甲狀腺疾病實(shí)驗室檢查
洪世華 柯瑞瓊
一. 甲狀腺激素測定和意義
甲狀腺激素包括甲狀腺素(T4)及三碘甲狀腺原氨酸(T3),前者全部由甲狀腺分泌,后者僅20%,直接來(lái)至甲狀腺,其余80%由T4在外周組織轉化而來(lái)。通常在人體循環(huán)中約99.98%T4與特異血漿蛋白結合,包括甲狀腺素結合球蛋白(TBG)、甲狀腺結合前白蛋白(TBPA)及白蛋白(Alb)。游離T4(FT4)僅占0.02%;體循環(huán)中99.7%與TBG結合,僅0.3%為游離狀態(tài)。
目前多采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法(chem ilum inescent im-munoassay CL IA)。將游離型激素與結合型激素進(jìn)行物理分離(半透膜等滲透析、熒光、柱層析等)后行高敏感免疫測定被認為是本測定的金標準,但技術(shù)復雜,測定成本昂貴,不能在臨床普遍使用。目前大多數臨床實(shí)驗室測定FT3和FT4所采用的方法并非直接測定游離激素,其測定結果在某種程度上仍受甲狀腺激素結合球蛋白濃度的影響,所以稱(chēng)之為“游離激素估計值(free hormone estimate)”。
血清中TT3和TT4的測定受TBG的影響,雌激素(如妊娠、避孕藥)、遺傳性TBG增多癥、病毒性肝炎可使TBG升高,雄激素、皮質(zhì)醇、遺傳性TBG缺乏癥和低蛋白血癥時(shí)TBG下降。血中存在的抗T3、抗T4 抗體可以干擾化驗結果,使之出現假性增高或降低(根據試驗方法)。采血時(shí)病人剛服用含T3的甲狀腺激素,可使T3的水平升高。服用抑制T4轉化為T3的藥物如丙基硫氧嘧啶、普萘洛爾、地塞米松、胺碘酮可影響T3值,使T3減少。另外許多嚴重全身性疾病也可有TT3降低(甲狀腺功能正常的病態(tài)綜合征 euthyroid sick syndrome ESS)。
理論上血清FT3和FT4測定不受TBG濃度變化影響,較TT3和TT4測定有更好的特異性。但循環(huán)中FT3及FT4含量甚微,測定結果的穩定性不如TT3、TT4,此外,目前臨床應用的任何一種檢測方法都不能直接測定真正的游離激素。血清TBG明顯異常、家族性異常白蛋白血癥、內源性T4抗體及某些非甲狀腺疾病均可影響FT4的測定。某些藥物也可影響FT4的測定,如胺碘酮、肝素的可使血清FT4增高;苯妥英鈉、利福平等可加速T4在趕在肝臟代謝,使FT4降低。
臨床應用和分析:⑴ 甲亢時(shí)多數情況TT3和TT4平行增高,甲減時(shí)平行下降,但在甲亢初期和復發(fā)早期TT3較TT4上升明顯,故更敏感,甲減時(shí)TT4較TT3更敏感。⑵ 在T3型甲亢時(shí)TT3和FT3增高,TT4和FT4正常,見(jiàn)于甲亢初期、復發(fā)早期和缺碘等情況。在T4型甲亢時(shí)TT4和FT4升高,TT3和FT3正常,多見(jiàn)于甲亢伴有嚴重疾病或碘甲亢。⑶ 低T3綜合征是由非甲狀腺疾病引起的TT3 和FT3降低,如腎衰竭、肝硬化、心肌梗死、嚴重的糖尿病、惡性腫瘤、結締組織病等。如疾病進(jìn)一步加重,TT4和FT4也可降低。
二.血清TSH測定意義
