發(fā)生。
106.簡(jiǎn)述HEV的生物學(xué)性狀?
答：HEV呈球形fq 包膜顆粒,表面具鋸齒狀和穗狀結構,直徑約29nm,比HAV和小RNA病毒稍大但比嵌杯病毒小。HEV基因組為單正股RNA,全長(cháng)約7.2Kb?；蚪M的5末端和3未端分別有一個(gè)由27bp和68bp構成的非編碼區,中間為編碼區,內含有3個(gè)開(kāi)放閱讀框架(0RF)。HEV僅一種血清型,敏感動(dòng)物有猿猴和黑猩猩。
107.漢坦病毒是何種疾病的病原體?微生物學(xué)檢查應如何進(jìn)行?
答：漢坦病毒是流行性出血熱又稱(chēng)腎綜合征出血熱的病原體。流行性出血熱的微生物檢查可從幾個(gè)方面進(jìn)行:
(1)分離病毒:病人急性期血清、尸檢器官組織或感染動(dòng)物的肺腎組織,可用于病毒分離。
(2)間接免疫熒光檢測抗體:用細胞培養抗原,進(jìn)行間接免疫熒光法,可檢測病人血清中的病毒特異性IgM或IgG抗體。
(3)ELISA法檢測抗體:應用敏感、特異的抗體捕捉ELISA法可檢測特異性IgM,適用于早期診斷。
(4)RT-PCR技術(shù)檢測漢坦病毒的核酸,有助于快速診斷。
108.敘述與人類(lèi)有關(guān)的U皰疹病毒的種類(lèi)及共同特性?
答：與人類(lèi)疾病有關(guān)的皰疹病毒有單純皰疹病毒I型和Ⅱ型、水痘-帶狀皰疹病毒、人巨細胞病毒、EB病毒、人類(lèi)皰疹病毒6型、7型、8型。皰疹病毒有以下共同特征:病毒核心為雙股線(xiàn)狀DNA;核衣殼是由162個(gè)殼微粒組成的立體對稱(chēng)的20面體;核衣殼周?chē)幸粚又鞍装?span lang="EN-US">;病毒體直徑約100nm;核酸分子量80000-150000kD。
109.如何利用IgM抗體的特性判斷胎兒是否宮內感染CMV?
答：人感染巨細胞病毒(CMV)后主要產(chǎn)生抗CMV IgM抗體,由于IgM不能通過(guò)胎盤(pán),故可以通過(guò)檢測新生兒血清中抗CMV IgM,來(lái)判斷胎兒是否宮內感染CMV。
110.與EB病毒感染有關(guān)的疾病主要有哪幾種?簡(jiǎn)要敘述臨床上用于診斷EBV感染的血清學(xué)方法?
答：與EB病毒(EBV)感染有關(guān)的疾病主要有傳染性單核細胞增多癥、非洲兒童惡性淋巴瘤和鼻咽癌三種。EBV感染的血清學(xué)診斷主要包括:1嗜異性抗體的檢測,主要輔助診斷傳染性單核細胞增多癥;2ELISA特異性抗體檢測,抗EA/D IgA和抗VCA IgA的檢測對于鼻咽癌有高度的特異性。
111.簡(jiǎn)述HIV的復制?
答：首先,病毒體的包膜糖蛋白刺突gp120與細胞表面受體CD4吸附。然后病毒包膜與細胞膜發(fā)生融合,病毒進(jìn)入胞內脫殼,釋放其核心RNA以進(jìn)行復制。病毒的逆轉錄酶以病毒RNA為模板,借宿主的tRNA作為引物,產(chǎn)生互補負股DNA,構成RNA:DNA雜交體。雜交體中的親代RNA由RNA酶H水解去除.再由負股DNA產(chǎn)生正股DNA,從而形成雙股DNA。雙股DNA環(huán)化后,由胞漿移行到胞核內。在病毒整合酶的作用下,病毒基因組整合入細胞染色體中,整合的前病毒轉錄出單一的RNA前體,有些RNA前體拼接而形成病毒的mRNA,翻譯形成病毒的結構蛋白和非結構蛋白,另一些RNA前體經(jīng)加帽加尾作為病毒的子代基因組RNA,與結構蛋白裝配成核衣殼。最后病毒核衣殼經(jīng)過(guò)細胞膜以出芽方式形成完整病毒體釋放到細胞外。
112.簡(jiǎn)述輪狀病毒的實(shí)驗室檢測方法?
答：分為直接檢測和病毒培養兩種。直接檢測主要利用ELISA法和膠乳凝集試驗檢測病毒的抗原,以及PCR檢測病毒的RNA,電鏡觀(guān)察糞便中輪狀病毒顆粒。病毒培養是將病人糞便接種原代細胞,然后接種于傳代細胞傳代增殖,通過(guò)出現CPE,確定病毒種類(lèi)。
113.按致病部位可將真菌分為哪二大類(lèi)?對人體和動(dòng)物有哪些危害?
答：按致病部位可將真菌分為淺部和深部真菌二大類(lèi),前者侵犯皮膚、毛發(fā)、指甲、引起癖病;后者侵犯深部組織和內臟,致全身感染,嚴重者引起死亡。
114.一般真菌培養多選用何種培養基?列出其主要成分及pH,培養基內應添加何種抗生素有利于真菌檢出?
答：一般真菌培養多選用沙保弱瓊脂,主要成分有蛋白胨、葡萄糖、瓊脂等,其pH4.0-6.0,其中添加氯霉素和放線(xiàn)菌酮等抗生素,可抑制細菌和許多霉菌生長(cháng),有利于皮膚癬菌的檢測;僅添加氯霉素、四環(huán)素、慶大霉素等可抑制細菌生長(cháng),有利于深部真菌檢測。
115.念珠菌屬可引起人類(lèi)哪些疾病?
答：念珠菌屬可引起淺部和全身性感染,淺部念珠菌病包括鵝口瘡、陰道炎、角膜炎、甲溝炎等;局部念珠病有口腔念珠菌病、食管念珠菌病,全身性感染依其侵犯部位及病人狀態(tài)表現不同癥狀,有支氣管和肺念珠菌病、念珠菌性腸炎、念珠菌性膀胱炎或腎盂腎炎,還有念珠菌心內膜炎及全身性念珠菌病等。
116.隱球菌屬中哪種菌為人類(lèi)病原菌?可引起人類(lèi)哪些疾病?
答：隱球菌屬中僅新型隱球菌為人類(lèi)病原菌,本菌經(jīng)呼吸道侵入人體,由血流播散至腦及腦膜,也可侵犯皮膚、骨和關(guān)節,在播散性感染中,?？捎刹∪四蛑信囵B出新型隱球菌。隱球菌病,特別是隱球菌性腦膜炎,常在系統性紅斑狼瘡、類(lèi)肉瘤、白血病、淋巴瘤、艾滋病及柯興氏(cushing)綜合征病人中發(fā)生。有報道45%艾滋病病人有隱球菌條件性感染。
117.曲霉菌可引起人類(lèi)哪些疾病?請列舉三種常見(jiàn)的致病性曲霉菌。
答：曲霉病可以引起原發(fā)性感染,也可致繼發(fā)性感染,出現過(guò)敏性反應、淺部感染、肺曲霉菌病,侵襲性(播散性)曲霉菌病。煙曲霉、黃曲霉和黑曲霉為常見(jiàn)的致病性曲霉菌。
118.皮膚真菌主要侵犯人類(lèi)哪些組織?可引起哪些皮膚癬菌病?
答：皮膚真菌主要侵犯人類(lèi)皮膚、毛發(fā)和指(趾)甲,引起皮膚真菌病,又稱(chēng)癬病,可引起頭癬、黃癬、須癬、體癬、疊瓦癬、股癬、足癬、手癬、甲癬等皮膚癬菌病。
119.如何用直接鏡檢法檢測皮膚真菌?
答：皮膚采樣先用70%-75%酒精消毒,取新發(fā)生的皮膚損害邊緣皮屑;指甲近尖端下面或背部外表用刀刮去,再采用甲屑培養;頭發(fā)標本用消毒懾子拔取無(wú)光澤病發(fā),有些斷發(fā)要用無(wú)菌尖刀掘出。將標本盛于清潔紙袋,鱗屑可用黑紙包好運送。標本用10%KOH/NaOH制成濕片,指甲可用強堿如25%KOH/NaOH,或25% KOH含5%甘油處理,然后鏡檢。
120.在微生物實(shí)驗室中,暗視野顯微鏡多用于什么檢查?
答：暗視野顯微鏡多用于觀(guān)察不易染色微生物的形態(tài)和動(dòng)力觀(guān)察,如螺旋體形態(tài)和霍亂弧菌的流星樣運動(dòng)等。
121.簡(jiǎn)述相差顯微鏡的使用原理及其在微生物學(xué)檢驗中的用途。
答：相差顯微鏡的使用原理:當光線(xiàn)透過(guò)標本時(shí),由于標本不同部位的密度不同,引起光位相的差異。相差板的光柵作用改變直射光的光位相和振幅,把光位相差異轉化為光強度的差異,從而顯示出細菌結構不同部位的差異。
用途:多用于觀(guān)察微生物的形態(tài)、內部結構、運動(dòng)方式及繁殖過(guò)程。
122.簡(jiǎn)述抗酸染色原理及染色步驟。
答：抗酸染色原理:分枝桿菌細胞壁含脂質(zhì)較多,其中主要成分為分枝菌酸,此物具有抗酸性,染色時(shí)與石炭酸復紅結合牢固,能抵抗酸性乙醇的脫色作用,因此抗酸菌能保持復紅的顏色,達到染色目的。
步驟:萋納石炭酸復紅染色,加溫促使菌體著(zhù)色;3%鹽酸乙醇脫色;呂氏美藍復染,未脫色細菌呈紅色為抗酸性細菌,脫色經(jīng)復染呈藍色的細菌為非抗酸性細菌。
123.根據其用途、物理性狀可將培養基分為哪幾類(lèi)?
