慢病毒shRNA干擾載體系統是一種非常高效的,能穩定干擾各種哺乳動(dòng)物細胞靶基因表達的載體工具。一旦病毒基因組被逆轉錄成DNA并永久整合到宿主細胞基因組中,由人類(lèi)U6啟動(dòng)子驅動(dòng)表達的shRNA將會(huì )導致靶基因mRNA的降解。與合成siRNA相比,慢病毒干擾具有明顯的優(yōu)勢。
通過(guò)改造優(yōu)化,我們的慢病毒載體刪除了與病毒包裝和轉導相關(guān)的基因(這些基因由輔助質(zhì)粒進(jìn)行表達,用于病毒包裝過(guò)程),使產(chǎn)生的慢病毒顆粒是復制缺陷型的。即包裝的病毒只具有轉導靶細胞的能力,而無(wú)法在靶細胞中進(jìn)行大量復制,因而具有很高的生物安全性。
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