TSH檢測方法目前已發(fā)展至第4代,第3代TSH檢測方法現已進(jìn)入了臨床檢測實(shí)際應用階段,檢測技術(shù)不僅大大提高了檢測靈敏度,而且為了更好地評價(jià)測定結果。第1代TSH測定,主要采用放射免疫測定技術(shù)(Radioimmunoassay, RIA),該方法的最低測定值為1-2mIU/L,經(jīng)過(guò)方法學(xué)改進(jìn)后,最小測定值可達0.5mIU/L,但部分正常人的TSH水平(0.4-4.0mIU/L)仍低于0.5mIU/L,故不能區分甲亢和正常甲狀腺功能時(shí)的TSH差別,需結合TRH興奮試驗檢測結果作出診斷。TSH免疫放射分析法(Immunoradiometric assay, IRMA),被稱(chēng)為第2代TSH測定方法。由于該方法使用過(guò)量的標記抗體,可充分反映待測標本中的抗原量,提高了測定靈敏度,可用于診斷正常甲狀腺功能、甲亢和甲減。隨著(zhù)抗TSH單克隆抗體的成功制備,該方法的靈敏度可提高到0.1-0.2mIU/L,稱(chēng)為敏感TSH (sensitive TSH, sTSH)測定。TSH免疫化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)(Immunochemiluminometric assay, ICMA)作為第3代TSH測定方法,是將發(fā)光物質(zhì)標記在抗原或抗體上或作為酶催化底物,通過(guò)抗原抗體反應或酶促反應誘導發(fā)光,進(jìn)行測量發(fā)光強度的免疫分析方法。ICMA以標記方法的不同而分為兩種,即化學(xué)發(fā)光標記免疫分析法和酶標記、以化學(xué)發(fā)光底物作信號試劑的化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法。前者是用化學(xué)發(fā)光劑直接標記TSH抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標記的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)為吖啶酯類(lèi)化合物(Acridinium Ester, AE)?;瘜W(xué)發(fā)光酶免疫分析(Chemiluminescent Enzyme Immunoassay, CLEIA),以酶標記TSH抗原或抗體,進(jìn)行免疫反應,免疫反應復合物上的酶再作用于發(fā)光底物,用發(fā)光信號測定儀進(jìn)行發(fā)光測定。第3代靈敏度更高,達0.01-0.02mIU/L。第4代時(shí)間分辨免疫熒光測定技術(shù)(Time Resolved Immunofluorometric assay, TRIFMA)是八十年代初問(wèn)世的一項新型的超微量免疫分析技術(shù)。熒光的時(shí)間分辨技術(shù)是利用熒光發(fā)射體的熒光壽命差別,將其熒光分開(kāi)的熒光光譜技術(shù)。以鑭系元素為示蹤劑代替放射性同位素,用具有雙功能基團的鑭系元素來(lái)標記抗原或抗體,當解離下來(lái)的鑭系元素與特制的擴增液形成新的螯合物時(shí),其熒光明顯增強而持久。用延遲測量的辦法可消除樣品自身的本底熒光,從而大大提高檢測靈敏度,可達0.001 mIU/L。第3、4代測定法稱(chēng)為超敏感TSH(ultrasensitive TSH,uTSH)測定。目前國內普遍采用的是第2代和第3代方法,建議選擇3代以上的測定方法。
TSH的正常值為0.3-5.0 mIU/L,但如果嚴格篩選甲功正常志愿者,TSH正常值參考范圍在0.4-2.5 mIU/L,故許多專(zhuān)家建議將血清TSH上限降低到2.5 mIU/L,但內分泌界尚未達成共識。TSH值0.1~0.4 mIU/L老年人心房纖顫和心血管疾病危險性可能增加。TSH測定的臨床意義:1.增高:1)原發(fā)性甲減;2)