答：培養基根據用途可分為:基礎培養基、營(yíng)養培養基、鑒別培養基、選擇培養基、特殊培養基。
根據物理性狀培養基可分為:液體、固體和半固體三大類(lèi)。
124.簡(jiǎn)述用于分離嗜血桿菌的巧克力瓊脂制作要點(diǎn)。
答：營(yíng)養豐富的基礎培養基(如進(jìn)口胰消化大豆粉瓊脂、哥倫比亞瓊脂、新鮮配制的牛肉浸液等),
125.細菌接種方法有哪兒種?
答：平板劃線(xiàn)法、斜面接種法、傾注平板法、穿刺接種法和液體接種法,其中平板劃線(xiàn)法又分為分區劃線(xiàn)法和連續劃線(xiàn)法。
126.干熱滅菌法與濕熱滅菌法哪種滅菌效果較好?為什么?
答：在同一溫度下,濕熱的滅菌效果大于干熱,原因為:
(1)濕熱供給充足的水分,蛋白質(zhì)在含水多的環(huán)境中易凝固,隨著(zhù)蛋白質(zhì)含水量的增加,凝固所需溫度降低。
(2)水是熱的良導體,濕熱傳導快,穿透性強,可使被滅菌物品內溫度迅速上升,而干熱靠輻射傳導,穿透性差。
(3)濕熱的蒸氣可放出潛熱,這種潛熱可迅速升高物品的溫度。
127.細菌檢驗分級報告制度有哪些限時(shí)性?
答：分級報告制度有限時(shí)性,如涂片限2h內報告,初步培養鑒定和直接藥敏結果限24h或次晨報告,最后鑒定和細菌藥敏結果一般不超過(guò)3d,還規定除血培養外,所有送檢標本24h內必須有預報。
128.細菌生長(cháng)繁殖的基本條件有哪些?
答：細菌生長(cháng)繁殖的基本條件:
(1)營(yíng)養物質(zhì):充足的營(yíng)養是細菌進(jìn)行新陳代謝的物質(zhì)基礎,包括水分、碳源、氮源和維生素、無(wú)機鹽類(lèi),除此之外,營(yíng)養要求較高的細菌還需添加另外的物質(zhì)和某些生長(cháng)因子。
(2)氫離子濃度(pH)、溫度及氣體也是細菌生長(cháng)繁殖的基本條件。pH隨菌種的不同有較大的差異,但一般均要求pH7.2-7.4,溫度一般要求在
129.試簡(jiǎn)述支原體的培養特性。
答：支原體的培養特性為:1營(yíng)養要求較高,培養基中需加入動(dòng)物血清及酵母浸液等添加劑;2大多數支原體最適pH7.6-8.0(除解脲脲原體外),最適溫度為
130.二性霉素B破壞支原體的機制是什么?
答：二性霉素B可與支原體細胞膜中固醇類(lèi)物質(zhì)相結合,改變膜的通透性,胞漿內容物逸出而致細胞死亡。支原體的細胞膜有三層,內外兩層為蛋白質(zhì),中間層為脂質(zhì),其中固醇類(lèi)物質(zhì)含量較高。故凡能作用于固醇類(lèi)的物質(zhì)如二性霉素B等均可破壞其細胞膜使其死亡。
131.試述支原體與細菌L型的區別。
答：支原體為1發(fā)生在自然界中;2生長(cháng)需要固醇類(lèi)物質(zhì);3在無(wú)抗生素等誘導物的培養基中生長(cháng)無(wú)返祖現象;4代謝活力有限;5DNA中G+C mol%＜41%;6對毛地黃皂苷的溶解作用敏感。
細菌L型為1常常是實(shí)驗室形成的(與人為因素有關(guān));2不絕對需要固醇類(lèi)物質(zhì);3去除誘導物時(shí)易返祖成母菌形態(tài);4具有與母菌相同的代謝活力;5DNA中G+C mol%>41%;6對毛地黃皂苷的溶解作用有抵抗力。
132.簡(jiǎn)述梅毒的臨床分期及表現。
答：梅毒的臨床分期為三期。第一期為硬性下疳,為感染局部的丘疹硬結破潰形成下疳,約1個(gè)月左右,此期極易傳播感染。第二期為梅毒疹期,全身皮膚粘膜出現皮疹,伴淋巴結腫大,并可累及內臟及神經(jīng)系統。第三期為晚期梅毒,皮膚粘膜出現潰瘍性壞死灶或內臟發(fā)生肉芽腫樣病變(梅毒瘤),嚴重者心血管和中樞神經(jīng)系統也受累。
133.簡(jiǎn)述鉤體病的臨床分期及表現。
答：典型的鉤體病分4期。潛伏期伴菌血癥,機體一般無(wú)明顯癥狀;當螺旋體在血內繁殖至一定數量時(shí),進(jìn)入敗血癥期,病人自感不適,全身酸痛,尤以腓腸肌明顯;然后進(jìn)入器官損害期,以心、肝、腎的損害多見(jiàn),出現黃疸等臨床癥狀;最后進(jìn)入恢復期,多數不遺留后遺癥,少數可復發(fā)并引起眼葡萄膜炎等后遺癥。
134.對于疑為梅毒患者的下疳分泌物或皮疹滲出液應如何取材?
答：先用無(wú)菌生理鹽水棉球擦凈病變部位的污穢物,或用鈍器刮破皮疹面露出基底組織,再用干棉球擠壓周?chē)M織,使分泌物或滲出液溢出,最后用蓋玻片刮取分泌物,覆蓋于已滴加生理鹽水的載玻片上備檢。
135.非密螺旋體抗原試驗可用作梅毒患者的初篩,為什么?
答：非密螺旋體抗原試驗多用牛心肌的心脂質(zhì)作為抗原。而梅毒螺旋體的磷脂抗原與牛心肌類(lèi)脂抗原為異嗜性抗原。用牛心類(lèi)脂作為抗原的血清學(xué)試驗,能測定病人血清中的抗脂質(zhì)抗體。故可用于梅毒病人的初篩試驗。
136.鉤體在液體培養基中的生長(cháng)性狀如何,為什么?
答：鉤體營(yíng)養要求不高,在柯氏液體培養基中,
137.簡(jiǎn)述螺旋體的概念及與人體疾病相關(guān)的螺旋體的分類(lèi)。
答：螺旋體是一群細長(cháng)而柔軟、螺旋狀、運動(dòng)活潑的原核細胞型微生物。有細胞壁,內含脂多糖與磷壁酸,無(wú)定形核,有核質(zhì),無(wú)鞭毛,但由于在其細胞壁與細胞膜之間有中軸絲,故可運動(dòng)。對人致病的螺旋體主要包括鉤體屬、密螺旋體屬及疏螺旋體屬。
138.試述螺旋體在電鏡下的結構。
答：螺旋體在電鏡下由原漿柱、中軸絲及包圍于菌體及中軸絲上的外膜所組成。外膜位于原漿柱及中軸絲外層,與細菌莢膜相當,系膜狀結構;中軸絲位于外膜與原漿柱之間,是螺旋體的運動(dòng)器官;原漿柱與細菌菌體相當,為一螺旋狀圓柱形結構,由細胞壁、胞漿膜及胞漿內容物組成，胞漿中含有核質(zhì)而無(wú)定形核。
139.用于梅毒診斷的血清學(xué)試驗包括哪些類(lèi)型?臨床實(shí)驗室該如何選擇?
答：用于診斷梅毒的血清學(xué)試驗包括非密螺旋體抗原試驗和密螺旋體抗原試驗。其中前者主要有性病研究所實(shí)驗室法(VDRL)、不加熱血清反應素試驗(USR)、快速血漿反應素試驗(RPR)等,后者有熒光密螺旋體抗體吸收試驗(FTA-ABS)、梅毒螺旋體制動(dòng)試驗(TPI)等。臨床實(shí)驗室可先通過(guò)VDRL、USR或PRR等方法進(jìn)行初篩,出現陽(yáng)性者再用FTA-ABS或TPI等方法來(lái)確認,尤以TPI特異性最佳,因為該法是以活的有毒力的梅毒螺旋體作為抗原而進(jìn)行的試驗。
140.簡(jiǎn)述立克次體病的種類(lèi)及其共同的臨床表現。
答：立克次體病主要包括斑疹傷寒、斑點(diǎn)熱及恙蟲(chóng)病等,它們在流行病學(xué)上有所不同,但臨床表現有共同之處。以發(fā)熱、頭痛、皮疹及中樞神經(jīng)系統癥狀為其特征。發(fā)熱多為稽留熱,伴劇烈頭痛、肌肉痛;可伴惡心、嘔吐;皮疹可為充血性皮疹或出血性皮疹;嚴重時(shí)可累及中樞神經(jīng)系統,出現神志不清、昏迷等癥狀。
141.簡(jiǎn)述對立克次體病的不同病原體的分離與鑒定的原則。
答：根據引起不同立克次體病的病原體的不同,應采取不同的方法進(jìn)行分離。斑疹傷寒、斑點(diǎn)熱、恙蟲(chóng)病和Q熱病原體的分離多用動(dòng)物。常用的動(dòng)物為豚鼠及小鼠,觀(guān)察接種前后動(dòng)物的表現及反應;羅沙利馬體感染的病人可通過(guò)人工培養基培養,如接種于腦心浸液雙相瓊脂或血瓊脂;而對于埃立克次體,必須通過(guò)細胞培養才能得到,因其既不能在無(wú)生命的培養基上生長(cháng),也不能通過(guò)動(dòng)物接種而繁殖。鑒定的原則是一致的,可通過(guò)免疫熒光檢測或某些血清學(xué)試驗,甚至用分子生物學(xué)的方法加以鑒定。
142.試述衣原體屬的分類(lèi)及生活周期。
答：衣原體屬包括沙眼衣原體、鸚鵡熱衣原體及肺炎衣原體等3個(gè)種。
衣原體有獨特的生活周期,在其不同的生活周期中,可觀(guān)察到兩種不同的顆粒結構,一種小而致密為原體,另一種大而疏松為始體又稱(chēng)網(wǎng)狀體。其生活周期為1原體對宿主細胞的吸附及侵入;2原體入侵后轉變?yōu)榫W(wǎng)狀體,網(wǎng)狀體進(jìn)行分裂增殖,并濃縮成原體;3宿主細胞死亡,釋放出大量的原體。
143.試述衣原體在不同生活階段的兩種結構即原體與始體的區別。
答：原體:1小而致密有胞壁;2在宿主細胞外穩定,無(wú)繁殖能力;3具高度感染性;4Giemsa染色呈紫色。
始體:1大而疏松,無(wú)胞壁;2在宿主細胞內以二分裂方式增殖;3無(wú)感染性;4Giemsa染色呈深藍色。
144.試迷不同血清型的沙眼衣原體分別引起何種疾病,如何采集此類(lèi)病人的標本?
