starseacow (站內聯(lián)系TA)
樓主提的問(wèn)題很好，以前也困惑了我很久，根據看過(guò)的一些資料，整理回答如下，希望有更專(zhuān)業(yè)的蟲(chóng)友指正：
首先，明確概念，總糖也可稱(chēng)為碳水化合物，它包括單糖，寡糖，多糖等等（其中有些單糖和二糖，由于分子中含有游離醛基或酮基，所以具有還原性，成為還原性糖，有一些專(zhuān)門(mén)的方法測定它們，如斐林試劑和班氏試劑法）。能溶于水和乙醇的糖稱(chēng)為可溶性糖（有的地方籠統的成為可溶性固形物），一般單糖和二糖都是可溶性糖。對于多糖，如纖維素，淀粉，幾丁質(zhì)之類(lèi)是不可溶性糖，果膠等是可溶性糖。
接下來(lái)，考慮硫酸蒽酮法的原理。蒽酮法本身，是利用蒽酮可以與游離的已糖或多糖中的已糖基、戊糖基及已糖醛酸起反應，反應后溶液呈藍綠色，在620nm處有最大吸收來(lái)進(jìn)行測定。蒽酮法只可用于可溶性糖的測定。而硫酸蒽酮法，在測定前，用硫酸使糖類(lèi)脫水生成糠醛以進(jìn)行測定，在這一過(guò)程中，淀粉、纖維素等不溶性多糖也在強酸下水解，形成單糖參加蒽酮反應。因此，使用硫酸蒽酮法，在不細致劃分各種碳水化合物的前提下，測定的結果可以認為是總糖。
幽幽深谷竹 (站內聯(lián)系TA)
2樓: Originally posted by starseacow at 2012-09-17 22:23:09
樓主提的問(wèn)題很好，以前也困惑了我很久，根據看過(guò)的一些資料，整理回答如下，希望有更專(zhuān)業(yè)的蟲(chóng)友指正：
首先，明確概念，總糖也可稱(chēng)為碳水化合物，它包括單糖，寡糖，多糖等等（其中有些單糖和二糖，由于分子中含 ...感謝這位蟲(chóng)友，本蟲(chóng)豁然開(kāi)朗??！祝實(shí)驗順利。
幽幽深谷竹 (站內聯(lián)系TA)
2樓: Originally posted by starseacow at 2012-09-17 22:23:09
樓主提的問(wèn)題很好，以前也困惑了我很久，根據看過(guò)的一些資料，整理回答如下，希望有更專(zhuān)業(yè)的蟲(chóng)友指正：
首先，明確概念，總糖也可稱(chēng)為碳水化合物，它包括單糖，寡糖，多糖等等（其中有些單糖和二糖，由于分子中含 ...再請教一下，硫酸苯酚法提取糖時(shí)，怎么加入的是鹽酸呢？確定不是硫酸?
starseacow (站內聯(lián)系TA)
苯酚硫酸法的原理實(shí)質(zhì)仍然是依靠酸水解多糖為單糖，并脫水生成糖醛衍生物，與苯酚反應進(jìn)行測定。根據最早原始文獻報道，該方法并不會(huì )用到鹽酸，直接硫酸水解脫水即可（見(jiàn)下文）。在提取多糖過(guò)程中，加入鹽酸和氫氧化鈉，應該是后來(lái)的一種改進(jìn)方案，我沒(méi)有查到這種改進(jìn)的來(lái)源，不過(guò)估計是利用鹽酸給多糖提供一個(gè)水解環(huán)境，再進(jìn)一步用硫酸脫水。使用這樣的兩種酸，可能與苯酚反應的某些性質(zhì)有關(guān)，樓主感興趣可以進(jìn)一步研究文獻或到化學(xué)區去問(wèn)問(wèn)。
Colorimetric Method for Determination of Sugars and Related Substances
Michel. DuBois , K. A. Gilles , J. K. Hamilton , P. A. Rebers , Fred. Smith
Anal. Chem., 1956, 28 (3), pp 350–356
http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=128047116roysdooz6y1dvt4
幽幽深谷竹 (站內聯(lián)系TA)
5樓: Originally posted by starseacow at 2012-09-18 16:43:02