TSH分泌不適當綜合征(垂體TSH瘤和甲狀腺激素抵抗綜合癥);3)甲狀腺功能正常的病態(tài)綜合征(ESS)恢復期。2.減低:1)繼發(fā)性甲減;2)甲亢癥;3)肢端肥大癥;4)妊娠劇吐;5)藥物影響如糖皮質(zhì)激素等。
三.甲狀腺自身抗體測定
甲狀腺自身抗體臨床運用較多的是TPOAb、TgAb和TSH受體抗體(TRAb)。各個(gè)實(shí)驗室的檢測方法差異較大,建議采用英國醫學(xué)研究委員會(huì )(MRC)提供的國際參考試劑標化,以實(shí)現各個(gè)實(shí)驗室抗體測定結果的可比較性。
TPOAb測定:TPOAb對甲狀腺細胞具有細胞毒性作用,可引起甲減,主要用于診斷自身免疫性甲狀腺疾病。臨床運用:1)診斷自身免疫性甲狀腺疾病,如自身免疫性甲狀腺炎、Graves病等;2)TPOAb陽(yáng)性是干擾素α、白介素-2或鋰治療期間出現甲減的危險因素;3)TPOAb陽(yáng)性是胺碘酮治療期間出現甲狀腺功能異常的危險因素;4)TPOAb陽(yáng)性是Down綜合征患者出現甲減的危險因素;5)TPOAb陽(yáng)性是妊娠期間甲狀腺功能異?;虍a(chǎn)后甲狀腺炎的危險因素;6)TPOAb陽(yáng)性是流產(chǎn)和體外授精失敗的危險因素。
TgAb測定:一般認為TgAb對甲狀腺無(wú)損傷作用,臨床運用:1)自身免疫性甲狀腺疾病的診斷:意義與TPOAb基本相同;2)分化型甲狀腺癌(DTC):血清TgAb測定主要作為血清Tg測定的輔助檢查。因為血清中存在低水平的TgAb可以干擾Tg測定,視采用的Tg測定方法可引起Tg水平假性增高或降低。因此Tg測定時(shí)要同時(shí)測定TgAb。
TRAb測定:TRAb包括3個(gè)類(lèi)別:1)TSH受體抗體(狹義TRAb):TRAb陽(yáng)性提示存在針對TSH受體的自身抗體,但不能說(shuō)明該抗體具有什麼功能,Graves病患者存在TRAb一般視為甲狀腺刺激抗體(thyroid stimulating antibodies TSAb)。2)TSAb:是TRAb的一個(gè)類(lèi)型,Graves病的致病性抗體,GD病人血中TSAb陽(yáng)性檢出率可達60%—90%以上,該抗體陽(yáng)性說(shuō)明甲亢病因是Graves病。但是因為TSAb測定條件復雜,未能在臨床廣泛使用,而TSH 受體抗體(TRAb)測定已經(jīng)有商業(yè)試劑盒,可以在臨床開(kāi)展。所以在存在甲亢的情況下,一般都把TRAb陽(yáng)性視為TSAb陽(yáng)性。3)甲狀腺刺激阻斷抗體(thyroid stimulating blocking antibodies TSBAb):也是TRAb的一個(gè)類(lèi)型,具有阻斷TSH與受體結合而導致甲減的功能,是部分自身免疫性甲狀腺炎發(fā)生甲減的致病性抗體。臨床運用:1)Graves??;2)被作為判斷Graves病預后和抗甲狀腺藥物停藥的指標;3)可以通過(guò)胎盤(pán)導致新生兒甲亢,所以對新生兒甲亢有預測作用。
四.Tg 測定
Tg由甲狀腺濾泡上皮細胞分泌,是甲狀腺激素合成和儲存的載體。血清Tg水平升高主要與下列因素有關(guān):甲狀腺腫;甲狀腺組織炎癥和損傷;TSH、hCG或TRAb對甲狀腺刺激。