答：沙眼衣原體引起的感染范圍廣泛,不同的血清型可引起不同部位的感染。如血清型A、B、Ba、C可引起沙眼;D-K型可致眼、泌尿生殖道感染;而L1、L2、L
145.試述梅毒的微生物學(xué)檢查法。
答：梅毒的微生物學(xué)檢查法有二類(lèi)。一類(lèi)是檢查梅毒螺旋體:1直接涂片作暗視野檢查;2涂片作Fantana鍍銀染色法檢查;3動(dòng)物接種分離螺旋體。另一類(lèi)方法為檢查梅毒螺旋體的血清學(xué)試驗,包括非密螺旋體抗原試驗與密螺旋體抗原試驗兩種。前者有VDRL、USR、RPR等,后者常用的方法為梅毒螺旋體制動(dòng)試驗,熒光抗體試驗等。
146.如何區分普氏立克次體與莫氏立克次體?
答：普氏立克次體與莫氏立克次體生物學(xué)性狀基本相同,它們都可引起斑疹傷寒?？沙槿〔∪搜鹤⑷胄坌噪嗍蟾骨挥^(guān)察陰囊反應。陰囊腫大、睪丸鞘膜滲出性炎癥為陰囊反應陽(yáng)性,此為莫氏立克次體的感染;無(wú)紅腫反應則為陰囊反應陰性,為普氏立克次體的感染。
147.如何檢驗鉤端螺旋體病?
答：主要有二類(lèi)方法:一類(lèi)是檢查鉤端螺旋體,另一類(lèi)是血清學(xué)試驗查鉤體的抗體。查鉤體的具體方法有1鏡檢法;2分離培養法;3動(dòng)物接種法。血清學(xué)試驗常用的方法有顯微鏡凝集試驗、微量補體結合試驗等。
148.檢測引起泌尿生殖系感染的支原體有何臨床意義?
答：在泌尿生殖道已發(fā)現多種支原體,其中人型支原體、解脲脲原體是引起泌尿生殖道感染的重要的病原體。約有30%-40%的非衣原體、非淋菌性尿道炎是由解脲脲原體引起的,它還可以引起睪丸附睪炎、慢性前列腺炎、宮頸炎、陰道炎等,還可導致尿路結石和男性不育。人型支原體在很多細菌性陰道炎的病例中檢測率大大高于健康女性,但僅當檢測到分泌物中人型支原體≥105時(shí),才提示可能有臨床意義即可能與非細菌性陰道炎有關(guān)。
149.簡(jiǎn)述不同支原體對小分子營(yíng)養物質(zhì)的利用情況。
答：大多數支原體能利用葡萄糖或精氨酸作為能源,如肺炎支原體和生殖道支原體能發(fā)酵葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。而人型支原體、口腔支原體等有精氨酸脫氫酶,能水解培養基中的精氨酸,釋放出氨氣。解脲脲原體既不能利用葡萄糖,也不能利用精氨酸,但可利用尿素并釋放出氨氣。臨床檢驗中,可以利用這些反應所致培養基pH的改變而觀(guān)察標本中是否有支原體的存在。
150.試述雞胚卵黃囊培養法對立克次體分離株如何進(jìn)行繁殖及保存。
答：可選用萊亨雞的受精雞蛋,在溫度為
151.苯丙氨酸、葡萄糖酸鹽試驗在腸桿菌科細菌鑒定的應用價(jià)值。
答：通過(guò)苯丙氨酸、葡萄糖酸鹽的陰性和陽(yáng)性結果將腸桿菌科細菌分為三大類(lèi),對于細菌鑒定到屬有價(jià)值。
152.細菌生化試驗主要包括那幾大類(lèi)?
答：糖(醇、苷)類(lèi)代謝試驗,氨基酸和蛋白質(zhì)的代謝試驗,碳源和氮源利用試驗,呼吸酶類(lèi)試驗,脂酶、磷酸酶和DNA酶和其他酶類(lèi)試驗。
153.簡(jiǎn)述細菌對糖（醇、苷）分解試驗的原理和影響因素。
答：由于細菌各自具有不同的酶系統,對糖(醇)的分解能力不同,有的能分解某些糖產(chǎn)生酸和氣體,有的雖能分解糖產(chǎn)生酸,但不生成氣體,有的則不分解糖。糖類(lèi)分解試驗的影響因素有:培養基內的糖濃度;糖在高壓蒸汽滅菌時(shí)水解變質(zhì);糖發(fā)酵的基礎培養基內,必須不含有任何糖類(lèi)和硝酸鹽,以免出現假陽(yáng)性反應;有些糖類(lèi)加入培養基后可使培養基變酸,需用0.1N NaOH調整到所需的pH。
154.O/F試驗過(guò)程中應注意的事項有哪些?
答：有些細菌不能在Hugh-Leifson二氏培養基上生長(cháng),應在培養基中加入2%血清或0.1%酵母浸膏,重做0-F實(shí)驗。氧化反應遲緩或減弱時(shí),在開(kāi)放管表面可看到堿性反應,常誤認為陰性,延長(cháng)培養時(shí)間可恢復到酸性。指示劑不能用酒精溶液,因細菌可使酒精產(chǎn)酸,導致假陽(yáng)性。
155.簡(jiǎn)述VP試驗實(shí)驗原理及主要用途。
答：有些細菌能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,再進(jìn)一步將丙酮酸脫羥變?yōu)橐阴＜谆状?span lang="EN-US">,在堿性環(huán)境中被空氣中的氧氧化為二乙酰,二乙酰與培養基內蛋白胨中精氨酸所含的胍基發(fā)生反應生成紅色的化合物。主要用于腸桿菌屬細菌的鑒別。沙雷氏菌、陰溝腸桿菌等VP反應陽(yáng)性,大腸埃希菌、沙門(mén)氏菌、志賀氏菌等VP反應陰性。
156.簡(jiǎn)述甲基紅試驗實(shí)驗原理及主要用途。
答：某些細菌能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,丙酮酸進(jìn)一步被分解為乳酸、乙酸、甲酸等,而使培養基pH下降,加入甲基紅指示劑出現紅色。
主要用于大腸埃希菌和產(chǎn)氣腸桿菌的鑒別。前者為陽(yáng)性,后者為陰性。
157.如何快速鑒別遲緩分解乳糖的細菌?
答：使用ONPG試驗即β-半乳糖苷酶試驗。如細菌只有β-半乳糖苷酶,而缺乏半乳糖苷滲透酶,用ONPG試驗可迅速取得陽(yáng)性結果。
158.簡(jiǎn)述苯丙氨酸脫氨酶主要鑒別作用及實(shí)驗結果判斷注意事項。
答：主要用于腸桿菌科細菌的鑒定,變形桿菌屬、摩根菌屬和普羅菲登菌屬均為陽(yáng)性,其他腸桿菌科細菌為陰性。
加入三氯化鐵試劑后必須立即判定結果,因綠色很快褪去。結果必須在5min內作出判定。
159.簡(jiǎn)述氨基酸脫羥酶試驗影響因素及注意事項。
答：應做對照管,如果對照管為陽(yáng)性,則所有氨基酸的脫羥酶試驗皆無(wú)效;如培養時(shí)間過(guò)長(cháng),指示劑破壞,顏色不清楚,可在試管中再加入溴甲酚紫來(lái)證實(shí)。
160.靛基質(zhì)試驗成功的關(guān)鍵是什么?
答：蛋白胨中必須含有色氨酸,否則會(huì )出現假陰性;色氨酸酶活性的最適pH為7.4-7.8,pH降低靛基質(zhì)產(chǎn)生減少,可能出現假陰性或弱陽(yáng)性反應;Kovac氏試劑(靛基質(zhì)試劑I)應保存于帶玻璃塞的棕色瓶中,放置時(shí)間不宜過(guò)長(cháng),否則其敏感度降低。
161.DNA酶的實(shí)驗原理及用途是什么?
