亚洲中文有码字幕日本_ 新冠檢測，如何控制核酸污染

來(lái)源：小桔燈網(wǎng)

臨近春節，《冬春季農村地區新冠肺炎疫情防控工作方案》要求返鄉人員需持7天內有效新冠病毒核酸檢測陰性結果返鄉，返鄉后實(shí)行14天居家健康監測，期間不聚集、不流動(dòng)，每7天開(kāi)展一次核酸檢測。此外，醫院與食品檢測機構也開(kāi)展了場(chǎng)地、食品、外包裝等的新冠核酸檢測，以監控新冠傳染途徑。

在大規模新冠核酸檢測中，出現了少量假陽(yáng)性的誤報。這些假陽(yáng)性報告會(huì )給新冠監控帶來(lái)錯誤的指導，一旦錯誤采取隔離/封閉措施，極大干擾相關(guān)企事業(yè)單位的正常運營(yíng)。檢測前后及處理花費的人力和物力也浪費社會(huì )資源，擠占了原本可用于正確防控的資源。

這些假陽(yáng)性結果大部分是由核酸污染造成的，其來(lái)源主要有：1、PCR產(chǎn)物污染；2、克隆質(zhì)粒污染；3、樣本污染；4、試劑污染。PCR會(huì )將極少量新冠基因進(jìn)行指數復制，操作不當時(shí)，這些被大量增值的新冠核酸會(huì )以氣溶膠形式被釋放出來(lái)，污染整個(gè)實(shí)驗室。在進(jìn)行質(zhì)?？寺『统樘釙r(shí)，高濃度質(zhì)粒容易以氣溶膠形式污染實(shí)驗室。采樣樣本處理/放置不當時(shí)，被其他樣本或氣溶膠污染。檢測試劑生產(chǎn)或使用不當時(shí)，被氣溶膠或其他方式污染。

（見(jiàn)擴展閱讀：美國CDC檢測試劑盒污染；滅活病毒暴露污染樣本；核酸檢測氣溶膠污染）

核酸污染預防：

1、設置合理的實(shí)驗室布局，一般可分為1）試劑準備區，2）樣本制備區，3）核酸擴增區，4）產(chǎn)物分析區，qPCR這類(lèi)不需要電泳分析的可將產(chǎn)物分析區與核酸擴增區合并。

2、每個(gè)步驟都在相應的實(shí)驗區進(jìn)行，每個(gè)區域內實(shí)驗器材、物品不能共用，每個(gè)區完全隔離和獨立通風(fēng)，控制空氣流動(dòng)方向。如條件不足，也必須將擴增區和分析區與試劑準備和樣本制備區隔離。最后廢棄物處理區必須遠離以上實(shí)驗區。

3、實(shí)驗人員、物料須嚴格單向流動(dòng)，即只能從準備區到擴展區和分析區，避免產(chǎn)生交叉污染。

4、定期進(jìn)行陰性質(zhì)控檢測，在大規模檢測時(shí)，必須添加陰性樣本，陰性對照品，無(wú)模板對照，保證出現污染時(shí)可立即發(fā)現。

5、使用封閉擴增的檢測方法，如熒光定量PCR，并在擴增完成后不能打開(kāi)試管。普通PCR和一些等溫擴增方法需要開(kāi)蓋，很容易產(chǎn)生氣溶膠污染。（Novoprotein 熒光定量PCR，Cat.E096/E094）

6、實(shí)驗管理操作嚴格規范：在通風(fēng)櫥/超凈工作臺操作，實(shí)驗前/后即時(shí)擦拭、清潔、消殺實(shí)驗臺，實(shí)驗中使用一次性手套，如有污染可能，立即替換手套，移液槍吸取液體輕柔，輕輕吹打，避免飛濺，打開(kāi)管蓋時(shí)動(dòng)作輕緩，漩渦震蕩后，離心甩下液滴。使用帶濾芯槍頭，避免液體被吸入移液槍?zhuān)袑?shí)驗物品盡可能提前分裝成小包裝，并預先滅菌和分裝好。實(shí)驗廢棄物統一處理。

7、使用dUTP+UDG酶防污染體系：在PCR中使用dUTP部分代替dTTP，使PCR產(chǎn)物中摻入U。在第二次PCR擴增前，使用UDG酶處理PCR反應液，可打斷上一次PCR產(chǎn)物中的U，使其無(wú)法污染第二次PCR擴增。（Novoprotein 熱敏UDG，Cat.E063）

核酸污染處理：

發(fā)現核酸污染，立即暫停相關(guān)實(shí)驗/檢測，對實(shí)驗場(chǎng)所、儀器設備進(jìn)行徹底的清潔/消殺/去核酸處理，更換相關(guān)試劑、耗材，實(shí)驗人員更換衣物并進(jìn)行核酸去除。

常用的核酸污染去除方法有：紫外照射、酒精擦拭、通風(fēng)等。紫外照射可打斷核酸，但對打斷小于200bp的片段效果不佳。酒精無(wú)法消化核酸，擦拭抹去表面核酸時(shí)容易殘留。通風(fēng)可將空氣中氣溶膠排出，但無(wú)法清除表面殘留，而且需要很長(cháng)時(shí)間。

因傳統的核酸污染去除方法并不能完全去除核酸污染，《醫療機構新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊（試行）》指出，為避免氣溶膠等核酸污染造成的檢測假陽(yáng)性，可采用核酸清除劑等試劑清除實(shí)驗室殘留核酸。

Novoprotein核酸污染去除劑（Cat.M126）降解所有核酸，完全清除掉核酸污染：

使用不同方法去除核酸污染，再進(jìn)行qPCR擴增檢測，M126完全消除核酸

M126完全消除DNA及RNA

核酸污染是實(shí)驗室、生產(chǎn)車(chē)間常見(jiàn)的污染事故，嚴重時(shí)會(huì )導致實(shí)驗室、生產(chǎn)車(chē)間封停整頓。在新冠疫情之下，每一個(gè)核酸檢測陽(yáng)性都會(huì )被極度重視，并采取更嚴格的處理措施，一旦相關(guān)單位被檢測出假陽(yáng)性，將面臨全面檢測排查和停業(yè)整頓以及人員隔離檢測，會(huì )嚴重影響相關(guān)單位的運營(yíng)，也浪費了疾控中心、檢測機構、排查/隔離/封鎖單位的人力和物力。所以必須重視核酸污染，并且采取切實(shí)有效的手段預防、控制和處理核酸污染。

相關(guān)產(chǎn)品：

熒光定量試劑：E096/E094

熱敏UDG酶：E063

核酸污染清除劑：M126

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