Graves甲狀腺功能亢進(jìn)(甲亢)病人由于TRAb的刺激,幾乎所有病人的Tg是升高的,少數人血清Tg不高或者低下,可能由于TGAb的影響,甲亢治療后Tg恢復正常。一些難治性甲亢,即使T4、T3正常,但血清Tg也保持在高水平。血清Tg和TRAb及甲亢復發(fā)之間的關(guān)系并不十分密切。甲亢手術(shù)后第1天Tg達峰值,數月后下降到正常;同位素治療后,Tg升高可達1~3個(gè)月。Plummer甲亢、亞急性甲狀腺炎、無(wú)痛性甲狀腺炎病人的血清Tg都升高,外源性甲狀腺激素藥物引起甲亢病人的Tg低下。 甲狀腺分化癌手術(shù)前血清Tg值對診斷沒(méi)有意義,因為非甲狀腺癌的甲狀腺疾病病人血Tg也可以升高,而甲狀腺癌病人的血Tg也可以正常。甲狀腺分化癌手術(shù)前血Tg水平和腫瘤大小成正相關(guān)。 手術(shù)后血Tg陽(yáng)性提示腫瘤復發(fā)或轉移?;A血Tg和TSH刺激后Tg的測定有利于發(fā)現有無(wú)甲狀腺組織?;ATg測不到,表示沒(méi)有甲狀腺組織;基礎Tg陽(yáng)性,對TSH反應差,表明有分化不好的腫瘤;基礎Tg陽(yáng)性,TSH反應好,表明有剩余甲狀腺組織或者有甲狀腺分化性癌存在。當血清TSH濃度低下時(shí),Tg值對判斷腫瘤復發(fā)可能不夠敏感,需要停止左旋T4(L-T4)治療數周,待血清TSH升高后再測定Tg。有正常甲狀腺患者的血Tg對TSH反應增加10倍以上,分化好的甲狀腺癌病人可以增加3倍以上。停止服用L-T4會(huì )引起病人不適,同時(shí)可能會(huì )使腫瘤復發(fā)和轉移。臨床運用:1)分化型甲狀腺癌(DTC)復發(fā)監測;2)非甲狀腺腫瘤疾?。涸u估甲狀腺炎的活動(dòng)性及診斷口服外源甲狀腺激素所致的甲狀腺毒癥。
五.降鈣素測定
降鈣素(calcitonin,CT)是由甲狀腺C細胞分泌的。甲狀腺C細胞胞體較大,呈圓形、卵圓形或不規則形,單個(gè)嵌在甲狀腺濾泡壁上,貼近基膜,或成群散在濾泡間組織中,又稱(chēng)濾泡旁細胞,是神經(jīng)內分泌細胞,和甲狀腺濾泡細胞無(wú)關(guān)。甲狀腺髓樣癌(MTC)實(shí)際上并非甲狀腺癌,1959年由Hazand等首先提出作為一個(gè)獨立臨床病理類(lèi)型,它只占甲狀腺腫瘤一小部分(約占3-12%)。根據是否具有遺傳性,MTC可分為散發(fā)性和遺傳性?xún)纱箢?lèi):.散發(fā)性MTC:臨床上最多見(jiàn),約占MTC的75- 80%,多為中老年,女性稍多;遺傳性MTC:臨床上較少見(jiàn),約占MTC的20- 25%,發(fā)病年齡較散發(fā)性MTC提前10-20年左右,男女發(fā)病率無(wú)差異,一個(gè)家族中可以同時(shí)或先后有多人患病。又細分為以下3種類(lèi)型:多發(fā)性?xún)确置谙倭?span lang="EN-US">2A(MEN2A):占所有遺傳性MTC80%,此型會(huì )同時(shí)發(fā)生MTC、嗜鉻細胞瘤和甲狀旁腺增生;多發(fā)性?xún)确置谙倭?span lang="EN-US">2B(MEN2B):無(wú)甲狀旁腺疾病,以粘膜多發(fā)性神經(jīng)瘤伴MTC和(或)腎上腺嗜鉻細胞瘤為特點(diǎn),是遺傳性MTC中惡性程度最高的類(lèi)型;家族非多發(fā)性?xún)确置谙倭鲂?span lang="EN-US">MTC(FMTC):此型被認為是MEN2A的一種變異類(lèi)型,MTC是其唯一的特征,是遺傳性MTC中惡性程度最低的類(lèi)型。
降鈣素是MTC最重要的腫瘤標志物,并與腫瘤大小呈陽(yáng)性相關(guān),建議采用雙位點(diǎn)免疫測定。臨床上主要運用于:協(xié)助診斷MTC及MTC術(shù)后隨訪(fǎng)監測。但MTC外疾病也可引起降鈣素升高,包括1)小細胞肺癌、支氣管和腸道類(lèi)癌及所有神經(jīng)內分泌腫瘤;2)良性C細胞增生,見(jiàn)于自身免疫性甲狀腺疾?。虮炯谞钕傺谆?/span>Graves?。┘胺只图谞钕侔?;3)其他疾?。簢乐啬I功能不全、高胃酸血癥、高鈣血癥、急性肺炎、局部或全身膿毒血癥等。