答：DNA酶可將DNA長(cháng)鏈水解成由幾個(gè)單核苷酸組成的寡核苷酸鏈,寡核苷酸可溶于酸,故于DNA瓊脂平板上加入鹽酸,在菌落周?chē)纬赏该鳝h(huán)。
在腸桿菌科中沙雷菌和變形桿菌可產(chǎn)生DNA酶,陽(yáng)性球菌中只有金黃色葡萄球菌產(chǎn)生DNA酶,故可用此試驗做鑒別。
162.試舉例說(shuō)明克氏雙糖反應原理及應用。
答：克氏雙糖內葡萄糖和乳糖的比例為1:10。如果細菌只分解葡萄糖,不分解乳糖,則斜面上產(chǎn)生少量的酸,且易被氧化產(chǎn)生氨呈弱堿性,故斜面變?yōu)榧t色,底層變酸呈黃色,例如沙門(mén)菌。如果細菌分解葡萄糖和乳糖,產(chǎn)生大量的酸,底層和斜面均呈黃色,例如大腸埃希菌。如果細菌既不分解葡萄糖,也不分解乳糖則底層和斜面均不變色,例如銅綠假單胞菌。
163.為什么革蘭陰性桿菌都應做氧化酶試驗。
答：所有的陰性桿菌均應進(jìn)行氧化酶試驗,否則可能將陽(yáng)性的嗜水氣單胞菌錯誤地鑒定為大腸埃希菌或沙雷菌,將類(lèi)志賀鄰單胞菌錯誤地鑒別為宋內志賀菌,同時(shí)也會(huì )將某些非發(fā)酵菌作出錯誤鑒定。
164.簡(jiǎn)述造成過(guò)氧化氫酶假陽(yáng)性和假陰性的原因。
答：做過(guò)氧化氫酶試驗不宜用血瓊脂平板上的菌落,因紅細胞含有觸酶,會(huì )出現假陽(yáng)性反應,最好用營(yíng)養瓊脂或適宜培養基。
做觸酶試驗必須用18-24h的培養物,陳舊培養物可能失去觸酶活性,而出現假陰性。試驗用雙氧水必須新鮮配制,否則也易導致假陰性。
165.如何觀(guān)察硝酸鹽還原試驗的結果?
答：硝酸鹽還原試驗加入試劑后出現紅色為陽(yáng)性,如不出現紅色,需檢查硝酸鹽是否被還原,可再加入少許鋅粉,若出現紅色為陰性,不出現紅色為陽(yáng)性,若觀(guān)察有無(wú)氮氣產(chǎn)生,可加一倒管。
166.血漿凝固酶玻片法和試管法有何不同,陽(yáng)性結果的意義有何區別?
答：血漿凝固酶玻片法檢測的是凝聚因子(結合凝固酶),試管法檢測的是游離凝固酶。
玻片法陽(yáng)性:金黃色葡萄球菌。
試管法陽(yáng)性:金黃色葡萄球菌和中間葡萄球菌。
167.optochin試驗為何能鑒別肺炎鏈球菌,指出判斷標準?
答：幾乎所有的肺炎鏈球菌對乙基氫化羥基奎寧(optochin)敏感,而其他鏈球菌不敏感,故可用optochin敏感試驗加以鑒別:抑菌環(huán)>
168.試指出鑒別A群鏈球菌、B群鏈球菌、D群鏈球菌、肺炎鏈球菌、腸球菌最有代表性的鑒定試驗各-個(gè)。
答：A群鏈球菌:桿菌肽敏感試驗敏感;
B群鏈球菌:CAMP試驗陽(yáng)性;
D群鏈球菌:七葉苷試驗陽(yáng)性;
肺炎鏈球菌:optochin敏感試驗敏感;
腸球菌:膽汁七葉苷試驗陽(yáng)性、6.5%NaCl生長(cháng)試驗陽(yáng)性。
169.試述衛星現象的原理及應用價(jià)值。
答：流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在同一血瓊脂平板上培養,由于葡萄球菌能合成較多的V因子,可促進(jìn)流感嗜血桿菌生長(cháng),故在葡萄球菌周?chē)L(cháng)的流感嗜血桿菌菌落較大,離葡萄球菌菌落越遠則菌落越小,此現象稱(chēng)“衛星現象""。
170.常見(jiàn)存在Vi抗原的沙門(mén)菌有哪些,沙門(mén)菌Vi抗原在血清學(xué)鑒定的意義何在?
答：新分離的傷寒沙門(mén)菌和丙型副傷寒沙門(mén)菌常具有Vi抗原,存在于菌體最表層,可與Vi抗血清凝集而阻止O抗原與相應的抗血清發(fā)生凝集。Vi抗原不耐熱;若需確認0抗原的凝集,可在10O℃加熱30min破壞Vi抗原后,0抗原即可與相應抗體發(fā)生凝集反應。
171.簡(jiǎn)述全自動(dòng)血培養儀的主要組成部分及檢測的原理。
答：全自動(dòng)血培養儀主要組成為:
1培養基;2主機:帶有檢測系統的分析儀(半自動(dòng))或培養箱(全自動(dòng));3計算機機器外圍設備(全自動(dòng)):分析、打印、貯存資料。
血培養自動(dòng)化檢測系統的原理主要是根據細菌生長(cháng)繁殖時(shí)產(chǎn)生二氧化碳,通過(guò)各種手段檢測細菌生長(cháng)繁殖時(shí)產(chǎn)生的二氧化碳的量來(lái)判斷陰陽(yáng)性結果。
172.數碼鑒定技術(shù)如需7位數編碼,其編碼數字是如何確定的,同一細菌是否可出現不同編碼,為什么?
答：將全部反應每3個(gè)歸為一組,每組第一位反應陽(yáng)性時(shí)記作1,第二位反應陽(yáng)性時(shí)記作2,第三位反應陽(yáng)性時(shí)記作4,各種反應陰性時(shí)均記作0。再將每組3個(gè)反應得出的3個(gè)數字相加成一個(gè)數字,結果可能為0-7的任何一個(gè)數字,7位數編碼則應有21項生化試驗。同一細菌可出現不同編碼,因各種細菌不同株生化反應可不完全相同。
173.簡(jiǎn)述VITEK-AMS自動(dòng)細菌鑒定系統的組成及鑒定過(guò)程。
答：主要由稀釋分裝器、真空填料器、讀數器、孵箱、計算機和終端組成。
VITEK-AMS鑒定過(guò)程為制備細菌懸液、自動(dòng)填充卡片、培養及自動(dòng)測試、自動(dòng)顯示結果。
174.何謂臨床微生物學(xué)檢驗質(zhì)量控制?
答：臨床微生物學(xué)檢驗的質(zhì)量控制是保證細菌的直接涂片、培養、鑒定、藥敏試驗及血清學(xué)試驗等的準確性,避免因操作變化導致檢驗結果錯誤,造成誤診。當前臨床細菌檢驗主要是定性試驗,以手工操作為主,采用自動(dòng)化儀器少,加之研究對象是活的細菌,會(huì )受各種因素影響,因此必須控制各個(gè)環(huán)節的可變因素,使細菌檢驗保持在穩定水平。
175.微生物學(xué)檢驗的室內質(zhì)量控制主要包括哪幾個(gè)方面?
答：微生物學(xué)檢驗室內質(zhì)量控制包括:1對細菌檢驗人員的要求;2操作手冊;3儀器設備的功能監測;4培養基的質(zhì)量控制;5試劑、染色液及抗血清的質(zhì)量控制;6標本檢驗的質(zhì)量控制;7標準菌株的來(lái)源和保存及室內質(zhì)量的全面控制七個(gè)方面。
176.臨床微生物學(xué)檢驗操作手冊包括哪些內容?
答：臨床微生物學(xué)檢驗操作手冊應包括內容是:1實(shí)驗室的管理;2細菌檢驗項目;3處理標本指南;4細菌鑒定的最低要求;5試劑及染色劑配制;6培養基及其制備;7藥敏試驗;3實(shí)驗室的安全與防護;⑨室內及室間質(zhì)量控制;⑩參考數據。
177.臨床微生物室儀器設備的質(zhì)量控制標準?
答：臨床微生物室需要借助很多儀器設備對細菌進(jìn)行培養、保存和鑒定,對這些儀器設備是否處于正常運行狀態(tài)需要進(jìn)行質(zhì)量控制。常用儀器的質(zhì)控標準如下所示。 微生物室常用儀器質(zhì)量標準
設備 控制標準 允許范圍
高壓滅菌器
在孵育箱
水溫箱
冰箱
低溫冰箱
CO↓<2> 5%-10% ＜10%
178.室間質(zhì)評管理機構擔負的任務(wù)有哪些?
答：(1)給參控實(shí)驗室提供和發(fā)放模擬臨床標本或未知質(zhì)控菌種,即根據參控實(shí)驗室的能力制備相應的質(zhì)控培養物,也可以發(fā)放混有一定數量未知菌種的糞便、尿液等模擬標本。
(2)檢查參控實(shí)驗室工作人員在分離、鑒定模擬臨床標本中的致病菌過(guò)程中所存在的問(wèn)題。
(3)對參控實(shí)驗室的工作人員,通過(guò)對少見(jiàn)菌株的分離、鑒定,達到促進(jìn)提高的目的。
(4)介紹微生物檢驗方面的新理論、新方法和新技術(shù),使參控實(shí)驗室人員的知識不斷更新。
(5)幫助檢查參控實(shí)驗室室內質(zhì)控中存在的問(wèn)題,使其進(jìn)一步搞好室內質(zhì)控及實(shí)驗室管理。
(6)促進(jìn)培養基及試劑的商品化及標準化。
179.培養基的質(zhì)量控制包括哪些方面?
答：(1)操作卡:各微生物室應具備標準的培養基操作卡,內容包括培養基的成分,配制及注意事項。
(2)培養基的質(zhì)量要求:1配制記錄:應注明培養基原料的開(kāi)封日期、儲存條件、有效期、有否受潮結塊等。在配制每批培養基時(shí)應作配制記錄,內容包括培養基的名稱(chēng)、數量、配方、滅菌、分裝、貼標簽、配制日期、有效期等;2培養基外觀(guān)的檢查:觀(guān)察顏色和透明度是否正常,液體培養基是否澄清,固體培養基是否干裂及細菌生長(cháng),pH是否在規定的土0.2之內;3無(wú)菌試驗:凡以無(wú)菌手續分裝的培養基均應在
180.常用固體培養基的質(zhì)量控制標準有哪些?