苯酚硫酸法的原理實(shí)質(zhì)仍然是依靠酸水解多糖為單糖，并脫水生成糖醛衍生物，與苯酚反應進(jìn)行測定。根據最早原始文獻報道，該方法并不會(huì )用到鹽酸，直接硫酸水解脫水即可（見(jiàn)下文）。在提取多糖過(guò)程中，加入鹽酸和氫氧化 ...感謝！
幽幽深谷竹 (站內聯(lián)系TA)
5樓: Originally posted by starseacow at 2012-09-18 16:43:02
苯酚硫酸法的原理實(shí)質(zhì)仍然是依靠酸水解多糖為單糖，并脫水生成糖醛衍生物，與苯酚反應進(jìn)行測定。根據最早原始文獻報道，該方法并不會(huì )用到鹽酸，直接硫酸水解脫水即可（見(jiàn)下文）。在提取多糖過(guò)程中，加入鹽酸和氫氧化 ...我問(wèn)錯了，是蒽酮法提取總糖時(shí)，加入的是鹽酸，然后沸水浴。是這樣的嗎？
starseacow (站內聯(lián)系TA)
7樓: Originally posted by 幽幽深谷竹 at 2012-09-19 09:00:01
我問(wèn)錯了，是蒽酮法提取總糖時(shí)，加入的是鹽酸，然后沸水浴。是這樣的嗎？...總糖提取方法有很多種，硫酸蒽酮法只是個(gè)檢測手段，跟你用什么方法提取無(wú)關(guān)。最簡(jiǎn)單的方法，把樣品烘干粉碎后加水煮沸也可提取。
jsls (站內聯(lián)系TA)
2樓: Originally posted by starseacow at 2012-09-17 22:23:09
樓主提的問(wèn)題很好，以前也困惑了我很久，根據看過(guò)的一些資料，整理回答如下，希望有更專(zhuān)業(yè)的蟲(chóng)友指正：
首先，明確概念，總糖也可稱(chēng)為碳水化合物，它包括單糖，寡糖，多糖等等（其中有些單糖和二糖，由于分子中含 ...請問(wèn)，硫酸苯酚法和硫酸蒽酮法測定的糖中都包括纖維素嗎。如您帖子中所說(shuō)"在測定前，用硫酸使糖類(lèi)脫水生成糠醛以進(jìn)行測定，在這一過(guò)程中，淀粉、纖維素等不溶性多糖也在強酸下水解"，那么這兩種方法都用硫酸做前處理，是不是結果都包括了纖維素？
我看有些帖子中說(shuō)硫酸苯酚法測得的不包括纖維素，所以有此一問(wèn)。謝謝
starseacow (站內聯(lián)系TA)
9樓: Originally posted by jsls at 2012-10-02 09:09:34
請問(wèn)，硫酸苯酚法和硫酸蒽酮法測定的糖中都包括纖維素嗎。如您帖子中所說(shuō)"在測定前，用硫酸使糖類(lèi)脫水生成糠醛以進(jìn)行測定，在這一過(guò)程中，淀粉、纖維素等不溶性多糖也在強酸下水解"，那么這兩種方法都用 ...兩種方法都經(jīng)過(guò)硫酸處理，因此測定結果中都包含纖維素脫水生成的那部分糖。
jsls (站內聯(lián)系TA)
10樓: Originally posted by starseacow at 2012-10-02 16:12:05
兩種方法都經(jīng)過(guò)硫酸處理，因此測定結果中都包含纖維素脫水生成的那部分糖。...恩，謝謝，跟我想的一樣
嘟嘟才靖 (站內聯(lián)系TA)
是這樣的 硫酸蒽酮法其實(shí)原理是這樣的 利用硫酸將多糖分解為單糖，然后呢進(jìn)行測定 就是測定總糖，至于測定可溶性糖 需要選擇合適的提取方法 你如果用水或者80%醇提取 這樣提取的都是可溶性單糖和可溶性多糖 :tiger09:
夏天的風(fēng)雪兒 (站內聯(lián)系TA)
樓主能不能把1956年的文獻Colorimetric Method for Determination of Sugars and Related Substances
分享下，謝謝。。QQ1054079700
幽幽深谷竹 (站內聯(lián)系TA)
13樓: Originally posted by 夏天的風(fēng)雪兒 at 2013-04-17 22:38:34
樓主能不能把1956年的文獻Colorimetric Method for Determination of Sugars and Related Substances