六.過(guò)氯酸鉀排泌試驗
在正常人,高氯酸離子(ClO4-)易被甲狀腺濾泡細胞的胞膜所攝取,如在給示蹤量的放射性碘60~120分鐘后,再給以過(guò)氯酸鉀10毫克/千克(或250毫克/m2)口服,則它可迅速阻滯甲狀腺對放射性碘的攝取,因而在5~10分鐘內使甲狀腺吸取放射性碘的曲線(xiàn)變平。若患者存在碘的有機化系統的缺陷,則無(wú)機碘即在甲狀腺細胞內發(fā)生聚集。當高氯離子進(jìn)入甲狀腺細胞后,即將細胞聚集的未被有機化的碘離子置換“驅逐”出來(lái),因而發(fā)生碘的“排泌”現象。但是在正常人的甲狀腺細胞,于攝取了無(wú)機碘以后,因迅速發(fā)生有機化作用,轉變?yōu)榈饫野彼?,而無(wú)明顯無(wú)機碘的聚積。因而不會(huì )發(fā)生碘的“排泌”現象。臨床上主要用于了解甲狀腺內碘的有機化是否有障礙,對先天性甲狀腺過(guò)氧化物酶障礙有診斷意義,對慢性甲狀腺炎診斷有輔助意義。
七.尿碘測定
人體攝入的碘主要儲存在甲狀腺池及細胞外液池,大部分是通過(guò)腎臟排泄。碘的代謝始終保持動(dòng)態(tài)平衡,所以測定尿碘可以評估機體碘攝入量,國際上規定采用學(xué)齡兒童的尿碘反應地區的碘營(yíng)養狀況。
八.促甲狀腺激素釋放激素(TRH)刺激試驗
促甲狀腺激素釋放激素(thyrotropin-releasing hormone TRH)由下丘腦分泌的一種三肽,其生理功能是通過(guò)一系列途徑使垂體前葉細胞內儲存的TSH釋放,血中TSH及T3、T4含量增高。本試驗主要了解甲狀腺病變部位,病變發(fā)生在甲狀腺還是垂體或下丘腦。
試驗方法:TRH200ug-400ug(一般500ug可達到最大刺激作用)5min內靜脈注入。分別在注射前注射后15、30、60、120min采血測定TSH。正常情況下,血清TSH在注射后20-30min達到高峰,達到10-30mIU/L,平均增加12mIU/L。2-3小時(shí)返回至基線(xiàn)水平。結果:1)甲亢時(shí)TSH無(wú)分泌,呈現一條低平曲線(xiàn);2)原發(fā)性甲減時(shí),因為基值較高,呈現一條高平曲線(xiàn);3)中樞性甲減:下丘腦性甲減,TSH分泌曲線(xiàn)呈現高峰延緩出現(出現在注射后的60-90min),并持續高分泌狀態(tài)至120min;垂體性甲減,TSH反應遲鈍,呈現一條低平曲線(xiàn)(增高小于2倍或者增加≤4.0mIU/L);4)垂體TSH腫瘤時(shí),TSH分泌不增加。
九.甲狀腺穿刺細胞學(xué)檢查
甲狀腺穿刺常用于經(jīng)多種檢查后仍難以確診的某些甲狀腺疾病。通常包括穿刺活組織檢查和穿刺細胞學(xué)檢查。此方法是用細小的針頭刺入甲狀腺的病灶內,抽取出少量細胞,通過(guò)顯微鏡了解細胞的性質(zhì)并作出診斷。此檢查對橋本氏甲狀腺炎,亞急性甲狀腺炎,甲狀腺良,惡性腫瘤具有重大的鑒別診斷意義。但甲狀腺穿刺檢查有時(shí)會(huì )出現假陽(yáng)性或假陰性等誤診,因為其診斷的準確性與取樣的部位關(guān)系密切,一般而言,有經(jīng)驗的病理工作者作出的診斷正確率可達80%以上。但良性濾泡細胞或Hurthle細胞瘤與低度惡性濾泡細胞或Herthle細胞癌細胞學(xué)特征相似,上述病變只能靠手術(shù)標本病理學(xué)檢查是否存在包膜或血管來(lái)加以區別。
十.甲狀腺超聲檢查