答：常用固體培養基的質(zhì)控菌株及標準
培養基 質(zhì)控菌株 鑒定標準
營(yíng)養瓊脂 福氏志賀菌ATCC12022 中度到大量生長(cháng)
血瓊脂 金黃色葡萄球菌ATCC25923 中度到大量生長(cháng)
化膿性鏈球菌ATCC19615 生長(cháng),β-溶血
肺炎鏈球菌ATCC6305 生長(cháng),α-溶血
大腸埃希菌ATCC25922 生長(cháng)
巧克力瓊脂 淋病奈瑟菌ATCC43069 生長(cháng)
腦膜炎奈瑟氏菌ATCC13090 生長(cháng)
流感嗜血桿菌ATCC10211 生長(cháng)
麥康凱瓊脂 大腸埃希菌ATCC25922 生長(cháng),無(wú)色菌落
傷寒沙門(mén)菌ATCC14028 生長(cháng),紅色菌落
SS瓊脂 傷寒沙門(mén)菌ATCC14028 生長(cháng),無(wú)色菌落
福氏志賀菌ATCC12022 生長(cháng),無(wú)色菌落
TCBS培養基 霍亂弧菌ATCC9459 生長(cháng),黃色菌落
副溶血弧菌ATCC17802 生長(cháng),藍色菌落
大腸埃希菌ATCC25922 部分或全部抑制
沙保羅瓊脂 白色念珠菌ATCC10231 生長(cháng)
大腸埃希菌ATCC25922 部分或完全抑制
181.對液體培養基進(jìn)行質(zhì)量控制應從哪幾個(gè)方面考察?
答：液體培養基質(zhì)控應從二方面考察:
(1)接種極少量細菌即能在該培養基中生長(cháng)繁殖的能力。
(2)細菌生長(cháng)的快慢和多少。接種細菌經(jīng)孵育一定時(shí)間,觀(guān)察菌液的渾濁度。以此評價(jià)該液體培養基中細菌生長(cháng)的快慢及多少。
182.臨床微生物實(shí)驗室所用試劑、染色液質(zhì)量控制的要求?
答：(1)微生物實(shí)驗室所用各種試劑和染色液配制好后,應標明試劑或染色液的名稱(chēng)、配制日期、失效日期和配制者。
(2)每配一批試劑或染色液均應做性能試驗。包括已知陽(yáng)性和已知陰性標準菌株的測試符合要求方可使用。
(3)根據試劑或染色液本身的穩定性和使用頻數定期核查核對,對較穩定的試劑如靛基質(zhì)試劑應在配制時(shí)及每周予以檢測核對,凡不穩定的試劑如氧化酶或細胞色素氧化酶試驗用的鹽酸四甲基(或二甲基)對苯二胺溶液或觸酶試驗用H↓<2>02溶液,每天使用時(shí)均應檢測,合格后才能使用。
(4)對不穩定的試劑要注意保存方法,如三氯化鐵試劑避光保存,氧化酶試劑應避光低溫保存。此外,觸酶試劑、血漿、各種生物制品應置
183.使用細菌診斷血清應注意什么?
答：細菌診斷血清對鑒定確認細菌種類(lèi)是一種很重要的試劑,其有效質(zhì)量保證是關(guān)鍵。為此,對使用的診斷血清應有一套嚴格的管理措施。具體注意事項如下:
(1)用于診斷的各種抗血清購入時(shí)應記錄收到日期。觀(guān)察抗血清的透明度與色澤,如有混濁或絮狀沉淀,表示已被污染不能使用。
(2)使用各種抗血清時(shí)都應注意其效價(jià)和有效期,使用時(shí)先用已知陽(yáng)性及陰性菌株檢查是否符合標準。
(3)使用期間每3個(gè)月用標準菌株檢測其敏感性及特異性。
(4)各種診斷血清均應置冰箱中
184.微生物檢驗標本的采集和運送應注意哪幾個(gè)方面?
答：(1)采集時(shí)間:應在病程早期、急性期、癥狀典型時(shí)或用藥之前采集標本。
(2)根據不同目的采用不同的采集方法。
(3)除痰、大便、肛拭子、咽拭子等標本外,其他標本采集時(shí)均應無(wú)菌操作并盛于無(wú)菌容器內,采集量不得過(guò)少。
(4)最好是作床邊接種,必須傳送時(shí),可根據不同情況作保溫、冷藏、厭氧運送或將標本種入運送培養基內送檢。
(5)采集和運送標本時(shí)必須注意安全、防止污染及交叉感染。
185.厭氧菌和結核分支桿菌藥敏試驗的質(zhì)控菌株是什么?
答：厭氧菌藥敏試驗的質(zhì)控菌株是脆弱類(lèi)桿菌ATCC25285、多形類(lèi)桿菌ATCC29741、及產(chǎn)氣莢膜梭菌ATCC13124。
結核分支桿菌藥敏質(zhì)控菌株是NJH4292結核分支桿菌及NJH8328結核分支桿菌。
186.標準菌株應具備的條件及來(lái)源。
答：標準菌株必須是形態(tài)、染色反應、生理生化及血清學(xué)特性典型而穩定的菌株。實(shí)驗結果重復性好,極少發(fā)生變異,可用Bergey細菌鑒定手冊提供的典型特征來(lái)對照。
標準菌株可由專(zhuān)門(mén)機構供應,如美國典型菌種保藏中心ATCC(American Trpe Culture Collction)、我國衛生部藥品生物制品檢定所菌種保藏中心。
187.標準菌株的保存方法有幾種?各有什么特點(diǎn)?
答：標準菌株保存方法:為了保持標準菌株的最大活性,避免和減少細菌變異的機會(huì )可采用以下方法保存: `E4d[1]^jmQJ
(1)冷凍干燥法:應用冷凍干燥機凍干菌種的方法是最理想的保存方法?？杀３?span lang="EN-US">1
(2)冰凍保存法:此法較簡(jiǎn)單,將細菌混懸于脫纖維羊血或脫脂牛奶中,置液氮或
(3)培養基保存法:是最簡(jiǎn)易方便的方法,但易發(fā)生變異,有以下幾種方法:1普通瓊脂斜面保存法:適于一般細菌的保存,置
188.試述保存菌種所用培養基及期限?
答：臨床微生物實(shí)驗室常需保存某些菌種,不同的細菌應選擇不同的培養基進(jìn)行保存,表4-9為常用的菌種保存培養基及期限。 \kvZ/>G3xZ
表4-9 常用的菌種保存培養基及保存期限量
菌 種 培養基 保存期限(4
葡萄球菌、鏈球菌流感嗜血桿菌 血清斜面或血瓊脂高層(加液體石臘) 1-3個(gè)月
腸桿菌科細菌 Soybean酷蛋白瓊脂高層(加液體石臘) 1年
厭氧菌、兼性厭氧菌 皰肉培養基 2-3個(gè)月
分枝桿菌 羅氏培養基(加液體石臘) 3個(gè)月
189.藥敏實(shí)驗的質(zhì)量控制有哪幾個(gè)環(huán)節?
答：藥敏實(shí)驗質(zhì)控的主要環(huán)節是:
(1)培養基應選擇水解酪蛋白瓊脂,即Muller-Hinton(MH)培養基。要求pH為7.2-7.4,平板厚度為
(2)抗菌藥物紙片含量準確、合理使用和保存。
(3)菌量以麥氏管校正。
(4)以質(zhì)控菌株來(lái)控制測定方法的準確性和精密度。
190.指出金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎鏈球菌ATCC49619、流感嗜血桿菌ATCC49274、ATCC49766、淋病奈瑟菌ATCC49226、大腸埃希菌ATCC35218分別用于哪些菌的藥敏試驗質(zhì)控。
答：金黃色葡萄球菌ATCC25923:用于葡萄球菌和腸球菌;
大腸埃希菌ATCC25922:用于腸桿菌科細菌和弧菌;
銅綠假單胞菌ATCC27853:用于銅綠假單胞菌和不動(dòng)桿菌;
肺炎鏈球菌ATCC49619:用于肺炎鏈球菌和其他鏈球菌;
流感嗜血桿菌ATCC49274、ATCC49766:兩株分別用于流感嗜血桿菌不同的抗生素;
淋病奈瑟菌ATCC4926:用于淋病奈瑟菌;
大腸埃希菌ATCC35218:用于加酶抑制劑抗生素藥敏質(zhì)控。
191.何謂盲點(diǎn)檢測?有何意義?
答：由檢驗中心將已知質(zhì)控菌混合在臨床標本中,以病人的身份交到醫院細菌室作常規檢驗,使受試者不知標本的真實(shí)來(lái)源和內容。這種質(zhì)控試驗稱(chēng)為盲點(diǎn)試驗,最后由監控人員核對及評分。這種質(zhì)控調查方式能真實(shí)反映微生物室的檢驗質(zhì)量和技術(shù)水平,便于監控人員發(fā)現誤差和存在的問(wèn)題,指導和提高技術(shù)操作。
192.鑒定細菌的基本程序?
答：細菌鑒定的基本程序:1細菌形態(tài)學(xué)檢查;2細菌生長(cháng)特性;3生物化學(xué)試驗;4抗原構造及血清學(xué)診斷;5噬菌體及藥物敏感試驗;6毒力測定及動(dòng)物試驗。
193.細菌標本在培養前是否要做直接涂片鏡檢?為什么?
答：細菌標本在做培養前做直接涂片檢查有其必要性和重要性。1因涂片結果對選擇適宜的培養基具有指導意義;2對某些形態(tài)特殊的具有診斷意義的細菌可及早發(fā)現;3排除不合格的標本。
194.臨床微生物學(xué)檢驗室間質(zhì)量評價(jià)的檢查項目有哪些?