分享下，謝謝。。QQ1054079700我目前不在學(xué)校，校外不好下載，等我回去了再說(shuō)吧
夏天的風(fēng)雪兒 (站內聯(lián)系TA)
:hand::hand:
xiaozhe026 (站內聯(lián)系TA)
2樓: Originally posted by starseacow at 2012-09-17 22:23:09
樓主提的問(wèn)題很好，以前也困惑了我很久，根據看過(guò)的一些資料，整理回答如下，希望有更專(zhuān)業(yè)的蟲(chóng)友指正：
首先，明確概念，總糖也可稱(chēng)為碳水化合物，它包括單糖，寡糖，多糖等等（其中有些單糖和二糖，由于分子中含 ...你好，我用苯酚硫酸法測定提取物中多糖含量，計算方面有些不懂。我做小麥麩皮中阿拉伯木聚糖的提取。麥麩經(jīng)過(guò)脫脂、去淀粉、去蛋白處理，然后乙醇沉淀得到阿拉伯木聚糖，采用地衣酚-鹽酸法測定提取物中阿拉伯木聚糖含量，苯酚-硫酸法測定提取物中總糖含量，以此計算阿拉伯木聚糖的純度。苯酚-硫酸法是先測定樣品提取液的吸光度，還要計算轉換因子，用的是精制糖（脫脂、去淀粉、去蛋白后乙醇沉淀的糖）來(lái)測定的，我提取的糖也相當于是精制糖了，那么不就沒(méi)法測定提取液的吸光度了?不知道可明白我的表述，有些混亂。
starseacow (站內聯(lián)系TA)
16樓: Originally posted by xiaozhe026 at 2013-07-20 15:03:16
你好，我用苯酚硫酸法測定提取物中多糖含量，計算方面有些不懂。我做小麥麩皮中阿拉伯木聚糖的提取。麥麩經(jīng)過(guò)脫脂、去淀粉、去蛋白處理，然后乙醇沉淀得到阿拉伯木聚糖，采用地衣酚-鹽酸法測定提取物中阿拉伯木聚糖 ...確實(shí)不明白，你的問(wèn)題到底是什么？
xiaozhe026 (站內聯(lián)系TA)
17樓: Originally posted by starseacow at 2013-07-20 15:29:40
確實(shí)不明白，你的問(wèn)題到底是什么？...額，好吧，就是計算問(wèn)題。
以一篇文獻為例：木瓜粉樣：精確稱(chēng)取野木瓜粉末0.2g，用80%乙醉浸泡過(guò)夜，索氏抽提器中用80%乙醉回流3h，以去除單搪、低聚糖、普類(lèi)及生物堿等成分。殘渣揮干乙醇后用蒸餾水抽提2h，反復洗至250ml容量瓶中，定容成樣品液。吸取樣品液0.5ml，測吸光度，按標準曲線(xiàn)和下式計算樣品中多糖的百分含量。多糖含量(%)=CxDxF/W。式中,C為樣品液中葡萄糖的濃度;D為樣品液的稀釋因素:F為換算因子;W為樣品的重量。換算因子的測定，精確稱(chēng)取干操至恒重的精制野木瓜多糖（樣品處理一脫脂—浸提一抽濾除渣一減壓濃縮一乙醇沉淀多糖—真空干燥—粗多糖—復溶—脫蛋白—離心分離—乙醉沉淀多糖一真空干燥—精制多糖）4mg，置于50ml容量瓶中，加水溶解至刻度。吸取上述溶液1.0ml，測定吸光度，求出此精制多糖中葡萄糖的濃度，按下式計算出換算因子F,F=w/(cxD)。式中,w為多糖重量(mg);C為精制多糖中葡萄糖的濃度(ug/ml)，D為多糖的稀釋因素。
以上是文獻中測定的方法。我做的是麥麩中的阿拉伯木聚糖，提出的阿拉伯木聚糖已經(jīng)過(guò)脫脂、去淀粉、去蛋白處理，然后乙醇沉淀的?，F在我想測提取物中的總糖含量，用苯酚-硫酸法。上面文獻中樣品多糖是直接提取的，沒(méi)經(jīng)過(guò)除蛋白等步驟，而且測得是提取液，我現在的提取物已經(jīng)除過(guò)蛋白、脂肪、淀粉等，而且是凍干的，那我要怎么計算呢？
xiaozhe026 (站內聯(lián)系TA)
17樓: Originally posted by starseacow at 2013-07-20 15:29:40
確實(shí)不明白，你的問(wèn)題到底是什么？...也就是說(shuō)，一般都是用苯酚硫酸法測定某種東西（如木瓜、無(wú)花果、油菜籽粉等）中的多糖含量，而我是測定提取物（阿拉伯木聚糖）中的總糖含量
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