甲狀腺超聲檢查主要用于:⑴可作為甲狀腺大小及容積的測定。⑵鑒別甲狀腺結節為實(shí)質(zhì)性還是囊性,且可確定腫塊的部位、大小及深度。如超聲顯示腫塊內含液體,囊壁薄而光滑,則惡性腫瘤的可能性很小,可在超聲引導下穿刺抽吸囊液治療。⑶可檢出孤立性結節或多發(fā)性結節,并測量結節的大小。⑷協(xié)助鑒別甲狀腺的良、惡性腫瘤,可以觀(guān)察有無(wú)鈣化,以及腫塊的血流情況,頸部淋巴結有無(wú)腫大轉移,以此為診斷良、惡性腫瘤提供參考,有密集鈣化和血流豐富者有惡變可能。對甲狀腺癌術(shù)后患者,可發(fā)現不能捫及的復發(fā)或轉移病灶。
十一。甲狀腺核素檢查
甲狀腺攝131I功能試驗:利用甲狀腺有濃集碘的功能,讓病人服用一定放射活性的放射性碘,在不同時(shí)間測定甲狀腺區域的放射活性,通過(guò)了解甲狀腺吸碘有能力來(lái)了解甲狀腺的功能。此方法受藥物、食物中碘有影響較大。由于甲狀腺激素測定的普遍開(kāi)展及TSH檢測敏感度的提高,甲狀腺131I攝取率已不作為甲亢診斷的常規指標。T3抑制試驗也基本擯棄。但有時(shí)它仍然不失為甲狀腺功能檢查的一個(gè)有效的方法。特別是甲狀腺131I攝取率對甲狀腺毒癥的原因仍有鑒別意義。甲狀腺功能本身亢進(jìn)時(shí),131I攝取率增高,攝取高峰前移(如Graves病,多結節性甲狀腺腫伴甲亢等);破壞性甲狀腺毒癥時(shí)(如亞急性甲狀腺炎、安靜型甲狀腺炎、產(chǎn)后甲狀腺炎等)131I攝取率降低。采取131I治療甲亢時(shí),計算131I放射劑量需要做本試驗。試驗前停食含碘豐富的食物(海帶、紫菜等)2-4周,停用含碘藥物2-8周,停用影響甲狀腺功能的藥物(如抗甲狀腺藥、L-T4、甲狀腺片等)2-4周。
甲狀腺核素靜態(tài)顯像:臨床上運用放射性核素(99TcmO4、131I或123I)來(lái)判斷甲狀腺結節性質(zhì)及特征,根據結節攝取核素能力的不同可分為熱結節、溫結節和冷結節。熱結節:是結節部位顯影劑高度濃集,明顯高于正常甲狀腺組織。單發(fā)“熱結節”周?chē)谞钕俳M織功能被抑制,可表現為完全不顯像或不同程度的部分顯影。當周?chē)谞钕俳M織完全不顯影時(shí),應與先天性單側甲狀腺(左葉未發(fā)育者居多)鑒別??梢宰⑸?/span>99Tcm
-甲氧基異丁基異腈(MIBI)后再行甲狀腺顯像,如對側甲狀腺顯像清晰,則可確診為自主功能性腺瘤。溫結節:結節部位顯影濃度與正常相應部位
十二。甲狀腺CT及MRI檢查
CT及MRI 對甲狀腺結節性質(zhì)的判斷并不優(yōu)于甲狀腺超聲檢查,目前CT及MRI對于甲狀腺腫瘤的主要診斷價(jià)值在于明確腫瘤的范圍、有無(wú)淋巴結轉移,在復發(fā)或晚期甲狀腺癌病人有鄰近臟器(如氣管、食管、頸部血管、神經(jīng)等)侵犯或出現轉移時(shí),則要明顯優(yōu)于超聲檢查。還可了解胸腔內甲狀腺情況,區別甲狀腺和非甲狀腺來(lái)源的縱膈腫瘤。眼眶CT和MRI檢查可清晰顯示Graves眼病患者球后組織,尤其是眼外肌腫脹的情況,對非對稱(chēng)性突眼(單側突眼)有助于排除眶后腫瘤。
十三。PET(正電子發(fā)射計算機斷層掃描)及PET-CT
PET及PET-CT是一項較新的影像學(xué)檢查手段。PET使用一種類(lèi)似葡萄糖的示蹤劑(18F-FDG),可用于體外定位診斷腫瘤組織,尤其是對惡性腫瘤術(shù)后的全身監測。對甲狀腺癌的診斷(尤其是術(shù)前)目前較困難,但在判斷腫瘤組織與臨近器官的關(guān)系或淋巴結轉移時(shí)敏感性則要高于CT和MRI。
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