答：臨床微生物學(xué)檢驗室間質(zhì)量評價(jià)的檢查項目:
(1)儀器設備檢查。1各類(lèi)儀器操作卡;2高壓滅菌器的生物和化學(xué)控制指標;3溫度控制圖使用及校正記錄;4保養及維修;5清潔度;6損壞記錄。
(2)培養基、試劑、診斷血清的檢查 1配置方法、步驟、及注意點(diǎn),配制日期,性能試驗、配制者、標記及記錄;2培養基:外觀(guān)的清晰度、干燥、龜裂、pH是否符合要求,無(wú)菌試驗,使用標準菌株檢測結果的記錄,各類(lèi)培養基的儲存條件及方法,培養基的有效期;3診斷血清:各類(lèi)診斷血清的效價(jià)、有效期、定期使用監控菌株試驗敏感性及特異性的結果和保存方法;4試劑:各種生化反應試劑是否用已知陽(yáng)性陰性監控菌株測試,是否符合要求。
(3)各類(lèi)細菌標本檢驗的檢查 1操作卡;2操作是否正規,技術(shù)熟練程度,鑒定程序、主觀(guān)判斷能力以及血清學(xué)試驗是否設有陰性和陽(yáng)性對照。對檢驗中心發(fā)給的未知模擬標本,鑒定結果是否正確。
(4)藥敏實(shí)驗的檢查藥敏試驗用培養基、抗菌素藥物紙片及菌液濃度是否符合要求。
195.什么是抑菌環(huán)質(zhì)控范圍?
答：質(zhì)控菌株對定量含藥紙片顯示一定大小的抑菌環(huán),其環(huán)的大小用某數值范圍來(lái)表示,即質(zhì)控結果可能出現的最小和最大抑菌環(huán)直徑。此界限范圍有95%的可信性。抑菌環(huán)不允許超過(guò)界限范圍中間值上下二個(gè)標準差。一組質(zhì)控結果的抑菌環(huán)均值應接近上下限的中間值。
196.影響藥敏試驗擴散法的因素有哪幾方面?
答：影響藥敏試驗擴散法的因素有:
(1)培養基:1培養基的組成;2培養基的pH、厚度及保存。
(2)抗菌藥物紙片:1藥物紙片的制備;2藥物紙片的質(zhì)控;3藥物紙片的保存。
(3)菌液的濃度。
(4)紙片放入時(shí)間的控制。
(5)培養條件、溫度及時(shí)間。
(6)閱讀結果時(shí),對不典型的結果必須重復試驗來(lái)確定,如乙型溶血性鏈球菌A群對青霉素G應是敏感的,如是耐藥則為不典型結果。
197.如何對厭氧箱進(jìn)行質(zhì)量控制?
答：(1)厭氧箱的溫度質(zhì)控:檢測厭氧箱溫度表上反映的溫度與箱體內的溫度是否一致。應每日清晨定時(shí)觀(guān)察溫度并記錄,經(jīng)反復調試,使溫度達到一致且穩定,波動(dòng)范圍在
(2)厭氧箱及抽氣管道系統真空度的檢查:先將箱內各厭氧罐抽氣至負壓(-99.75kpa)將罐的閥門(mén)關(guān)閉緊,再抽管道系統至負壓。經(jīng)24-48h觀(guān)察有無(wú)隙氣,若仍為-99.75kpa為合格。
(3)催化劑:一般采用105脫氧催化劑鈀。
(4)氣體:一般采用混合氣體,即10%H↓<2>、10%C0↓<2>、80%N↓<2>的混合物,其純度分別為99.999%、99.999%、99.99%。
(5)厭氧狀態(tài)的檢查:可用無(wú)氧度指示劑美藍或刃天青。二者在無(wú)氧狀態(tài)下為無(wú)色,有氧狀態(tài)下美藍呈蘭色,刃天青為紅色。
198.簡(jiǎn)介藥敏試驗中“中介""的含義?
答：在NCCLS1998年關(guān)于藥敏試驗的最新資料中,對中介賦予了三個(gè)內容:
第一,對某藥中介的菌株,其MIC值接近于該藥的血液濃度或組織液濃度,與敏感的菌株相比,用該藥治療效果不好;第二,對于那些可以在某些部位濃集的藥物或者可以較大提高使用劑量的藥物,中介意味著(zhù)敏感;第三,中介作為一個(gè)緩沖域,用來(lái)防止微小的試驗誤差可能造成較大的錯誤結果,此點(diǎn)對于那些毒性較大的藥物尤為重要。經(jīng)過(guò)對中介重新定義,藥敏試驗不再使用“中度敏感""。須注意,“中介""指的是處于敏量感和耐藥之間,本身沒(méi)有程度的區分,所以不要誤寫(xiě)成“中介度""。
199.寫(xiě)出下列醫學(xué)檢驗中常用代號的英文全稱(chēng)和中文名稱(chēng)。
答：WHO:World Health Organization,世界衛生組織;
CDC:Center of Disease Control,美國疾病控制中心;
NCCLS:National Committee of Clinial Laboratory Standard,美國臨床實(shí)驗室標準化委員會(huì );
MRSA:Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌;
MRSE:Methicillin Resistant Staphylococus Epidermidis,耐甲氧西林表皮葡萄球菌;
MRCNS:Methicillin Resistant Coagulase Negative Staphulococcus,耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌;
VRE:Vancomycin Resistant Enterococus,萬(wàn)古霉素耐藥腸球菌;
PRP:Penicillin Resistant Pneumoniae,青霉素耐藥的肺炎鏈球菌;
MRS:Methicillin Resistant Staphylococcus,耐甲氧西葡萄球菌;
ESBLs:Extended-Spectrum β-lactamase,超廣譜β-內酰胺酶。
200.簡(jiǎn)述痰涂片染色檢查的種類(lèi)及其臨床意義?
答：痰涂片染色檢查的種類(lèi)及其臨床意義:(1)抗酸染色用于抗酸桿菌檢查,是確診肺結核最特異的方法。(2)革蘭染色用于一般細菌檢查,如葡萄球菌肺炎、雙球菌等。(3)瑞氏染色用于血細胞上皮細胞的鑒別。癌細胞檢查對肺癌的診斷具有重要價(jià)值。
201.簡(jiǎn)述L型細菌的形成、特點(diǎn)及臨床意義。
答：L型細菌的形成、特點(diǎn)及臨床意義:(1)形成:在某些因素如溶菌酶、青霉素等的影響下,細菌細胞壁肽聚糖合成受抑制,可使細胞壁部分或完全缺失,形成細胞壁缺陷型細菌,也稱(chēng)為L型細菌。(2)特點(diǎn):L型細菌形態(tài)不規則,大小不一,多呈球形,有時(shí)可呈巨球狀或長(cháng)絲狀;革蘭染色均呈陰性;需用高滲培養基培養。(3)臨床意義：臨床上由于抗菌藥物使用不當,可使病人體內細菌發(fā)生L型變異。某些L型細菌有致病性,可引起腎盂腎炎、骨髓炎、心內膜炎等疾病。
202.簡(jiǎn)述常見(jiàn)的細菌變異現象及其意義。
答：常見(jiàn)的細菌變異現象及其意義:(1)形態(tài)與結構變異:1細胞壁缺陷型(L型)變異:臨床上由于抗菌藥物用不當,可使病人體內細菌發(fā)生L型變異。某些L型細菌有致病性,可引起腎盂腎炎、骨髓炎、心內膜炎等疾病。2莢膜變異:例如從病人標本中分離的肺炎球菌有較厚的莢膜,致病性強,但在無(wú)血清的培養基中傳代數次后,可失去莢膜,致病性亦隨之減弱。3鞭毛變異:例如:將有鞭毛的變形桿菌接種在普通固體培養基表面,由于鞭毛的動(dòng)力作用,細菌呈彌散生長(cháng);若將此變形桿菌接種于含1%石炭酸的培養基中培養,則鞭毛生長(cháng)受抑制，生長(cháng)僅限于接種部位。4芽胞變異:例如將能形成芽胞,毒力強的炭疽桿菌置
203.何謂質(zhì)粒?其主要特性有哪些?
答：質(zhì)粒是細菌染色體外的遺傳物質(zhì),為雙股環(huán)狀DNA。質(zhì)粒主要有如下特性：1)質(zhì)?？少x予細菌某些遺傳性狀。例如:
204.簡(jiǎn)述細菌基因轉移與重組的四種方式。
答：細菌從外源取得DNA,并與自身染色體DNA進(jìn)行重組,引起細菌原有基因組的改變,導致細菌遺傳性狀的改變,稱(chēng)基因的轉移與重組?；蜣D移與重組的四種方式是:(1)轉化:受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段,從而獲得新的遺傳性狀,稱(chēng)為轉化。(2)轉導:以溫和噬菌體為載體,將供體菌的遺傳物質(zhì)轉移到受體菌中去，使受體菌獲得新的遺傳性狀,稱(chēng)為轉導。(3)接合:是指細菌通過(guò)性菌毛將遺傳物質(zhì)(主要為質(zhì)粒)從供體菌轉移給受體菌,使受體菌獲得新的遺傳性狀。(4)溶原性轉換:是由于溫和噬菌體的DNA(前噬菌體)整合到宿主菌的染色體DNA后,使細菌的基因型發(fā)生改變,從而獲得新的遺傳性狀,稱(chēng)為溶原性轉換。
205.試述Hfr、F’與F-菌的接合。
答：Hfr、F’與F-菌的接合:(l)Hfr與F-菌接合:F質(zhì)粒有時(shí)也可以整合到細菌染色體DNA上,與染色體一起復制。整合有F質(zhì)粒的細菌仍能形成性菌毛而且還能高效率轉移染色體DNA片段,故稱(chēng)之為高頻重組菌(high frequency recombinant ,Hfr)。當Hfr與F-菌接合時(shí),整合的F質(zhì)粒即啟動(dòng)染色體基因轉移,使Hfr菌染色體的一股DNA鏈經(jīng)性菌毛進(jìn)入F-菌。由于F質(zhì)粒位于轉移染色體的末端,因此只有當染色體的一股DNA鏈完全轉移后,F質(zhì)粒才能進(jìn)入F-菌。但接合過(guò)程常受外界因素的影響(如震動(dòng)使DNA鏈斷裂)而中斷轉移,故位于末端的F質(zhì)粒不易進(jìn)入F-菌。所以Hfr與F-菌接合后,F-菌雖可獲得供菌體不同長(cháng)度的染色體DNA片段,但因不能獲得F質(zhì)粒,故依然為F-菌。(2)F’與F－菌接合:Hfr中的F質(zhì)粒有時(shí)也可以從染色體上脫離下來(lái),使Hfr又成為F+菌。偶爾脫離下來(lái)的F質(zhì)?？蓭в幸欢稳旧wDNA 。這種帶有染色體DNA片段的F質(zhì)粒,稱(chēng)F’質(zhì)粒。當含有F’質(zhì)粒的細菌與F-菌接合時(shí),F-菌可獲得F’質(zhì)粒(即包括F質(zhì)?；蚣肮w菌染色體相應基因)。這種通過(guò)F’質(zhì)粒轉移供體菌基因的方式稱(chēng)為性導(sexduction)。
206.簡(jiǎn)述細菌生長(cháng)所需要的營(yíng)養物質(zhì)及其主要作用。
答：細菌生長(cháng)所需要的營(yíng)養物質(zhì)及其主要作用:(1)水:細菌代謝過(guò)程中所有的生化反應、營(yíng)養物質(zhì)的吸收和滲透壓的維持等均需有水才能進(jìn)行。(2)碳源:各種無(wú)機或有機的含碳化合物都能被細菌吸收利用,作為合成菌體所必需的原料及細菌代謝能量的主要來(lái)源。(3)氮源:主要用于合成菌體細胞質(zhì)及其他結構成分。(4)無(wú)機鹽:1構成菌體成分;2調節菌體內外滲透壓;3促進(jìn)酶的活性;4某些元素與細菌的生長(cháng)繁殖及致病作用密切相關(guān)。(5)生長(cháng)因子:某些細菌在其生長(cháng)過(guò)程中還需要一些自身不能合成的有機物質(zhì),稱(chēng)為生長(cháng)因子,包括:維生素、某些氨基酸、脂類(lèi)、嘌呤、嘧啶等。
207.簡(jiǎn)述細菌生長(cháng)繁殖的條件。
答：細菌生長(cháng)繁殖的條件有:(1)充足的營(yíng)養物質(zhì):包括水、碳源、氮源、無(wú)機鹽類(lèi)、生長(cháng)因子等。(2)適宜的酸堿度:大多數致病菌所需的最適pH為7.2～7.6。(3)合適的溫度:大多數致病菌所需的最適溫度為
208.細菌的酶在新陳代謝過(guò)程中有何作用?
答：細菌的新陳代謝是在酶的催化下進(jìn)行的。不同的酶系統決定細菌的代謝類(lèi)型、代謝產(chǎn)物及某些生理特性的差異。根據酶發(fā)揮作用的部位,細菌的酶可分為胞外酶及胞內酶。(1)胞外酶:是由細菌合成后分泌到細胞外的酶,主要是一些水解酶。環(huán)境中的營(yíng)養物質(zhì)分子較大,必須由胞外酶水解為小分子物質(zhì)后才能被細菌吸收。有些胞外酶具有致病效應,如血漿凝固酶、透明質(zhì)酸酶等。(2)胞內酶:是存在于細胞內發(fā)揮作用的酶,包括一系列呼吸酶以及與蛋白質(zhì)、多糖等代謝有關(guān)的酶。另外,細菌的酶有些是細菌生長(cháng)代謝中必需的,稱(chēng)為固有酶;而有些則是一般情況并不產(chǎn)生的酶,只有當環(huán)境中有誘導物存在時(shí)才產(chǎn)生,這些酶不是細菌所必需的,稱(chēng)為誘導酶。如金黃色葡萄球菌在青霉素存在時(shí)可誘導產(chǎn)生青霉素酶,可導致對青霉素的耐藥性。
209.簡(jiǎn)述細菌的合成代謝產(chǎn)物及其臨床意義
答：細菌的合成代謝產(chǎn)物及其臨床意義有:細菌通過(guò)新陳代謝不斷合成菌體成分,如多糖、蛋白質(zhì)、脂肪、核酸、細胞壁及各種輔酶等。此外,細菌還能合成很多在醫學(xué)上具有重要意義的代謝產(chǎn)物。(1)熱原質(zhì)。熱原質(zhì)即菌體中的脂多糖,大多由革蘭陰性菌產(chǎn)生,注入人體或動(dòng)物體內引起發(fā)熱反應,故名熱原質(zhì)。熱原質(zhì)耐高熱,可通過(guò)一般細菌濾器,.沒(méi)有揮發(fā)性,因此除去熱原質(zhì)最好的方法是蒸餾。制備生物制品和注射用水必須使用無(wú)熱原質(zhì)水。(2)內毒素與酶。細菌可產(chǎn)生內、外毒素及侵襲性酶,與細菌的致病性密切相關(guān)。內毒素即革蘭陰性菌細胞壁的脂多糖,其毒性成分為脂類(lèi)A,當菌體死亡崩解后才釋放出來(lái)。外毒素是由革蘭陽(yáng)性菌及少數革蘭陰性菌在生長(cháng)代謝過(guò)程中釋放到菌體外的蛋白質(zhì),具有抗原性強、毒性強、作用特異性強的突出特點(diǎn)。某些細菌可產(chǎn)生具有侵襲性的酶,損傷機體組織,促使細菌的侵襲、擴散,是細菌重要的致病因素,如鏈球菌的透明質(zhì)酸酶等。(3)色素。有些細菌能產(chǎn)生色素,對細菌的鑒別有一定意義。細菌色素有水溶性色素、脂溶性色素兩類(lèi)。(4)抗生素。有些微生物代謝過(guò)程中可產(chǎn)生一些能抑制或殺死某些其他微生物或癌細胞的物質(zhì),稱(chēng)抗生素?？股囟嘤煞啪€(xiàn)菌和真菌產(chǎn)生,細菌僅產(chǎn)生少數幾種。(5)細菌素。某些細菌能產(chǎn)生一種僅作用于近緣關(guān)系細菌的抗生素物質(zhì),稱(chēng)細菌素。細菌素的產(chǎn)生受質(zhì)?？刂?span lang="EN-US">,抗菌譜較窄。
210.簡(jiǎn)述細菌的培養方法及其條件。
答：細菌的培養方法及其條件:(1)細菌培養可分為分離培養及純培養兩種方法:1)細菌的分離培養。多用于從臨床標本中(混雜細菌)分離出某一特定的細菌(致病菌)。一般利用固體培養基(如選擇培養基)通過(guò)劃線(xiàn)方法接種,使標本中的細菌分散為單個(gè)生長(cháng)的菌落而獲得純種細菌。2)細菌純培養。多用于菌種傳代和細菌的擴增。取一個(gè)菌落接種于適當的液體培養基或固體培養基培養后,可獲得大量純種細菌。(2)條件:1選用適當的培養基。2提供必需的氣體環(huán)境。一般需氧菌及兼性厭氧菌置空氣中培養即可;專(zhuān)性厭氧菌則必須在嚴格無(wú)氧條件中培養。3溫度一般為
211.用于培養細菌的培養基,按其用途和物理性狀可分為哪些種類(lèi)?
答：培養基是人工配制的供細菌生長(cháng)繁殖需要的營(yíng)養基質(zhì)。根據培養基的性質(zhì)及用途,可分為以下幾類(lèi):(1)基礎培養基:基礎培養基含有大多數細菌生長(cháng)所需要的基本營(yíng)養成分。最常用的基礎培養基為肉浸液(常稱(chēng)為肉湯培養液)。(2)營(yíng)養培養基:營(yíng)養培養基是在基礎培養基中添加一些其他營(yíng)養物質(zhì)的培養基。根據細菌的營(yíng)養要求可加入血液、血清、葡萄糖、酵母浸膏、生長(cháng)因子等,如血瓊脂平板。(3)鑒別培養基:以鑒別細菌為目的而配制的培養基稱(chēng)鑒別培養基。利用不同細菌對糖、蛋白質(zhì)的分解能力及代謝產(chǎn)物的差別,在培養基中加入特定的底物成分,觀(guān)察細菌生長(cháng)時(shí)分解底物的情況,從而鑒別細菌。如伊紅美蘭培養基。(4)選擇培養基:在培養基中加入某種化學(xué)物質(zhì),能抑制某類(lèi)細菌生長(cháng),促使另一類(lèi)細菌生長(cháng),從而將后者選擇出來(lái),這種培養基稱(chēng)為選擇培養基。如SS瓊脂培養基。(5)厭氧培養基:厭氧菌的培養需在培養基中加入還原劑以降低培養基的氧化還原電勢,并以石蠟或凡士林封口,隔絕空氣。這種無(wú)氧環(huán)境的培氧基稱(chēng)為厭氧培養基,如皰肉培養基。培養基按其物理性狀分為固體、半固體及液體。
212.細菌在培養基中的生長(cháng)現象有哪些?
答：細菌在培養基中的生長(cháng)現象有:(1)固體培養基:細菌經(jīng)分離培養生成菌落,根據菌落特點(diǎn),可分為三型:1)光滑型菌落(S型菌落):新分離的細菌大多為光滑型菌落,表面光滑、濕潤,邊緣整齊。2)粗糙型菌落(R型菌落):菌落表面粗糙、干燥、有皺紋,有時(shí)呈顆粒狀,邊緣大多不整齊。3)黏液型菌落(M型菌落):多見(jiàn)于有肥厚莢膜或黏液層的細菌,菌落表面黏稠、有光澤,似水珠樣。(2)半固體培養基:多用來(lái)檢查細菌的動(dòng)力和保存菌種。有鞭毛的細菌可由穿刺線(xiàn)向四周運動(dòng)彌散,培養后穿刺線(xiàn)模糊不清,呈羽毛狀或云霧狀混濁生長(cháng);無(wú)鞭毛的細菌,不能運動(dòng),僅沿穿刺線(xiàn)生長(cháng),穿刺線(xiàn)以外的培養基仍透明澄清。(3)液體培養基:細菌生長(cháng)呈三種狀態(tài):1混濁生長(cháng):菌液呈混濁狀態(tài),見(jiàn)于多數細菌。2沉淀生長(cháng):細菌沉于管底形成沉淀,培養液上清較清。3菌膜生長(cháng)：多為專(zhuān)性需氧菌,在培養液表面生長(cháng),形成菌膜。
213.進(jìn)行細菌分類(lèi)和鑒別的生化檢測有哪些?
答：各種細菌因其具備的酶不完全相同,故在分解代謝過(guò)程中的產(chǎn)物亦有差異。通過(guò)生化實(shí)驗檢測細菌的分解代謝產(chǎn)物可對細菌進(jìn)行鑒定和分類(lèi)。實(shí)驗室常用的生化試驗有:1糖發(fā)酵試驗;2VP試驗;3甲基紅試驗;4吲哚（靛基質(zhì)）試驗;5枸櫞酸鹽利用試驗;6硫化氫試驗;7尿素分解試驗等。吲哚、甲基紅、vp、枸櫞酸鹽四種試驗縮寫(xiě)為IMViC試驗,大腸桿菌的IMViC結果為+ + - -,而產(chǎn)氣桿菌的IMViC結果為- - + +。
214.簡(jiǎn)述肽聚糖的主要結構及青霉素、溶菌酶對其的影響。
答：肽聚糖的主要結構及青霉素、溶菌酶對其的影響:肽聚糖,又稱(chēng)黏肽,是原核生物細胞的特有成分。它由三部分組成:1聚糖骨架由N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸交替排列,藉β－1,4糖苷鍵連接組成;2四肽側鏈連接于聚糖骨架上的N-乙酰胞壁酸分子上;3四肽側鏈之間由肽鏈(五肽交聯(lián)橋)或肽鍵交連構成交聯(lián)橋。由此三部分構成完整的肽聚糖分子結構。溶菌酶能水解聚糖骨架中的β－1,4糖苷鍵,青霉素可抑制五肽交聯(lián)橋與四肽側鏈上的D-丙氨酸之間的連接。二者均可破壞胞內抗高滲屏障,導致菌體膨脹、崩解。
215.簡(jiǎn)述細菌細胞壁的功能。
答：細胞壁的主要功能是:1維持細菌固有外形承受胞內高濃度無(wú)機鹽、氨基酸。核苷酸、糖等產(chǎn)生的高滲透壓,保護細胞膜的完整性;2細胞壁上遍布微孔,可容許水及直徑小于1nm的物質(zhì)自由通過(guò),與細胞膜共同完成菌體細胞內外物質(zhì)的交換;3其組成成分構成細胞的主要抗原決定簇，決定細菌的抗原性；4革蘭陰性菌的細胞壁上的脂多糖具有內毒素作用,是重要的致病物質(zhì)。
216.述細菌的基本結構。
答：細菌的基本結構是指所有細菌都具有的結構,由外向內分別是細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)和核質(zhì)。(1)細胞壁:是緊貼細胞膜外的一層堅韌富有彈性的結構,具有維持細菌固有形態(tài)、保護細菌、與細胞膜共同完成細菌細胞內外物質(zhì)交換、決定細菌的免疫原性等功能。G+菌細胞壁由黏肽和穿插于其內的磷壁酸組成。G-菌細胞壁由內向外依次由黏肽、脂蛋白、外膜、脂多糖等多種成分組成。(2)細胞膜:具有物質(zhì)交換、生物合成、呼吸、形成中介體等作用。(3)細胞質(zhì):為原生質(zhì),無(wú)色透明膠狀物。其內含有質(zhì)粒、核糖體及胞漿顆粒等有形成分。(4)核質(zhì):細菌僅有核質(zhì),無(wú)核膜和核仁,不存在核的形態(tài),故稱(chēng)核質(zhì)。核質(zhì)是細菌生命活動(dòng)所必需的遺傳物質(zhì)。
217.簡(jiǎn)述細菌的特殊結構及其功能。
答：并非所有細菌都具有的結構稱(chēng)為細菌的特殊結構,包括莢膜、鞭毛、菌毛和芽胞等。(1)英膜:是某些細菌細胞壁外面的一層由細菌分泌的黏液性物質(zhì)。它具有抗吞噬、抗溶菌酶、抗補體等作用,是細菌毒力因素之一。莢膜可用于細菌的鑒定和分型。(2)鞭毛:是某些細菌從胞質(zhì)內伸出到菌體外的細長(cháng)彎曲的蛋白絲狀物,它是細菌的運動(dòng)器官。某些細菌的鞭毛與致病性有關(guān)。有鞭毛的細菌又分為單毛菌、雙毛菌、叢毛菌和周毛菌。鞭毛抗原可用于細菌的鑒定和分型。(3)菌毛:是某些細菌表面比鞭毛細、短而直的絲狀物。又分為普通菌毛和性菌毛:前者數量多,可達數百根,與細菌粘附有關(guān),是細菌的致病因素之一;后者比前者稍長(cháng)而粗,數量少(1~4根),為中空管狀物,可傳遞遺傳物質(zhì)。(4)芽胞:是某些細菌在一定的環(huán)境條件下,胞漿發(fā)生脫水濃縮,在菌體內形成的一個(gè)折光性強、通透性低的圓形或橢圓形小體,為細菌的休眠狀態(tài)。它的結構復雜,對熱、干燥、化學(xué)消毒劑和輻射等都有很強的抵抗力。因此,臨床上以消滅芽胞為滅菌的標準。芽胞的形狀、位置、大小等可用于鑒別細菌。芽胞在適宜的條件下可發(fā)芽形成一個(gè)新的菌體(繁殖體)。
218.簡(jiǎn)述革蘭染色的主要步驟、結果及實(shí)際意義。
答：革蘭染色的主要步驟、結果及實(shí)際意義(1)革蘭染色的步驟:1)涂片、干燥、固定。2)染色:1初染:結晶紫染1分鐘;2媒染:盧戈氏碘液染1分鐘;3脫色:95%酒精;4復染:稀釋石炭酸復紅染1分鐘。(2)結果:革蘭陽(yáng)性菌呈紫色,革蘭陰性菌呈紅色。(3)意義:經(jīng)革蘭染色可將細菌分為G+菌和G-菌,有助于鑒定細菌、指導臨床選擇藥物,有助于研究和了解細菌的致病性等。
219.細菌的芽胞抵抗力強與哪些因素有關(guān)?
答：與細菌芽胞抵抗力強的有關(guān)因素有:1芽胞由多層致密膜狀結構構成,化學(xué)藥物和紫外線(xiàn)不易滲入;2芽胞含水量少,蛋白質(zhì)受熱后不易變性;3芽胞形成時(shí)能合成一些具有抗熱性的酶類(lèi);4芽胞核心和皮質(zhì)中含獨有的吡啶二羧酸,與耐熱性密切相關(guān)。芽胞發(fā)芽時(shí),該物質(zhì)由芽孢內滲出,耐熱性亦隨之喪失。
220.簡(jiǎn)述細菌細胞膜的主要功能?
答：細菌細胞膜的主要功能有:(l)物質(zhì)納泄:細胞膜具有選擇性通透作用,可選擇性地攝取營(yíng)養物質(zhì),排出代謝物。物質(zhì)納泄是細胞膜的主動(dòng)運轉過(guò)程,其中載體蛋白和酶類(lèi)物質(zhì)起重要作用。(2)生物合成:細胞膜上有多種合成酶,是細菌細胞生物合成的重要場(chǎng)所。肽聚糖、磷壁酸、磷脂、脂多糖、莢膜、鞭毛等多種菌體成分,都是在細胞膜上合成的。(3)呼吸作用:細胞膜上有多種呼吸酶,包括細胞色素和一些脫氫酶,可以運轉電子完成氧化磷酸化,參與細胞呼吸過(guò)程,與能量的產(chǎn)生、貯存和利用有密切關(guān)系。(4)形成中介體:中介體是細菌細胞膜內陷、折疊、卷曲形成的囊狀結構,多于革蘭陽(yáng)性細菌。中介體參與細菌的分裂又具有真核細胞線(xiàn)粒體的作用。
221.簡(jiǎn)述質(zhì)粒的正確定義及其特性?
答：質(zhì)粒是細菌染色體外的遺傳物質(zhì),為雙股環(huán)狀DNA。質(zhì)粒主要有如下特性：(1)可賦予細菌某些遺傳性狀:例如:
222.以革蘭染色的原理簡(jiǎn)述G+菌和G-菌細胞壁的化學(xué)組成。
答：以革蘭染色的原理簡(jiǎn)述G+菌和G-菌細胞壁的化學(xué)組成:(1)革蘭陽(yáng)性細菌細胞壁結構致密,肽聚糖層厚,脂質(zhì)含量少,乙醇不易透入,加入乙醇后細胞壁呈脫水狀態(tài),可阻止染料由細胞脫出。陰性細胞壁疏松,肽聚糖薄,且有脂多糖、外膜、脂蛋白等含脂類(lèi)成分,易被乙醇溶解,致使染料易于脫出。(2)革蘭陽(yáng)性細菌等電點(diǎn)低于陰性細菌,同一pH環(huán)境中所帶負電荷高于陰性細菌,故與帶正電荷的結晶紫結合量多而牢固,不易脫色,顯紫色,而陰性細菌則呈紅色。
223.微生物按其結構和組成可分幾類(lèi)?
答：微生物依據其結構及化學(xué)組成的不同分為:(1)非細胞型微生物:不具備細胞結構,必須在活的細胞內才能增殖。如病毒。(2)原核細胞型微生物:僅有核質(zhì),無(wú)核膜、核仁,缺乏細胞器。如細菌、衣原體、支原體、立克次體、螺旋體和放線(xiàn)菌。(3)真核細胞型微生物:有核膜、核仁與細胞器。如真菌。
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